微生物组合物和方法技术

本公开包括用于生物刺激如种子萌发和植物生长的组合物和方法。例如，本公开包括用于影响、增强、调节、刺激或辅助植物生长的组合物和方法。本摘要旨在作为用于在特定领域中进行检索的扫描工具，并不旨在限制本公开。

Microbial composition and methods

The present disclosure includes compositions and methods for biological stimulation such as seed germination and plant growth. For example, the present disclosure includes compositions and methods for affecting, enhancing, regulating, stimulating or assisting plant growth. This summary is designed as a scanning tool for retrieval in a particular field and is not intended to limit the disclosure.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】微生物组合物和方法相关申请的交叉引用本申请要求2014年9月9日提交的美国临时申请No.62/048,256的权益，其全部内容通过引用并入本文。通过EFS-WEB作为文本文件提交的序列表的引用2015年9月9日作为名称为“26148_0002P1_Seq_ST25.txt”的文本文件提交的序列表创建于2015年9月9日，大小为1,348字节，根据37C.F.R.§1.52(e)(5)，其通过引用并入本文。
本公开涉及通过施用所公开的组合物有效改善植物生长反应，包括如萌发率、早期植物生长、植物产量和生物量的组合物和方法。本公开的背景植物生物刺激剂是在叶面施用和/或在加入土壤时影响植物生长和/或代谢的不同于化肥的成分。植物生物刺激剂包括但不限于含激素的产品、含氨基酸的产品和含腐殖酸的产品。示例性植物生物刺激剂包括基于海藻提取物、腐殖酸、氨基酸、水杨酸、生物固体、水解蛋白质、硅酸盐和/或合成化合物的组合物。植物生物刺激剂用于在商业环境中处理作物，部分原因是其提高生长速率、降低有害植物生长、提高胁迫耐受性、提高光合速率以及提高病害耐受性的能力。虽然植物生物刺激剂对植物发挥作用的精确机制，一种假设是其通过上调或下调植物激素来起作用。尽管农业组合物和方法有了进步，但是仍然需要可以进行植物生物刺激，即改善植物生长反应和发育，同时减少化学肥料的使用的组合物和方法。本文公开的方法和组合可以满足这些需求和其他需求。概要根据本文的公开内容，如本文中体现和广泛描述的，在一个方面，本公开涉及用于植物生物刺激的组合物和方法。在各个方面，本文公开了包含微生物培养物的无细胞上清液的组合物，所述微生物培养物包含微生物的混合物，其可以包含细菌、真菌、藻类和/或微生物中的一种或多种。本公开的方法包括使用本文公开的组合物来增强植物的生长。公开了包含用分离的微生物接种的微生物培养物的无细胞上清液的组合物，其中所述微生物包含曲霉属(Aspergillusspp.)、芽孢杆菌属(Bacillusspp.)、红假单胞菌属(Rhodopseudomonasspp.)、假丝酵母属(Candidaspp.)、乳杆菌属(Lactobacillusspp.)、乳球菌属(Lactococcusspp.)、假单胞菌属(Pseudomonasspp.)、酵母属(Saccharomycesspp.)或链球菌属(Streptococcusspp.)或其组合。还公开了增强植物生长的方法，包括向种子、植物或特定生长阶段的植物或其组合提供所公开的无细胞上清液组合物，从而增强植物生长。当用本文公开的组合物处理的植物与在相同条件下生长的未用该组合物处理的植物相比具有不同(例如，改善)的生长特性时，生长得到增强。还公开了制备包含无细胞上清液的制品的方法，其包括向制品的表面提供所公开的无细胞上清液组合物。还公开了制备无细胞上清液组合物的方法，其包括以下步骤：(a)用一种或多种分离的微生物接种发酵液，其中所述微生物包含曲霉属、芽孢杆菌属、红假单胞菌属、假丝酵母属、乳杆菌属、假单胞菌属、酵母属或链球菌属或其组合；(b)将接种的发酵液孵育至少5小时；以及(c)在步骤(b)之后将所述培养物以10,000×g的离心力离心至少10分钟；从而提供无细胞上清液。还公开了通过所公开方法制备的无细胞上清液组合物。虽然本公开的方面可以在特定的法定类别(例如系统法定类别)中描述和要求保护，但这仅是为了方便，本领域的技术人员将会理解，本公开的每个方面可以在任何法定类别中描述和要求保护。除非另有明确说明，否则本文阐述的任何方法或方面绝不意味着要求以特定顺序执行其步骤。因此，如果方法权利要求在权利要求或说明书中没有特别说明将步骤限于特定顺序，则无论如何，在任何方面都不能推断出顺序。这适用于解释的任何可能的非明确基础，包括关于步骤设置或操作流程的逻辑问题，从语法组织或标点符号得出的明显含义，或说明书中描述的方面的数量或类型。附图简述并入并构成本说明书的一部分的附图示出了多个方面，并与描述一起用于解释本公开的原理。图1A和图1B示出了关于所公开的组合物对萌发的影响的代表性数据。图1A示出与用蒸馏水处理的对照种子相比，IN-M1批次EA100510无细胞上清液(CFS)浓度对萌发刺激中的百分比差异的影响。图1B示出了重新绘制的图1A的数据，以显示具有相对于时间的延长影响的CFS稀释度。图2A和2B示出了关于所公开的组合物对萌发的影响的代表性数据。图2A示出与用蒸馏水处理的对照种子相比，IN-M1批次EA110310发酵液的浓度对萌发刺激中的百分比差异的影响。图2B示出了重新绘制的图2A的数据，以显示具有相对于时间的延长影响的CFS稀释度。图3A和3B示出了关于在非生物胁迫条件进行的所公开的组合物对萌发的影响的代表性数据。种子在非生物胁迫条件下暴露于100mMNaCl。图3A示出与用蒸馏水处理的对照种子相比，IN-M1批次EA110310发酵液的浓度对萌发刺激中的百分比差异的影响。每组柱下面的数字表示检测到萌发的以小时计的时间。图3B示出了重新绘制的图3A的数据，以显示具有相对于时间的延长影响的CFS稀释度。图4示出了关于在时间零点时IN-M1(A)和IN-M2(B)中存在的细菌群落的主成分分析的代表性数据。图5示出了关于在时间零点时IN-M1(A)和IN-M2(B)中存在的细菌群落的峰强度谱(intensityprofile)的代表性数据。图6示出了关于在时间零点时IN-M1(A)和IN-M2(B)中存在的真菌群落的峰强度谱的代表性数据。图7示出了关于在生长一个月后IN-M1(A)和IN-M2(B)中存在的细菌群落的主成分分析的代表性数据。每批储存在4℃、25℃、-80℃(对照)和室温下。图8示出了关于在4℃、25℃、-80℃(对照)和室温下生长一个月后IN-M1(A)中存在的细菌群落的峰强度谱的代表性数据。图9示出了关于在4℃、25℃、-80℃(对照)和室温下生长一个月后IN-M2(B)中存在的细菌群落的峰强度谱的代表性数据。图10示出了关于在4℃、25℃、-80℃(对照)和室温下生长一个月后IN-M1(A)中存在的真菌群落的峰强度谱的代表性数据。图11示出了关于在4℃、25℃、-80℃(对照)和室温下生长一个月后IN-M2(B)中存在的真菌群落的峰强度谱的代表性数据。图12示出了关于芝麻菜活力量表的代表性数据，所述量表被用作测量植物生长和叶体积的视觉方式。图13示出了关于试验1中用IN-M1(A)和IN-M2(B)处理的芝麻菜的活力(13A)、植物数(13B)、叶绿素含量(13C)、芽干重(13D)、根干重(13E)和植物长度(16F)的代表性数据。图14示出了用于试验2中用IN-M1(A)和IN-M2(B)处理的芝麻菜的活力(14A)、植物数(14B)、叶绿素含量(14C)、芽干重(14D)、根干重(14E)和植物长度(14F)的代表性数据。图15示出了关于在两个时间点取样的时间零点时IN-M1(A)和IN-M2(B)中存在的细菌群落的主成分分析的代表性数据。图16示出了关于在两个时间点取样的时间零点时IN-M1(A)和IN-M2(B)中存在的细菌群落的峰强度谱的代表性数据。图17示出了关本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组合物，其包含用分离的混合微生物组合物接种的微生物培养物的无细胞上清液，所述分离的混合微生物组合物由ATCC专利保藏号PTA‑12383的IN‑M1或ATCC专利保藏号PTA‑121556的IN‑M2的分离的微生物组成。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.09.09 US 62/048,2561.一种组合物，其包含用分离的混合微生物组合物接种的微生物培养物的无细胞上清液，所述分离的混合微生物组合物由ATCC专利保藏号PTA-12383的IN-M1或ATCC专利保藏号PTA-121556的IN-M2的分离的微生物组成。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述无细胞上清液是过滤灭菌的。3.根据权利要求1所述的组合物，其还包含除草剂。4.根据权利要求1所述的组合物，其还包含杀虫剂。5.根据权利要求1所述的组合物，其还包含杀真菌剂。6.根据权利要求1所述的组合物，其还包含液体营养液。7.根据权利要求1所述的组合物，还包含至少一种分离的菌根真菌。8.一种组合物，其包含农学上可接受的载体和有效量的根据权利要求1-7中任一项所述的无细胞上清液组合物。9.一种增强植物生长的方法，其包括向种子、向植物、向特定生长阶段的植物或其组合提供根据权利要求1-7中任一项所述的无细胞上清液组合物或根据权利要求8所述的组合物，从而增强植物生长。10.根据权利要求9所述的方法，其中提供所述无细胞上清液组合物包括向植物的种子施用所述无细胞上清液。11.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛格丽特·拜沃特埃克加德，阿南达·菲茨西蒙斯，
申请(专利权)人：伊诺库克技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：加拿大,CA