一种自体三联皮肤成纤维细胞制剂的制备方法技术
Preparation method of autologous triple skin fibroblast preparation
The invention discloses a preparation method of a triple autologous skin fibroblast preparations, the autologous triple skin fibroblasts by platelet rich plasma preparation, autologous collagen concentrate and fibroblasts; collagen: autologous platelet rich plasma concentration = 1:4, autologous fibroblasts concentration (1 ~ 2) * 10
【技术实现步骤摘要】
一种自体三联皮肤成纤维细胞制剂的制备方法
本专利技术属于抗衰老美容产品
，尤其涉及一种自体三联皮肤成纤维细胞制剂的制备方法。
技术介绍
日前，市场上已经有各种美容方面的产品，肉毒杆菌内毒素作为目前主流的美容产品，因其使用简便、效果显著、安全可靠而广受欢迎。但它们使用后的副反应较多，常见的有表情不自然、畏光流泪、局部肿胀、淤斑、注射部位麻木、头痛、额部紧绷感、邻近部位皱纹加深等。这两种因子应用易产生较明显的依赖性，随着注射的次数增多，人对其敏感性降低，导致病人使用该方法更为频繁，每次的使用量也会逐渐增多。在皮肤老化的过程中，成纤维细胞(Fibroblasts，Fbs)会出现一系列生物学特性改变，真皮组织中成纤维细胞及其所分泌的胶原蛋白的减少，不仅胶原纤维的总量下降，不同类型胶原纤维的比例也发生变化，是皮肤老化并呈现各种皱纹的主要原因。这些变化最终都使真皮变薄、退化而衰老。本专利技术针对皮肤衰老、疤痕形成的主要原因，制备全部由自体的成分——自体皮肤成纤维细胞、自体PRP及自体胶原蛋白构成的制剂，作为自身移植材料，具有良好的组织相容性，在皮肤的年轻化和治疗性塑型中...
【技术保护点】
一种自体三联皮肤成纤维细胞制剂，其特征在于，所述自体三联皮肤成纤维细胞制剂由富血小板血浆、自体胶原浓缩液和自成纤维细胞组成；血小板血浆、自体胶原浓缩液体积比为1:4混匀作为基础液，加入自体成纤维细胞，终浓度是1.0×10
【技术特征摘要】
1.一种自体三联皮肤成纤维细胞制剂，其特征在于，所述自体三联皮肤成纤维细胞制剂由富血小板血浆、自体胶原浓缩液和自成纤维细胞组成；血小板血浆、自体胶原浓缩液体积比为1:4混匀作为基础液，加入自体成纤维细胞，终浓度是1.0×107/ml～2.0×107/ml。2.一种如权利要求1所述自体三联皮肤成纤维细胞制剂的制备方法，其特征在于，所述自体三联皮肤成纤维细胞制剂的制备方法包括以下步骤：步骤一，人皮肤成纤维细胞分离、培养；步骤二，自体高浓度胶原蛋白液的制备；步骤三，自体血小板富集血浆的制备；步骤四，三联成纤维细胞注射制剂制备。3.如权利要求2所述的自体三联皮肤成纤维细胞制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤一具体包括：(1)标本处理：皮肤标本放于无钙镁磷酸缓冲液DPBS瓶中，4℃保存，带回GMP级实验室；将取回的标本置于生物安全柜，标本移入平皿内，首先用1×磷酸盐缓冲液DPBS5ml浸润15min，用1ml移液枪吸弃，再用1×DPBS同样反复冲洗，然后用500u/ml氨苄青霉素和500mg/ml硫酸链霉素的1×DPBS溶液中浸泡消毒10min后，用1×DPBS液用力反复冲洗5次，直至标本发白，轻度发胀，在平皿中修剪皮下筋膜，剔除脂肪，将标本剪碎，后面相同；(2)分离：用1mg/ml的混合胶原酶MNP-S在37℃条件下消化1h，分离表皮与真皮；去除表皮，真皮组织剪成约0.1mm3～0.3mm3大小，加入Trypleselect无动物源性消化液，37℃条件下继续消化15min；当成纤维细胞大部分从组织中分离出来时，加入10％FBS高糖-IMDM培养基终止消化，移入离心管，1000r/min离心5min，收集沉淀；(3)培养和传代，将获得的细胞及剩余的组织块一并接种于75cm2培养瓶中，加入1ml完全培养基，注意切勿使培养物浮起，置37℃5％CO2培养箱中培养；于培养24h后补充培养液，此后隔3天半定量换液；原代细胞融合至70％时，Trypleselect无动...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡火珍，宋丽萍，杨燕，肖春，谢小琴，王曦，李利，张泽辛，张娟，罗旭梅，彭芳芳，薛红，刘佩娜，叶林，胡章兰，黄娟，邹琳，
申请(专利权)人：四川驰鼎盛通生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51
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