一种快速鉴定蜚蠊目昆虫品种的多重PCR引物及方法技术

本发明专利技术涉及一种快速鉴定蜚蠊目昆虫品种的多重PCR引物以及方法。属于应用生物技术领域。快速鉴定蜚蠊目昆虫品种的多重PCR引物，由美洲大蠊引物、黑胸大蠊引物、澳洲大蠊引物、褐斑大蠊引物、德国小蠊引物和地鳖引物组成。鉴定方法包括以下步骤：提取蜚蠊目昆虫基因组总DNA，进行多重PCR扩增，根据琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物大小判定待检测蜚蠊目昆虫种类。美洲大蠊、黑胸大蠊、澳洲大蠊、褐斑大蠊、德国小蠊和地鳖的PCR产物条带大小分别为452bp、125bp、160bp、284bp、253bp和380bp。本发明专利技术的鉴定引物及多重PCR方法可以灵敏、快速地确定待检测蜚蠊目昆虫样品的种类，较传统检测方法具有操作简单、可重复性强、成本低等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种快速鉴定蜚蠊目昆虫品种的多重PCR引物及方法
本专利技术涉及蜚蠊目昆虫的鉴别方法，尤其是涉及一种快速鉴定六种蜚蠊目昆虫品种的多重PCR引物及方法。
技术介绍
蜚蠊目是昆虫纲有翅亚纲的1目。世界已知5000多种，我国已知250余种，分属蜚蠊科、姬蠊科和地鳖科3科。蜚蠊目中有些种类昆虫是重要的病害传播媒介，是卫生防除的主要对象之一；但是有的蜚蠊种类昆虫可以作为药材，用于提取生物活性物质，治疗人类多种疑难杂症(如：美洲大蠊和地蟞)。美洲大蠊俗称“蟑螂”，是我国重要的传统药材，其入药始载于《神农本草经》，并把它列为中品，谓“味咸、寒，有毒，治：血瘀症坚寒热、破积聚、喉咽闭、内寒无子”。《本草纲目》上记载其主治“瘀血，症坚，寒热，下气，利血脉”。《中国药学大辞典》、《中药大辞典》、《中国药用动物志》、《全国中草药汇编》等近、现代药学专著均记载蜚蠊有“活血、散瘀、化积、消疳、解毒、利尿、消肿”等功能。现代药理研究表明美洲大蠊具有多种药理作用，比如抗肿瘤、改善微循环、提高免疫力和促进组织修复等作用。地鳖又名土鳖虫、土元等，为鳖蠊科昆虫地鳖或冀地鳖的雌虫干燥体，地鳖虫(地鳖、冀地鳖)类中药使用历本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于多重PCR引物快速鉴定蜚蠊目昆虫美洲大蠊、黑胸大蠊、澳洲大蠊、褐斑大蠊、德国小蠊和地鳖的方法，其特征在于方法如下：1)提取待检测蜚蠊目昆虫样品以及混合群体样品的基因组DNA，无菌超纯水溶解DNA，调节DNA浓度为50ng/ul，制备样品DNA；2)利用多重PCR引物对样品DNA进行多重PCR扩增；所述的多重PCR引物由美洲大蠊引物、黑胸大蠊引物、澳洲大蠊引物、褐斑大蠊引物、德国小蠊引物和地鳖引物组成；所述的美洲大蠊引物的DNA序列为：上游引物P ame‑F：5’‑TGCTGAGCTCGGGCAACCA‑3’；下游引物P ame‑R：5’‑CTACTGATCATACGAAAAGGGGA‑...

【技术特征摘要】
1.一种基于多重PCR引物快速鉴定蜚蠊目昆虫美洲大蠊、黑胸大蠊、澳洲大蠊、褐斑大蠊、德国小蠊和地鳖的方法，其特征在于方法如下：1)提取待检测蜚蠊目昆虫样品以及混合群体样品的基因组DNA，无菌超纯水溶解DNA，调节DNA浓度为50ng/ul，制备样品DNA；2)利用多重PCR引物对样品DNA进行多重PCR扩增；所述的多重PCR引物由美洲大蠊引物、黑胸大蠊引物、澳洲大蠊引物、褐斑大蠊引物、德国小蠊引物和地鳖引物组成；所述的美洲大蠊引物的DNA序列为：上游引物Pame-F：5’-TGCTGAGCTCGGGCAACCA-3’；下游引物Pame-R：5’-CTACTGATCATACGAAAAGGGGA-3’；所述的黑胸大蠊引物的DNA序列为：上游引物Pful-F：5’-TCTATTACTAGCAAGCAGTATG-3’；下游引物Pful-R：5’-AGTGTAGTGAAAAAATTGCTAGGTCGACT-3’；所述的澳洲大蠊引物的DNA序列为：上游引物Paus-F：5’-ATTACTATTAGCGAGCAGCATG-3’；下游引物Paus-R：5’-ATTTACGGCTCCTAGAATTGAAGAG-3’；所述的褐斑大蠊引物的DNA序列为：上游引物Pbru-F：5’-TGGTTATACCAATTATAATTGGAGGT-3’；下游引物Pbru-R：5’-AGGGCACCAGATATAGCATTCCCG-3’；所述的德国小蠊引物的DNA序列为：上游引物Bger-F：5’-CCGAGCAGAGCTAAATCAACCTGGT-3’；下...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜顺日，耿福能，刘彬，吴桃清，
申请(专利权)人：四川好医生攀西药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川,51