一株降解河道底泥中硝基苯的微球菌的培养方法技术

一株降解河道底泥中硝基苯的微球菌的培养方法，本发明专利技术首先设计一种富集分离培养基，从河道底泥中分离出一种硝基苯优势降解细菌并进行纯化培养，其具体步骤为：１．配制富集分离培养基；２．富集分离培养；３．配制纯化培养基；４．纯化培养；５．配制扩大繁殖培养基；６．扩大增殖培养。本发明专利技术首次从河道底泥中筛选出对硝基苯具有特异降解能力的微球菌。该位球菌的筛选、分离、纯化和扩大培养方法简单、可靠，各培养基的组分易得、配制方便。利用所获微球菌直接降解河道底泥中的硝基苯，可缩短传统治理工艺流程、缩减成本，提高效率，为开发硝基苯污染河道底泥的原位微生物修复新技术提供了可能。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一株降解河道底泥中硝基苯的微球菌的培养方法，其特征是：本专利技术首先设计一种富集分离培养基，从河道底泥中分离出一种硝基苯优势降解细菌并进行纯化培养，其具体步骤如下：（１）、配制富集分离培养基：富集分离培养基由ＮａＣｌ、Ｋ↓［２］ＳＯ↓［４］、ＭｇＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ、维生素Ｂ、硝基苯和水组成，ｐＨ为７．０－７．２，先准备５个三角瓶，分别标记为Ａ瓶、Ｂ瓶、Ｃ瓶、Ｄ瓶和Ｅ瓶，每个瓶都装等量的富集分离培养基，其中ＮａＣｌ、Ｋ↓［２］ＳＯ↓［４］、ＭｇＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ和维生素Ｂ的含量是固定的，它们是（质量百分比）：０．５％ＮａＣｌ，０．８％Ｋ↓［２］ＳＯ↓［４］，０．５％ＭｇＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ，０．０１％维生素Ｂ，在Ａ瓶、Ｂ瓶、Ｃ瓶、Ｄ瓶和Ｅ瓶中，硝基苯的含量依次为（质量百分比）：０．５％、０．４％、０．３％、０．２％和０．１％，水的含量依次为（质量百分比）：９７．６９％、９７．７９％、９７．８９％、９７．９９％和９８．０９％，然后将富集分离培养基于１１１℃下湿热灭菌３０ｍｉｎ，冷却至常温备用；（２）、富集分离培养：首先，按照上述富集分离培养基质量的５％取河道底泥，接种到Ａ瓶中，置２８℃－３０℃空气浴震荡培养箱中培养３６ｈ－４８ｈ；培养完成后，在Ａ瓶内取５ｍｌ培养液，接种到Ｂ瓶中，置２８℃－３０℃空气浴震荡培养箱中培养２４ｈ－３６ｈ；培养完成后，在Ｂ瓶内取５ｍｌ培养液，接种到Ｃ瓶中，置２８℃－３０℃空气浴震荡培养箱中培养２４ｈ；培养完成后，在Ｃ瓶内取５ｍｌ培养液，接种到Ｄ瓶中，置２８℃－３０℃空气浴震荡培养箱中培养２４ｈ；培养完成后，在Ｄ瓶内取５ｍｌ培养液，接种到Ｅ瓶中，置２８℃－３０℃空气浴震荡培养箱中培养２４ｈ。这样便获得最终富集培养液；（３）、配制纯化培养基：其组分和含量为（质量百分比）：０．１％牛肉膏，０．５％葡萄糖，０．５％ＮａＣｌ，０．８％Ｋ↓［２］ＳＯ↓［４］，０．５％ＭｇＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ，０．０１％维生素Ｂ，０．１％硝基苯，１．５－２．０％琼脂，９５．４９％－９５．９９％水，ｐＨ＝７．０－７．２，于１１１℃下湿热灭菌３０ｍｉｎ，然后将纯化培养基分别倾倒入８个培养皿中，冷却至常温，使每个培养皿底部均形成均匀的薄层凝固层；（４）、纯化培养：ａ、取富集分离培养得到的最终富集培养液１ｍｌ接种到一个形成纯化培养基均匀薄凝固层的培养皿中，置２８℃－３０℃恒温培养箱中培养２４ｈ，在纯...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李海波，杨瑞崧，李晓东，孙铁珩，
申请(专利权)人：沈阳大学，
类型：发明
国别省市：89[中国|沈阳]