一种干细胞生物制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种干细胞生物制剂及其制备方法和应用，属于生物药剂技术领域。本干细胞生物制剂由外周血间充质干细胞、纤连蛋白、葛根素、表皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子和溶剂制成；所述外周血间充质干细胞的含量为2×10

【技术实现步骤摘要】
一种干细胞生物制剂及其制备方法和应用
本专利技术属于生物药剂
，具体涉及一种干细胞生物制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
间充质干细胞是一类具有多潜能的细胞，其具有自我更新、组织修复能力等特点，已广泛应用在生物药剂领域，其中尤其将间充质干细胞应用在皮肤修复领域。皮肤是人体的保护屏障，因此皮肤极易出现损伤，其中尤以烫伤、烧伤等最为严重，目前对皮肤烫伤或烧伤一般是等待皮肤自然修复或移植皮肤修复，但是皮肤自然修复慢，而移植皮肤与原生皮肤依然会出现明显修复痕迹，因此对皮肤的修复效果一直不理想。因此，亟需要一种采用间充质干细胞制备的生物药剂来提高修复皮肤的效果。
技术实现思路
本专利技术为了解决上述技术问题提供一种干细胞生物制剂及其制备方法和应用。其一，本专利技术为了解决上述技术问题提供一种干细胞生物制剂。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种干细胞生物制剂，由外周血间充质干细胞、纤连蛋白、葛根素、表皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子和溶剂制成；其中，所述外周血间充质干细胞的含量为2×107-4×107个/ml；所述纤连蛋白的含量为0.5-1μg/ml；所述葛根素的含量为6-8ng/ml；所述表皮细胞生长因子的含量为6-12ng/ml；所述血小板衍生生长因子的含量为6-12ng/ml。本专利技术的干细胞生物制剂的有益效果是：本专利技术的干细胞生物制剂，对皮肤具有很好的修复效果，利于皮肤快速恢复；修复后的皮肤与原皮肤基本接近，差异小。相比于现有的皮肤移植方式，采用本专利技术的干细胞生物制剂进行皮肤修复，治疗过程简单，同时效果好。在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。进一步，所述外周血间充质干细胞的含量为3×107-4×107个/ml；所述纤连蛋白的含量为0.6-0.8μg/ml；所述葛根素的含量为7ng/ml；所述表皮细胞生长因子的含量为8-10ng/ml；所述血小板衍生生长因子的含量为8-10ng/ml。采用上述进一步方案的有益效果是：对皮肤修复效果更好。进一步，所述溶剂为生理盐水、乙醇和PBS溶液中的任意一种。采用上述进一步方案的有益效果是：分散均匀。进一步，所述葛根素的纯度大于98％。采用上述进一步方案的有益效果是：对皮肤修复效果更好。其二，本专利技术为了解决上述技术问题提供一种干细胞生物制剂的制备方法。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种如上述的干细胞生物制剂的制备方法，包括以下步骤：S1、取外周血，进行传代培养，得到外周血间充质干细胞；S2、取表皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子和溶剂配制成细胞悬浮液，在所述细胞悬浮液中所述表皮细胞生长因子的含量为6-12ng/ml，在所述细胞悬浮液中所述血小板衍生生长因子的含量为6-12ng/ml；取葛根素、纤连蛋白和步骤S1得到的外周血间充质干细胞加入到所述细胞悬浮液中，混合，即得到干细胞生物制剂，在所述干细胞生物制剂中所述外周血间充质干细胞的含量为2×107-4×107个/ml，在所述干细胞生物制剂中所述纤连蛋白的含量为0.5-1μg/ml，在所述干细胞生物制剂中所述葛根素的含量为6-8ng/ml。本专利技术的干细胞生物制剂的制备方法的有益效果是：(1)制备过程简单易操作，制造成本低；(2)通过本制备方法制备的干细胞生物制剂能对皮肤的修复起到很好的作用，修复效果好。在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。进一步，在步骤S1中，所述取外周血，进行传代培养，得到外周血间充质干细胞包括以下步骤：S11、抽取10ml静脉血液，加入1-2ml肝素抗凝，以PBS缓冲液稀释，离心，分离得到单核细胞；将所述单核细胞加入培养皿中，加入培养基培养3-6天，得到细胞培养液；S12、将步骤S11得到的细胞培养液中的培养基去除，加入PBS缓冲液冲洗1-2遍后，加入1-2ml体积百分比为0.25％的胰酶消化2-3min，再去除胰酶，收集细胞，得到初代细胞；S13、取步骤S12得到的初代细胞，以2×107-4×107个/ml的密度，加入培养基，再加入1-2ml的β-联蛋白，传代培养，收集第3-5代细胞，即得到外周血间充质干细胞。采用上述进一步方案的有益效果是：利于制备得到外周血间充质干细胞，制备外周血间充质干细胞的收率高，修复效果好。进一步，在步骤S11中，所述离心的转速为1500-1800r/min，时间为20-28min。采用上述进一步方案的有益效果是：分离效果好。进一步，在步骤S11中，所述培养基为添加有体积百分比浓度为8-12％的胎牛血清的DMEM培养基。采用上述进一步方案的有益效果是：培养效果好。进一步，在步骤S13中，所述培养基为添加有体积百分比浓度为8-12％的胎牛血清的DMEM培养基。采用上述进一步方案的有益效果是：培养效果好。其三，本专利技术为了解决上述技术问题提供一种干细胞生物制剂在皮肤修复领域中的应用。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种如上述的干细胞生物制剂在皮肤修复领域中的应用。本专利技术的干细胞生物制剂在皮肤修复领域中的应用的有益效果是：对皮肤修复效果好，能够快速修复皮肤，修复的皮肤与原生皮肤基本无差异。具体实施方式以下对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。实施例1本实施例提供一种干细胞生物制剂，包括含量为2×107个/ml的外周血间充质干细胞，含量为0.5μg/ml的纤连蛋白、含量为6ng/ml的葛根素、含量为6ng/ml表皮细胞生长因子、含量为6ng/ml血小板衍生生长因子和20ml的生理盐水。其中，葛根素的纯度为98％。本实施例提供一种如上述的干细胞生物制剂的制备方法，包括以下步骤：S1、取外周血，进行传代培养，得到外周血间充质干细胞。其具体步骤如下：S11、抽取10ml静脉血液，加入1ml的肝素抗凝，以PBS缓冲液稀释，以1500r/min的转速，离心28min，分离得到单核细胞，将单核细胞加入培养皿中，加入培养基，培养3天，得到细胞培养液。其中培养基为含有8％胎牛血清的DMEM培养基。S12、将步骤S11得到的细胞培养液中的培养基去除，加入PBS缓冲液冲洗1遍后，加入1ml的体积百分比为0.25％的胰酶消化2min，去除胰酶，收集细胞，得到初代细胞。S13、取步骤S12得到的初代细胞，以2×107个/ml的密度，接种于12孔板培养皿中，加入含有8％胎牛血清的DMEM培养基，向培养基中加入1ml的β-联蛋白，传代培养，收集第3代细胞，即得到外周血间充质干细胞。S2、取生理盐水、表皮细胞生长因子和血小板衍生生长因子配制成细胞悬浮液，在所述细胞悬浮液中所述表皮细胞生长因子的含量为6ng/ml，在所述细胞悬浮液中所述血小板衍生生长因子的含量为6ng/ml。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种干细胞生物制剂，其特征在于，由外周血间充质干细胞、纤连蛋白、葛根素、表皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子和溶剂制成；/n其中，所述外周血间充质干细胞的含量为2×10

【技术特征摘要】
1.一种干细胞生物制剂，其特征在于，由外周血间充质干细胞、纤连蛋白、葛根素、表皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子和溶剂制成；
其中，所述外周血间充质干细胞的含量为2×107-4×107个/ml；所述纤连蛋白的含量为0.5-1μg/ml；所述葛根素的含量为6-8ng/ml；所述表皮细胞生长因子的含量为6-12ng/ml；所述血小板衍生生长因子的含量为6-12ng/ml。


2.根据权利要求1所述的干细胞生物制剂，其特征在于，所述外周血间充质干细胞的含量为3×107-4×107个/ml；所述纤连蛋白的含量为0.6-0.8μg/ml；所述葛根素的含量为7ng/ml；所述表皮细胞生长因子的含量为8-10ng/ml；所述血小板衍生生长因子的含量为8-10ng/ml。


3.根据权利要求1所述的干细胞生物制剂，其特征在于，所述溶剂为生理盐水、乙醇和PBS溶液中的任意一种。


4.根据权利要求1-3任一项所述的干细胞生物制剂，其特征在于，所述葛根素的纯度大于98％。


5.一种如权利要求1-4任一项所述的干细胞生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、取外周血，进行传代培养，得到外周血间充质干细胞；
S2、取表皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子和溶剂配制成细胞悬浮液，在所述细胞悬浮液中所述表皮细胞生长因子的含量为6-12ng/ml，在所述细胞悬浮液中所述血小板衍生生长因子的含量为6-12ng/ml；
取葛根素、纤连蛋白和步骤S1得到的外周血间充质干细胞加入到所述细胞悬浮液中，混合，即得到干细胞生物制剂，在所述干细胞生物制剂中所述外周血间充质干细胞的含量为2×...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗旭梅，王丽，卢礼兵，宋丽萍，张娟，刘康，杨燕，
申请(专利权)人：四川驰鼎盛通生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51