应用于组织工程的细胞三维培养方法技术

技术编号:1715789 阅读:231 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种应用于组织工程的细胞三维培养方法。本发明专利技术属于组织工程领域,该方法将100-500IU/mL工作浓度的凝血酶和20-60mmol工作浓度的氯化钙等催化剂添加在各种生物支架材料中,以含10-50mg/mL工作浓度的血纤维蛋白原和10-50U/mL工作浓度的ⅩⅢ因子的培养基悬浮各种细胞,利用血凝固的原理,使细胞均匀接种在各种支架材料中,获得细胞-支架材料-纤维蛋白凝胶三维培养系统。利用这种方法,可获得良好的三维培养细胞,构建出各种工程化组织。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种应用于组织工程的细胞三维培养方法,其特征是,包括下述步骤:(1)首先将100-500IU/mL工作浓度的凝血酶和20-60mmol工作浓度的氯化钙添加在支架材料中,(2)接着将10-50mg/mL工作浓度的血纤维蛋白原和10-50U/mL工作浓度的ⅩⅢ因子溶解在哺乳动物细胞培养用的液体培养基中,(3)然后将1×10↑[7]-2×10↑[8]/mL浓度的细胞添加在上述液体培养基中并充分混匀细胞,(4)再将上述细胞悬液接种在上述步骤(1)的支架材料中,细胞悬液在5-20秒内凝固,形成细胞-支架-血纤维蛋白凝胶三维复合体,(5)37℃下放置1小时完全凝固后,添加上述液体培养基在5%二氧化碳的培养箱中培养该复合体,每1-2天换一次液体培养基,即得细胞的三维培养复合体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:郭勇张西正李瑞欣魏严张永红
申请(专利权)人:中国人民解放军军事医学科学院卫生装备研究所
类型:发明
国别省市:12[中国|天津]

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