一种磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒及其制备方法和检测方法技术

本发明专利技术涉及一种磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，包括如下试剂：含有5~100ng/mL的生物素标记的心磷脂抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰乙醇胺抗原、为5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰肌醇抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰丝氨酸抗原的混合溶液；浓度为10~1000ng/mL的碱性磷酸酶标记的鼠抗人IgM单克隆抗体溶液；浓度为0.1~1 mg/mL的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液。本试剂盒的灵敏度高、精密度高、线性范围宽、稳定性好、有效期长，环保性能大大提高。

A chemiluminescent quantitative detection kit for phospholipid IgM antibody and its preparation and detection methods

Chemiluminescence quantitative detection kit of the invention relates to a phospholipid IgM antibody, which comprises the following reagents: mixed solution of phosphatidylserine antigen 5~100ng/mL antigen, cardiolipin containing 5~100ng/mL biotin labeled biotin labeled phosphatidylethanolamine antigen, 5~100ng/mL biotin labeled phosphatidyl alcohol, 5~100ng/mL antigen of muscle biotin; concentration of alkaline phosphatase labeled 10~1000ng/mL mouse anti human IgM monoclonal antibody solution; the concentration of 0.1~1 mg/mL streptavidin nano magnetic particle suspension labeled. This kit has high sensitivity, high precision, wide linear range, good stability, long period of validity, and greatly improved environmental protection performance.

【技术实现步骤摘要】
一种磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒及其制备方法和检测方法
本专利技术属于医疗器械体外诊断试剂化学发光免疫分析领域，特别是涉及一种磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒及其制备方法和检测方法。
技术介绍
人体内的磷脂主要包括带负电荷的心磷脂(Cardiolipin,CL)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PI)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PS)，带中性电荷的磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)等。抗磷脂抗体(Anti-phospholipids,APL)是一族针对自身抗原包括磷脂或带负电荷磷脂与载体蛋白复合物的病理性抗体。抗磷脂抗体综合症(antiphospholipidsyndrome,APS)，是一组与抗磷脂抗体有关的自身免疫性疾病。典型的临床表现有动脉静脉血栓、血小板减少以及习惯性流产等，多见于年轻人，60％-80％为女性患者，女性中位年龄为30岁。APS可分为原发性APS和继发性APS，继发性APS多见于系统性红斑狼疮(SLE)或类风湿关节炎(RA)等自身免疫病。此外，还有一种少见的恶性A本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：包括如下试剂：含有5~100ng/mL的生物素标记的心磷脂抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰乙醇胺抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰肌醇抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰丝氨酸抗原的混合溶液；浓度为10~1000ng/mL的碱性磷酸酶标记的鼠抗人IgM单克隆抗体溶液；浓度为0.1~1 mg/mL的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液。

【技术特征摘要】
1.一种磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：包括如下试剂：含有5~100ng/mL的生物素标记的心磷脂抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰乙醇胺抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰肌醇抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰丝氨酸抗原的混合溶液；浓度为10~1000ng/mL的碱性磷酸酶标记的鼠抗人IgM单克隆抗体溶液；浓度为0.1~1mg/mL的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液。2.根据权利要求1所述的磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的心磷脂抗原、所述的磷脂酰乙醇胺抗原、所述的磷脂酰肌醇抗原、所述的磷脂酰丝氨酸抗原分别经过氨基修饰。3.根据权利要求1所述的磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的生物素为N-羟基琥珀酰亚胺。4.根据权利要求1所述的磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的心磷脂抗原与所述的生物素的投料摩尔比为1：10~100；所述的磷脂酰乙醇胺抗原与所述的生物素的投料摩尔比为1：10~100；所述的磷脂酰肌醇抗原与所述的生物素的投料摩尔比为1：10~100；所述的磷脂酰丝氨酸抗原与所述的生物素的投料摩尔比为1：10~100；所述的碱性磷酸酶与所述的鼠抗人IgM单克隆抗体的投料质量比为1~10：1；所述的纳米磁微粒的羧基含量不低于0.4mmol/g。5.根据权利要求1所述的磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒还包括两个或两个以上不同浓度水平的抗磷脂IgM抗体溶液的质控品、两个或两个以上不同浓度水平的抗磷脂IgM抗体溶液的校准品、标准曲线、样本稀释液和化学发光底物。6.根据权利要求5所述的磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的质控品包括抗磷脂IgM抗体，0.005~0.1mol/L、pH为7~8的磷酸盐缓冲液，质量浓度为0.1~5%的牛血清蛋白和质量浓度为0.01~1%的防腐剂；所述的校准品包括抗磷脂IgM抗体，0.005~0.1mol/L、pH为7~8的磷酸盐缓冲液，质量浓度为0.1~5%的牛血清蛋白和质量浓度为0.01~1%的防腐剂；所述的样本稀释液包括0.005~0.1mol/L、pH为7~8的磷酸盐缓冲液，质量浓度为0.1~5%的牛血清蛋白和质量浓度为0.01~1%的防腐剂。7.根据权利要求5或6所述的磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：一个所述的质控品中的抗磷脂IgM抗体的浓度为4~21RU/mL，另一个所述的质控品中的抗磷脂IgM抗体的浓度为50~100RU/mL；一个所述的校准品中的抗磷脂IgM抗体的浓度为10~40RU/mL，另一个所述的校准品中的抗磷脂IgM抗体的浓度为100~300RU/mL。8.一种如权利要求1至7中任一项所述的磷脂IgM抗体的化学发光定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述的含有5~100ng/mL的生物素标记的心磷脂抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰乙醇胺抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰肌醇抗原、5~100ng/mL的生物素标记的磷脂酰丝氨酸抗原的混合溶液的制备方法包括如下步骤：步骤（1）、将所述的心磷脂抗原、所述的磷脂酰乙醇胺抗原、所述的磷脂酰肌醇抗原、所述的磷脂酰丝氨酸抗原分别用0.01~0.03mol/L、pH为7~7.5的磷酸盐缓冲液，在2~8℃下透析过夜，分别配制成心磷脂抗原溶液、磷脂酰乙醇胺抗原溶液、磷脂酰肌醇抗原溶液、磷脂酰丝氨酸抗原溶液，步骤（2）、将所述的生物素溶于二甲基亚砜中配制成物质的量浓度为8~12mM的生物素溶液，步骤（3）、将所述的心磷脂抗原溶液、所述的磷脂酰乙醇胺抗原溶液、所述的磷脂酰肌醇抗原溶液、所述的磷脂酰丝氨酸抗原溶液分别与所述的生物素溶液混合均匀，在15~40℃下放置20~40分钟，然后分别加入0.05~1.1M的三羟甲基氨基甲烷缓冲液，终止反应，在15~40℃下放置8~12分钟，然后用含质量比为0.1~5%的牛血清白蛋白、pH为7~8、物质的量浓度为0.005~0.1mol/L的磷酸盐...

【专利技术属性】
技术研发人员：李庆春，徐顺澍，李永红，吴荣桂，周斌，万文琴，
申请(专利权)人：江苏浩欧博生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32