一种改进的白藜芦醇生物生产方法技术

本发明专利技术公开了一种改进的白藜芦醇生物生产方法，其中的改进的产白藜芦醇的重组菌的构建方法，步骤：(1)全合成基因synTAL、syn4CL、synSTS；(2)制备SyBE‑002447(DE3)菌株；(3)全合成基因synaccBC‑dtsR1；(4)克隆外排蛋白基因yddG；(5)全化学合成SyBE‑217101和pSyBE‑217102；(6)将synTAL、syn4CL、synSTS与pSyBE‑217101连接，得到重组表达载体pSyBE‑synTLS；将synaccBC‑dtsR1、yddG与pSyBE‑217102连接，得到重组表达载体pSyBE‑synADY；(7)将两个重组表达载体转化到SyBE‑002447(DE3)菌株中，单克隆筛选，获得重组菌SyBEREST。本发明专利技术过表达外排蛋白促进白藜芦醇分泌，显著提升了白藜芦醇的产量，降低成本。

【技术实现步骤摘要】
一种改进的白藜芦醇生物生产方法
本专利技术所属生物医药
，涉及一种改进的产白藜芦醇的重组菌及其构建方法。
技术介绍
白藜芦醇(Resveratrol，Res)，分子式为为C14H12O3，分子量为228，易溶于氯仿、甲醇、乙酸乙酯、乙醇等有机溶剂。白藜芦醇主要有四种天然存在形式：反式白藜芦醇、顺式白藜芦醇、反式白藜芦醇苷和顺式白藜芦醇苷。作为一种多酚类天然植物抗毒素，白藜芦醇广泛存在于葡萄、花生、虎杖等70余种植物中，随着1990年“法国悖论”的提出而获得广泛关注。研究表明其具有舒张心血管、抗癌、抗氧化、抗炎、延长动物寿命等生理活性，因而可用于保健品、食品、药品和化妆品。目前白藜芦醇的获得主要有以下三种方式：(1)植物提取法：作为一种天然产物，植物提取法是目前生产白藜芦醇的主要方法，其中欧美国家主要从葡萄皮和葡萄籽中提取，而我国主要从虎杖中提取。传统的提取方法为粉碎—提取—对提取物进行提纯浓缩。但面临使用有机溶剂较多、耗时长、效率低等问题。因此随着化工行业的发展，新兴的提取工艺如CO2超临界流体萃取法、超声波提取法、微波提取法等也被开发和研究，从而实现了白藜芦醇高品质高效率地生本文档来自技高网...

【技术保护点】
改进的产白藜芦醇的重组菌的构建方法，其特征包括如下步骤：(1)全合成酪氨酸脱氨酶基因synTAL、4‑香豆酰辅酶A连接酶基因syn4CL、芪合酶基因synSTS，synTAL的核苷酸序列如SEQ ID No.06所示；syn4CL的核苷酸序列如SEQ ID No.07所示；synSTS的核苷酸序列如SEQ ID No.08所示；(2)从大肠杆菌BL21(DE3)菌中克隆得到T7RNA聚合酶基因，通过λRed同源重组技术整合到SyBE‑002447底盘菌株染色体上得到SyBE‑002447(DE3)菌株；(3)全合成乙酰辅酶A羧化酶基因synaccBC‑dtsR1，synaccBC‑dtsR1的...

【技术特征摘要】
1.改进的产白藜芦醇的重组菌的构建方法，其特征包括如下步骤：(1)全合成酪氨酸脱氨酶基因synTAL、4-香豆酰辅酶A连接酶基因syn4CL、芪合酶基因synSTS，synTAL的核苷酸序列如SEQIDNo.06所示；syn4CL的核苷酸序列如SEQIDNo.07所示；synSTS的核苷酸序列如SEQIDNo.08所示；(2)从大肠杆菌BL21(DE3)菌中克隆得到T7RNA聚合酶基因，通过λRed同源重组技术整合到SyBE-002447底盘菌株染色体上得到SyBE-002447(DE3)菌株；(3)全合成乙酰辅酶A羧化酶基因synaccBC-dtsR1，synaccBC-dtsR1的核苷酸序列如SEQIDNo.09所示；(4)以大肠杆菌基因组为模板，克隆外排蛋白基因yddG，yddG的核苷酸序列如SEQIDNo.10所示；(5)全化学合成以SEQIDNo.11所示的表达载体骨架Sy...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵广荣，赵莹，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津,12