一种测定甲胎蛋白的电化学免疫传感器及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种测定甲胎蛋白的电化学免疫传感器及其制备方法与应用，基底电极由MWNTs‑CS溶液修饰，甲胎蛋白第一抗体溶液共价结合到修饰后的基底电极上，甲胎蛋白抗原溶液特异性结合到甲胎蛋白第一抗体上，CdTe@SiO2‑GO‑甲胎蛋白第二抗体溶液特异性结合到甲胎蛋白抗原上，所述基底电极为玻碳电极。本发明专利技术还提供了一种基于CdTe QDs信号放大的电化学免疫传感器的人血清中甲胎蛋白的检测方法，所述检测方法灵敏度高、特异性好、具有很宽的线性范围和较低的检测限且成本低廉。

An electrochemical immunosensor for the determination of alpha fetoprotein and its preparation and Application

The invention discloses a method for determination of AFP immunosensor and preparation method and application thereof, the substrate electrode by MWNTs modified CS solution, alpha fetoprotein first antibody solution covalently bonded to the substrate electrode modified, AFP antigen solution specific binding to alpha fetoprotein antibody, CdTe@SiO2 GO AFP second antibody solution specific binding to alpha fetoprotein antigen on the substrate electrode for glassy carbon electrode. The invention also provides a method for detecting the electrochemical immunosensor CdTe QDs signal amplification in human serum alpha fetoprotein based on the detection method of high sensitivity, good specificity, a wide linear range and low detection limit and low cost.

【技术实现步骤摘要】
一种测定甲胎蛋白的电化学免疫传感器及其制备方法与应用
本专利技术属于生物医学检测，具体涉及一种测定甲胎蛋白的电化学免疫传感器及其制备方法与应用。
技术介绍
作为世界上严重危害人类生命的重大疾病之一，癌症已经成为发达国家的第一致死因素和发展中国家的第二致死因素。目前对于晚期癌症的治疗仍存在很多技术难题，“早发现，早诊断，早治疗”仍然是目前世界上公认治疗癌症最有效的手段，因此癌症的早期检测对于提高癌症患者生存率具有重大意义。甲胎蛋白(AFP)主要是在胎儿肝脏卵黄囊合成的一种分子量为69000的胎儿血清蛋白。胎儿出生后约两周甲胎蛋白从血液中消失，在正常成年人血清中AFP含量一般低于20ng/mL。当肝细胞发生癌变时，恢复了产生这种蛋白质的功能，而且随着病情恶化它在血清中的含量会急剧增加。AFP可以在约80％的肝细胞癌患者中出现升高，其血清水平一般与原发性肝细胞癌的发生、发展、消退、复发等具有密切相关，检测血清中AFP的浓度可获相关肿瘤的组织生长、细胞分化和功能的相关信息。现阶段已经开发了多种方法用于检测AFP的含量，例如酶联免疫测定、电化学免疫测定、表面等离子体共振、原子吸收光谱法、化学发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定甲胎蛋白的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，基底电极由MWNTs‑CS溶液修饰，甲胎蛋白第一抗体溶液共价结合到修饰后的基底电极上，甲胎蛋白抗原溶液特异性结合到甲胎蛋白第一抗体上，CdTe@SiO2‑GO‑甲胎蛋白第二抗体溶液特异性结合到甲胎蛋白抗原上。

【技术特征摘要】
1.一种测定甲胎蛋白的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，基底电极由MWNTs-CS溶液修饰，甲胎蛋白第一抗体溶液共价结合到修饰后的基底电极上，甲胎蛋白抗原溶液特异性结合到甲胎蛋白第一抗体上，CdTe@SiO2-GO-甲胎蛋白第二抗体溶液特异性结合到甲胎蛋白抗原上。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述基底电极为玻碳电极。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述MWNTs-CS溶液按如下步骤制备：将CS分散在乙酸水溶液中并搅拌0.2～3h，得到CS溶液；将MWNTs分散在CS溶液中并超声处理10～60min以获得MWNTs-CS的均匀混合物；离心得到MWNTs-CS沉淀，并重悬于水中制成MWNTs-CS溶液。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，CdTe@SiO2-GO-甲胎蛋白第二抗体溶液按如下方法制备：(1)量取环己烷、TritonX-100、正己醇，混合均匀后加入CdTe水溶液，混合均匀后加入TEOS和APTES，混合均匀后加入氨水，1～10℃搅拌反应12～36h，反应结束后离心，用乙醇和水清洗沉淀，最后重悬于水中得到CdTe@SiO2溶液；(2)用EDC溶液和NHS溶液将GO悬浮液室温活化1～5h，离心获得沉淀；将沉淀加入步骤(1)得到的CdTe@SiO2溶液中，室温搅拌反应1～5h，离心清洗沉淀，最后重悬于水中得到CdTe@SiO2-GO溶液；(3)将甲胎蛋白第二抗体溶液加入步骤(2)得到的CdTe@SiO2-GO溶液中，黑暗条件下1～10℃搅拌反应6～18h，然后加入BSA溶液室温搅拌反应1～5h，离心并重悬于PBS...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈艳飞，潘登，张明明，陈慧琴，张袁健，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32