同时检测腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的核酸、试剂盒及方法技术
【技术实现步骤摘要】
同时检测腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的核酸、试剂盒及方法
本专利技术属于生物检测技术，具体涉及一种用于同时检测腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的核酸、试剂盒及方法。
技术介绍
腐烂病亦称腐朽病(decay)，又称烂皮病、臭皮病等，是果木极易产生的一种常见病，世界各地均有发生。腐烂病主要危害结果树的枝干，发病前期难以察觉，所以需要做好防治措施。发病初期从外表不易识别，如果掀开枝干的表皮，可见到暗褐色致红褐色湿润的小斑或黄褐色的干斑，有时，内部病变面积已较大了，而从外部仍不好识别。受害较重时皮层腐烂坏死，用手指按下即下陷。病皮极易剥离，烂皮层红褐色，湿腐状时有酒糟味。发病后期，病部失水干缩，变黑褐色下陷，并在上产生黑褐色小点粒，即病菌的分生孢子器，成为再发病的传染源。除侵染枝干外，有时也侵染果实。果实上病斑症状为暗红色的圆形或不规则形，有轮纹，边缘清晰。发病部位腐烂软化，略带酒糟味，病果表皮易剥离。丛簇病期叶片生长缓慢，有时只能长到正常的叶片的1/3大，叶片皱缩并散布有褪绿斑，随着植株生长，顶端叶片呈现丛簇状，并向下卷曲，有的叶片逐渐黄化，呈浅绿色或浅黄色，产生条...
【技术保护点】
一组用于多重PCR同时检测三种病原的核酸，其特征在于，包括用于检测分别腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的上、下游引物，其中，所述腐烂病菌的上游引物序列如SEQ ID No.1所示，下游引物序列如SEQ ID No.2所示；所述黄化病植原体的上游引物序列如SEQ ID No.4所示，下游引物序列如SEQ ID No.5所示；所述丛簇病菌的上游引物序列如SEQ ID No.7所示，下游引物序列如SEQ ID No.8所示。
【技术特征摘要】
1.一组用于多重PCR同时检测三种病原的核酸，其特征在于，包括用于检测分别腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的上、下游引物，其中，所述腐烂病菌的上游引物序列如SEQIDNo.1所示，下游引物序列如SEQIDNo.2所示；所述黄化病植原体的上游引物序列如SEQIDNo.4所示，下游引物序列如SEQIDNo.5所示；所述丛簇病菌的上游引物序列如SEQIDNo.7所示，下游引物序列如SEQIDNo.8所示。2.一组用于荧光定量PCR同时检测三种病原的核酸，其特征在于，包括如权利要求1所述的用于检测腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的上、下游引物及各病原体对应的探针，所述腐烂病菌的探针序列如SEQIDNo.3所示；所述黄化病植原体的探针序列如SEQIDNo.6所示；所述丛簇病菌的探针序列如SEQIDNo.9所示。3.如权利要求1或2所述的核酸，其特征在于，该组核酸还包括包含检测腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的阳性扩增产物，其中，所述检测腐烂病菌的阳性扩增产物，包含如SEQIDNo.10中第21-197bp所示的序列；所述检测黄化病植原体的阳性扩增产物，包含如SEQIDNo.11中第17-106bp所示的序列；所述检测丛簇病菌的阳性扩增产物，包含如SEQIDNo.12中第20-219bp所示的序列。4.一种用于荧光定量PCR同时检测三种病原的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：如权利要求2所述的腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的三种病原的上、下游引物和相应的探针，各条探针的5'端和3'端分别标记TEXRED-BHQ2、FAM-TAMRA和CY5-BHQ3。5.如权利要求4所述的试剂盒，优选地，还包括检测腐烂病菌、黄化病植原体和丛簇病菌的三种病原的阳性扩增产物，其中，所述检测腐烂病菌的阳性扩增产物，含如SEQIDNo.10中第21-197bp所示的序列；所述检测黄化病植原体的阳性扩增产物，含如SEQIDNo.11中第17-106bp所示的序列；所述检测丛簇病菌的阳性扩增产物，含如SEQIDNo.12中第20-219bp所示的序列。6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括PremixEXTaq×2。7.一种用于荧光定量PCR同时检测三种病原的检测方法，其特征在于，该方法用于检测腐烂病菌、黄化病植原...
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