一种H2O2偶联的指示系统检测唾液酸的方法技术方案

本发明专利技术公开了一种H2O2偶联的指示系统检测唾液酸的方法，所述的方法其原理基于利用H2O2偶联的指示系统，利用神经氨酸苷酶、神经氨酸醛缩酶分解唾液酸生成N‑乙酰甘露糖胺，酮胺氧化酶将N‑乙酰甘露糖胺分解生成H2O2，最后H2O2在过氧化物酶、4‑氨基安替比林和酚的作用下生成醌亚胺色团。与传统方法相比，本方法灵敏度高，稳定性好，值得进一步推广使用。

A H2O2 coupling indicating system for detection of sialic acid

The invention discloses a H2O2 indicator system coupling detection method of sialic acid, the method of the indicator system by using H2O2 coupling principle based on the use of neuraminidase, neuraminic acid decomposition of sialic acid aldolase N generation acetylmannosamine, ketoamine oxidase N acetylmannosamine decomposition H2O2 finally, H2O2 generated quinoneimine chromophore in peroxidase, 4 4-aminoantipyrine and phenol under the action of. Compared with the traditional method, the method has high sensitivity and good stability, and is worthy of further popularization and application.

【技术实现步骤摘要】
一种H2O2偶联的指示系统检测唾液酸的方法
本专利技术涉及唾液酸的检测
，尤其是涉及一种H2O2偶联的指示系统检测唾液酸的方法。
技术介绍
唾液酸(Sialicacid，SA)：是9-碳单糖的衍生物。通常以低聚糖，糖脂或者糖蛋白的形式存在。是细胞膜糖蛋白的重要组成部分，与生物体的许多生物学功能有关，且与细胞恶变、癌转移、浸润、失去接触性抑制、细胞粘附性降低以及肿瘤抗原性密切相关。测定血清唾液酸浓度，可作为癌肿诊断辅助性指标和疗效观察指标。唾液酸明显升高的疾病有：急性白血病、食道癌、贲门癌、胃癌、肠癌、肝癌、肺癌以及卵巢癌等，其中以急性白血病患者为最高。肿瘤患者血清唾液酸增高可能是肿瘤细胞涎糖蛋白合成增加和代谢的改变在血中的反映，可以用于早期发现肿瘤的转移和复发。目前唾液酸检测技术常用的方法有如下几种：硫代巴比妥酸法、R-试剂法、间苯二酚-过碘酸/盐酸法、HPLC法、薄层层析法、酶法等。硫代巴比妥酸法、R-试剂法、间苯二酚-过碘酸/盐酸法操作繁复，不适用于自动化分析，HPLC法、薄层层析法仪器成本偏高，酶法普遍以NAD+-NADH指示系统测定物质的浓度或活性，但NADH稳定性较差本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种H2O2偶联的指示系统检测唾液酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：①在待测样品中加入PH＝6.5‑7.5、浓度为20～100mmol/L的Tris‑HCL缓冲体系，加入0.3～0.8g/L亚铁氰化钾为抗干扰剂，并添加酶量为1～5KU/L神经氨酸苷酶，神经氨酸苷酶将待测样本中的结合型唾液酸分解成N‑乙酰神经氨酸，其反应方程式为：

【技术特征摘要】
1.一种H2O2偶联的指示系统检测唾液酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：①在待测样品中加入PH＝6.5-7.5、浓度为20～100mmol/L的Tris-HCL缓冲体系，加入0.3～0.8g/L亚铁氰化钾为抗干扰剂，并添加酶量为1～5KU/L神经氨酸苷酶，神经氨酸苷酶将待测样本中的结合型唾液酸分解成N-乙酰神经氨酸，其反应方程式为：②以N-乙酰神经氨酸为底物，添加酶量为1～5KU/L神经氨酸醛缩酶使得N-乙酰神经氨酸被分解生成N-乙酰甘露糖胺，其反应方程式为：③以N-乙酰甘露糖胺为底物，添加酶量为5～10KU/L酮胺氧化酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：王贤俊，郑蓓蕾，
申请(专利权)人：王贤俊，
类型：发明
国别省市：浙江,33