本发明专利技术涉及雷帕霉素的新用途，属于医药技术领域，即雷帕霉素在制备提高膀胱癌细胞IL‑27水平，治疗IL‑27低表达膀胱癌的药物中的应用。本发明专利技术还提供IL‑27的一种新用途。其优点表现在：本发明专利技术经体外实验和体内动物试验显示，膀胱癌癌灶IL‑27较癌旁组织明显减少，雷帕霉素处理能增加膀胱癌细胞IL‑27生成增强对膀胱癌的肿瘤杀伤作用。雷帕霉素化疗可显著抑制因NK功能异常所致的膀胱癌进展，可进一步用于IL‑27低表达膀胱癌的治疗。
Application of rapamycin in the treatment of IL 27 low expression of bladder cancer
The invention relates to a new use of rapamycin, which belongs to the technical field of medicine, which is prepared to improve the rapamycin bladder cancer cell IL 27 level in the system, the application of drugs for the treatment of IL 27 low expression in bladder cancer. The invention also provides a new application of IL 27. Its advantages are that the invention by in vitro and in vivo animal experiments showed that the bladder carcinoma IL 27 paracancerous tissues was significantly reduced, rapamycin treatment can increase the bladder cancer cell IL 27 generation enhanced the antitumor effect on bladder cancer. Rapamycin chemotherapy significantly inhibited by NK dysfunction caused by bladder cancer progression, can be further used for the treatment of IL 27 low expression of bladder cancer.
【技术实现步骤摘要】
雷帕霉素在治疗IL-27低表达膀胱癌的应用
本专利技术涉及医药
，具体地说，是雷帕霉素在治疗IL-27低表达膀胱癌的应用。
技术介绍
膀胱癌是我国泌尿外科最常见的恶性肿瘤，其发病率呈逐年增高趋势。目前，其中80％为浅表性膀胱癌，但是膀胱癌易复发，并且10％～20％的患者复发肿瘤比初发肿瘤分化程度更低，侵袭性更高。中国癌症统计数据显示，2015年中国大陆新发膀胱癌8.05万例，死亡3.29万例，居泌尿系统恶性肿瘤首位。膀胱癌可分为非肌层浸润性膀胱non-muscle-invasiveBC(NMIBC)和肌层浸润性膀胱癌muscle-invasiveBC(MIBC)；NMIBC与MIBC的五年生存率为90％与60％。一旦发生远处转移，近80％的患者五年内死亡。目前，膀胱癌治疗方式主要为手术治疗与化学治疗，手术方式与化疗药物的的革新对延长膀胱癌患者生存时间效果有限，因此寻找膀胱癌治疗的新靶点，阻止膀胱癌进程，是膀胱癌防治工作中亟待解决的问题。白介素27(IL-27)属于IL-12家族，它是一个由EBI3和p28组成的异二聚体，EBI3与IL-1的p40亚基同源，在结构上类似于可溶性的细胞因子受体，而p28则与IL-12的p35亚基类似，是一个具有四螺旋的结构。IL-27具有复杂的生物学功能，被认为是抗感染，治疗自身免疫病和肿瘤的重要因子。IL-27的抗肿瘤作用不仅依赖于免疫细胞，还可以通过抑制肿瘤血管新生发挥作用，通过抑制血管生成，限制膀胱癌的增殖和转移。除此之外，IL-27的抗肿瘤作用还体现在IL-27能诱导肿瘤细胞凋亡。前期研究表明，IL-27能激活细胞膜表面凋亡分子Fas/FasL。IL-27也可以活化STAT3，通过死亡受体途径诱导肿瘤细胞凋亡。mTOR抑制剂雷帕霉素及其衍生物在临床上取得了一定的成功。雷帕霉素是一种三烯大环内酯类化合物，分子式为C51H79NO13，为白色或微黄色固体微晶，熔点为183～185℃，亲脂性，易溶于甲醇、丙酮、氯仿、乙醇等有机溶剂，几乎不溶于乙醚和水。雷帕霉素的抗肿瘤机制主要为：(1)通过雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制细胞从G1到S期的细胞周期的转换，将细胞滞留于G1期，使细胞不能进行DNA复制，不能进行正常的细胞分裂。(2)调控肿瘤细胞自噬、改变肿瘤生长微环境，进而诱导肿瘤细胞凋亡。(3)抑制新生血管生成和肿瘤侵袭，抑制血管内皮生长因子(VEGF)诱导的血管内皮增殖。(4)影响肿瘤细胞对能量的合成和利用。目前，雷帕霉素在肿瘤治疗中的免疫调节作用目前尚待研究。专利文献中未见雷帕霉素提高膀胱癌细胞中内源性IL-27的报道，未见膀胱癌细胞IL-27生成减少的报道，未见雷帕霉素治疗IL-27低表达膀胱癌的报道。基于现有技术的现状，本专利技术评估了雷帕霉素在治疗IL-27低表达膀胱癌治疗的用途和方法，为膀胱癌的临床治疗提供新方法和新思路。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供雷帕霉素的一种新用途。本专利技术的第二个目的是，提供IL-27的一种新用途。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：雷帕霉素及其衍生物、药学上可接受的盐类在制备治疗IL-27低表达膀胱癌的药物中的应用。所述的药物中包含安全有效剂量的雷帕霉素或其衍生物、药学上可接受的盐类，和药学上可接受的载体。雷帕霉素及其衍生物、药学上可接受的盐类在制备提高膀胱癌细胞IL-27水平的药物中的应用。为实现上述第二个目的，本专利技术采取的技术方案是：IL-27作为诊断标志物在制备诊断膀胱癌的试剂盒中的应用。本专利技术优点在于：1、本专利技术通过体外实验研究雷帕霉素对膀胱癌细胞IL-27表达水平的研究，进一步通过体内试验评估过雷帕霉素在治疗膀胱癌的价值；提供了一种雷帕霉素用于制备IL-27低表达膀胱癌免疫治疗药物的用途。本专利技术公开了一种针对IL-27低表达膀胱癌的治疗方法，通过雷帕霉素促进膀胱癌细胞IL-27生成，进而杀伤膀胱癌细胞，治疗IL-27低表达膀胱癌。2、本专利技术通过研究发现：膀胱癌患者癌灶组织中IL-27较癌旁组织IL-27水平显著降低，提示，膀胱癌细胞IL-27生成减少。3、本专利技术通过研究发现：雷帕霉素处理促进膀胱癌细胞IL-27生成。4、本专利技术通过研究发现：雷帕霉素通过促进膀胱癌细胞IL-27的生成限制膀胱癌进展，提示，雷帕霉素可进一步用于IL-27低水平膀胱癌的治疗。附图说明附图1：IL-27在膀胱癌癌灶(良性、恶性)与癌旁对照组织中的水平。附图2：雷帕霉素处理膀胱癌细胞增强IL-27的水平。其中，Rap：即Rapamycin，雷帕霉素，5637、Tcc和T24：人膀胱癌细胞系。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。附图3：雷帕霉素通过IL-27限制膀胱癌细胞进展。其中，Ki-67：肿瘤增殖抗原，mock：空白对照组。NS：无统计学意义，*和#P<0.05，**P<0.01。附图4：雷帕霉素处理限制成瘤小鼠膀胱癌进展。其中，NC：对照慢病毒转染组，IL-27over：IL-27过表达慢病毒处理组。NS：无统计学意义，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。具体实施方式下面结合附图对本专利技术提供的具体实施方式作详细说明。实施例1：分析膀胱癌癌组织和癌旁组织的IL-27水平膀胱癌癌灶组织中IL-27水平降低首先收集相关检验数据，发现膀胱癌患者癌灶组织中IL-27水平降低(如图1所示)；说明低水平IL-27可能是膀胱癌恶性程度高的原因之一。实施例2：体外实验证实雷帕霉素处理提高膀胱癌细胞IL-27的水平进而限制膀胱癌进展雷帕霉素(0,0.5和1.0mM，购自MedChemExpress公司)处理膀胱癌细胞系5637，TCC-SUP和T24(细胞系均购自中国科学院细胞库)，48小时后IL-27应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(realtimeqRT-PCR)以及Elisa法检测IL-27的转录水平及蛋白水平(realtimeqRT-PCR试剂购自TAKARA公司，Elisa试剂购自Bio-Techne公司)。发现雷帕霉素能提高膀胱癌细胞T24、5637和TCC-SUP细胞内源性IL-27水平。浓度梯度0，0.5，1mM雷帕霉素处理5637、T24、Tcc细胞48小时后用流式细胞技术分析三种细胞的Ki67水平(Ki67抗体购自BioLegend公司)，使用1mM雷帕霉素处理3种膀胱细胞系，同时用质粒过表达这三种细胞系的IL-27水平48h后，并应用CellCountingKit-8试剂盒(购自Sigma公司)活检测细胞数量并且与对照组进行比较。发现1mM雷帕霉素浓度能有效抑制三种膀胱癌细胞的增殖，过表达IL-27能协同增强雷帕霉素的肿瘤抑制作用(如图3所示)。实施例3：体内外实验证实雷帕霉素能通过促进肿瘤细胞IL-27生成限制膀胱癌进展MBT-2小鼠膀胱癌细胞系(107/只)于C57小鼠皮下注射成瘤1周后(MBT-2小鼠膀胱癌细胞系来自南方模式动物中心，C57小鼠来自斯莱克实验动物中心)，腹腔注射抗雷帕霉素(1.5mg/Kg本文档来自技高网...
【技术保护点】
雷帕霉素及其衍生物、药学上可接受的盐类在制备治疗IL‑27低表达膀胱癌的药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.雷帕霉素及其衍生物、药学上可接受的盐类在制备治疗IL-27低表达膀胱癌的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物中包含安全有效剂量的雷帕霉素或其衍生物、药学上...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘志宏，伍科，王仁杰，穆星宇，贺银燕，李明清，周文洁，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：上海,31
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