利用金磁微粒分离mRNA的方法技术

技术编号:1712007 阅读:232 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及生物技术领域,尤其是涉及一种利用金磁微粒分离mRNA的方法。其技术解决方案为:该方法包括以下步骤:1)链亲和素-金磁微粒的制备;2)将生物素标记的oligo(dT)探针和链亲和素-金磁微粒混合,通过链亲和素-生物素的结合,将生物素化的oligo(dT)探针固定于磁粒表面,作为反应和分离的固相载体;3)使oligo(dT)探针和mRNA  polyA发生特异性杂交,磁性分离,弃上清;4)加入清洗缓冲液清洗磁粒,除去杂质;5)加入洗脱缓冲液,洗脱mRNA。本发明专利技术具有成本低廉、简便、分离快捷的优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用金磁微粒分离mRNA的方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:1)链亲和素-金磁微粒的制备;1.1)取金磁微粒,以偶联缓冲液平衡1~3次,按20~500μg/(mg磁粒)的比例加入链亲和素,在20~40℃的条件下充分混匀,反应5min~2h,用清洗缓冲液清洗,除去未结合的链亲和素,加入保存缓冲液保存备用;2)将生物素标记的oligo(dT)探针和链亲和素-金磁微粒混合,通过链亲和素-生物素的结合,将生物素化的oligo(dT)探针固定于磁粒表面,作为反应和分离的固相载体;2.1)取链亲和素-金磁微粒,以偶联缓冲液平衡1~3次,按0.5~6nmol/(mg磁粒)加入生物素标记的oligo(...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:崔亚丽陈超张战凤于桉
申请(专利权)人:陕西西大北美基因股份有限公司
类型:发明
国别省市:87[中国|西安]

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