定量检测胃泌素释放肽前体(pro‑GRP)的双光子荧光免疫层析试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种以荧光染料为标记物的定量检测胃泌素释放肽前体(pro‑GRP)双光子荧光免疫层析试剂盒。本发明专利技术的双光子荧光免疫层析试剂盒实现了对胃泌素释放肽前体(pro‑GRP)的荧光定量检测，具有稳定性好、线性范围宽、特异性好、定量准确以及简单快速的优势，可同时检测全血、血清及血浆样品，并适用于各级医院及家庭医疗。

Quantitative detection of serum Pro gastrin releasing peptide (pro GRP) the two-photon fluorescence immunochromatographic assay kit and preparation method thereof

The invention discloses a method for quantitative detection of gastrin releasing peptide with fluorescent dye labeled precursor (pro GRP) two-photon fluorescence immunochromatographic kit. Two photon fluorescence immunochromatographic kit of the invention realizes the release of peptide precursor of gastrin (pro GRP) fluorescence quantitative detection, has good stability, wide linear range, good specificity, accurate and simple and fast advantages, the simultaneous detection of whole blood, serum and plasma samples, and is suitable for various hospitals family and medical.

【技术实现步骤摘要】
定量检测胃泌素释放肽前体(pro－GRP)的双光子荧光免疫层析试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及医学检验领域中的癌症临床免疫诊断试剂盒领域，具体涉及定量检测胃泌素释放肽前体(pro-GRP)的双光子荧光免疫层析试剂盒。
技术介绍
Pro-GRP是胃泌素释放肽(GRP)的前体结构。而GRP和Pro-GRP在肿瘤的发生、发展及其治疗中起着重要的作用。Pro-GRP显示GRP水平和GRP基因表达，是SCLC的一种新的肿瘤标志物，在国内外已经得到广泛应用。由于SCLC具有神经内分泌肿瘤的性质，因此，Pro-GRP和NSE在SCLC的诊断中具有良好的诊断价值。有研究比较了健康者、肺部良性疾病患者、NSCLC患者、SCLC患者血清中Pro-GRP和NSE水平的差异，分析两者在SCLC诊断方面的应用，同时初步探讨了Pro-GRP水平与患者复发转移的关系。SCLC患者Pro-GRP和NSE的水平均明显高于健康对照组、良性疾病组和NSCLC组(P＝0.00)。Pro-GRP和NSE诊断SCLC的敏感度分别为84.17％与65.00％，特异度分别为92.00％与85.33％，说明Pro-GRP和NSE均本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种定量检测胃泌素释放肽前体(pro‑GRP)的双光子荧光免疫层析试剂盒，包括扣卡(11)、荧光免疫层析试纸条和Wash缓冲液，其特征在于：扣卡(11)为荧光免疫层析试纸条的外部壳结构，包括加样孔(9)和观察窗(10)；荧光免疫层析试纸条包括样品垫(1)、标记垫(2)、层析膜(6)、吸水垫(7)和底板(8)，样品垫(1)、标记垫(2)、层析膜(6)和吸水垫(7)搭载于底板(8)之上，样品垫(1)位于加样孔(9)的下方，且连接于标记垫(2)，标记垫(2)连接于层析膜(6)，层析膜(6)连接于吸水垫(7)，层析膜(6)上固定有一条定量检测线(4)和一条质控线(5)，检测线(4)和质控线(5)位于观...

【技术特征摘要】
1.一种定量检测胃泌素释放肽前体(pro-GRP)的双光子荧光免疫层析试剂盒，包括扣卡(11)、荧光免疫层析试纸条和Wash缓冲液，其特征在于：扣卡(11)为荧光免疫层析试纸条的外部壳结构，包括加样孔(9)和观察窗(10)；荧光免疫层析试纸条包括样品垫(1)、标记垫(2)、层析膜(6)、吸水垫(7)和底板(8)，样品垫(1)、标记垫(2)、层析膜(6)和吸水垫(7)搭载于底板(8)之上，样品垫(1)位于加样孔(9)的下方，且连接于标记垫(2)，标记垫(2)连接于层析膜(6)，层析膜(6)连接于吸水垫(7)，层析膜(6)上固定有一条定量检测线(4)和一条质控线(5)，检测线(4)和质控线(5)位于观察窗(10)的下方；标记垫(2)上同时固定有荧光染料修饰的胃泌素释放肽前体(pro-GRP)胃泌素释放肽前体(pro-GRP)特异性抗体，和荧光染料修饰的质控分子，修饰胃泌素释放肽前体(pro-GRP)胃泌素释放肽前体(pro-GRP)特异性抗体的荧光染料的发射波长与修饰质控分子的荧光染料的发射波长相同，波长范围为300-500nm；定量检测线(4)上固定有胃泌素释放肽前体(pro-GRP)胃泌素释放肽前体(pro-GRP)特异性抗体，该特异性抗体所识别的抗原决定簇与固定在标记垫(2)上的荧光染料修饰的胃泌素释放肽前体(pro-GRP)胃泌素释放肽前体(pro-GRP)特异性抗体所识别的抗原决定簇不同；以及质控线(5)上固定有能与质控分子特异性结合的荧光染料修饰生物分子。修饰包被胃泌素释放肽前体(pro-GRP)特异性抗体的荧光染料的发射波长与修饰质控分子的荧光染料的发射波长相同，波长范围为500-800nm；2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光免疫层析试纸条还包括血液分离膜(3)，其设置在标记垫(2)和层析膜(6)之间，此时标记垫(2)连接于血液分离膜(3)，血液分离膜(3)连接于层析膜(6)；或者设置在样品垫(1)和标记垫(2)之间，此时样品垫(1)连接于血液分离膜(3)，血液分离膜(3)连接于标记垫(2)；或者直接与样品垫(1)合并为同一结构。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述标记荧光染料为有机荧光染料、稀土元素荧光染料、荧光微球或者量子点荧光染料，发射波长为300-500nm，本例选365nm。荧光染料为有机荧光染料、稀土元素荧光染料或者量子点荧光染料，发射波长为500-800nm，本例选635nm；且标记和包被荧光染料可以互换。所述的其中一个染料为稀土元素荧光染料、荧光微球或者量子点荧光染料；所述另外一个染料是机荧光染料为Alexa系列近红外荧光化合物、DyLight系列近红外荧光化合物和CF系列近红外荧光化合物中的至少一种；其特征在于，所述近有机荧光染料为AlexaFluro系列(AlexaFluro647、610、633、700、750)的荧光素、DyLight系列、(DyLight649、633、549、680)、CF647中的至少一种等。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述层析膜、底板和扣卡在大于550nm时荧光很弱或不含有荧光剂，优选底板为白色，表面附有不干胶，且两者均...

【专利技术属性】
技术研发人员：李道锋，张铁汉，段德民，潘文东，
申请(专利权)人：重庆康巨全弘生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50