一种脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法技术

本发明专利技术公开了一种脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法，包括以下步骤：(1)取脐血造血干细胞，经过离心后，倒掉上层清液；(2)将步骤(1)得到的液体放入冻存液中，吹打均匀，形成细胞悬液，装入无菌细胞冻存管中；(3)对无菌细胞冻存管采用梯度降温冷冻法进行冻存。采用本发明专利技术冻存方法对脐血造血干细胞进行冻存，大大减少了冻存液对脐血造血干细胞的损伤作用，有利于脐血造血干细胞在冻存及复苏过程中细胞活力的提高，能够更好的保持脐血造血干细胞的生物学特征。

A gradient cryopreservation method for umbilical cord blood hematopoietic stem cells

The present invention discloses a kind of umbilical cord blood hematopoietic stem cells gradient cooling and cryopreservation method, which comprises the following steps: (1) from umbilical cord blood hematopoietic stem cells, after centrifugation, the supernatant drained; (2) the step (1) obtained liquid in freezing liquid, army uniform, formation of cell suspension and deposit in the freezing tube into a sterile cell; (3) depository by gradient cooling freezing freezing freezing of sterile cells. The invention adopts the method of cryopreservation of umbilical cord blood hematopoietic stem cells were frozen, greatly reducing the damage of frozen liquid stem cells on umbilical cord blood, umbilical cord blood hematopoietic stem cells in favor of cryopreservation and resuscitation cell viability in the process of improving, to better maintain the biological characteristics of human umbilical cord blood hematopoietic stem cells.

【技术实现步骤摘要】
一种脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法
本专利技术属于生物
，特别涉及一种脐血造血干细胞的冻存方法。
技术介绍
脐血也叫脐带血，是指胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液，通常是废弃不用的。近十几年的研究发现，脐血中含有可以重建人体造血和免疫系统的造血干细胞，可用于造血干细胞移植，治疗多种疾病。因此，脐血已成为造血干细胞的重要来源，特别是无血缘关系造血干细胞的来源。也是一种非常重要的人类生物资源。脐血中含有大量的干细胞，干细胞是生命的种子，它会分化成人体的各种细胞，结出各种不同的果实——血液细胞，神经细胞，骨骼细胞等等。随着科技的发达，医学专家研究出利用脐带血中的干细胞来治疗疾病的方法。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体。这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量，又可进一步分化为各种组织细胞，从而在组织修复等方面发挥积极作用。近三十年来的医学研究发现，脐血中含有非常丰富的造血干细胞(HSC)，可以重建人体造血和免疫系统，可用于造血干细胞移植，治疗血液系统、免疫系统，以及遗传代谢性及先天性疾病。因此，脐血已成为造血干细胞的重要来源，已经被广泛地应本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取脐血造血干细胞，经过离心后，倒掉上层清液；(2)将步骤(1)得到的液体放入冻存液中，吹打均匀，形成细胞悬液，装入无菌细胞冻存管中；(3)对无菌细胞冻存管采用梯度降温冷冻法进行冻存。

【技术特征摘要】
1.一种脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取脐血造血干细胞，经过离心后，倒掉上层清液；(2)将步骤(1)得到的液体放入冻存液中，吹打均匀，形成细胞悬液，装入无菌细胞冻存管中；(3)对无菌细胞冻存管采用梯度降温冷冻法进行冻存。2.根据权利要求1所述的脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法，其特征在于：所述步骤(3)具体为：将无菌细胞冻存管置于冰块中1-3h，然后取出，置于干冰中放置12-24h，之后取出，放置于液氮中冻存。3.根据权利要求1所述的脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法，其特征在于：所述步骤(2)的细胞悬液中，细胞浓度为5-20×106个/mL。4.根据权利要求1所述的脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法，其特征在于：所述步骤(2)中，冻存液由冻存保护剂、胎牛血清、培养基组成；所述培养基由以下组分组成：基础培养基、人血清白蛋白、杨梅素、三七总皂苷、大黄素、亚油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、碱性成纤维细胞生长因子、丙酮酸、L-谷氨酰胺、叶酸、β-巯基乙醇、黄芪多糖、转铁蛋白、维生素、氨基酸。5.根据权利要求4所述的脐血造血干细胞的梯度降温冻存方法，其特征在于：所述步骤(2)...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱学义，徐峰波，聂江华，张雪梅，陈乐，李欢欢，
申请(专利权)人：河南省银丰生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41