一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方与方法组成比例

本发明专利技术提供了一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方和方法，包括配合使用的脱壳液、冷冻液和孵化液；所述脱壳液包括次氯酸钠和氢氧化钠；所述冷冻液包括海藻糖和氯化钠。本发明专利技术所述的一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方和方法，不仅实现了卤虫脱壳卵的冷冻保存，还解决了冷冻保存后孵化率低的问题。

Formula and method for cryopreservation and hatching of Artemia eggs

The present invention provides a formula and a method for cryopreservation and hatching of Artemia eggs, which includes a combination of hulling liquid, frozen liquid and incubation fluid, wherein the shelling solution comprises sodium hypochlorite and sodium hydroxide; the refrigerating solution comprises trehalose and sodium chloride. The formula and method for cryopreservation and hatching of Artemia eggs in the invention not only realizes the cryopreservation of Artemia eggs, but also solves the problem of low hatching rate after cryopreservation.

【技术实现步骤摘要】
一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方与方法
本专利技术属于卤虫脱壳卵低温保存
，尤其是涉及一种卤虫脱壳卵冷冻保存并孵化的技术。
技术介绍
卤虫无节幼体一般用作水产养殖的活体饲料，尤其是作为海鱼、海虾幼虫阶段早期的活体饲料，市场上一般没有卤虫无节幼体这样的活体饲料，只有卤虫卵，无节幼体就是从卤虫卵中孵化的，卤虫卵的孵化可以通过在孵化液中完成，但是目前，人们对卤虫脱壳卵冷冻保存方法的研究还特别少。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术旨在提出一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方，不仅实现了卤虫脱壳卵的冷冻保存，还解决了冷冻保存后孵化率低的问题。为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方，包括配合使用的脱壳液、冷冻液和孵化液；所述脱壳液包括次氯酸钠和氢氧化钠；所述冷冻液包括海藻糖和氯化钠；进一步的，所述孵化液包括但不限于过氧化钙、Vc和碳酸钠的一种或任意几种。进一步的，孵化液中过氧化钙的添加浓度为0.01-0.2g/mL；Vc的添加浓度为0.1-1g/mL；碳酸钠的添加浓度为0.01-0.5g/mL。进一步的，所述脱壳液中的次氯酸钠与水的体积比为2.5：1；氢氧化钠的量按照每克干燥的卤虫卵的0.15克计算。进一步的，所述冷冻液中的海藻糖浓度为0.001-1g/mL，氯化钠的盐浓度10-30‰。本专利技术的另一目的在于提出一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的方法，以利用上述配方成功应用到卤虫脱壳卵的冷冻保存和孵化中，形成一套完整的工艺。为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：一种使用卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方的冷冻保存和孵化的方法，包括如下步骤：(1)脱壳过程：(1-1)将卤虫卵放入盐度为1％的盐水中进行0.5-1h的水合反应；(1-2)加入脱壳液，搅拌并充气，温度控制在0-4℃；(1-3)过筛收集脱壳卵，并脱氯、淡水冲洗；(2)冷冻过程：将脱壳卵称重，按每克卵加0.5mL冷冻液的比例添加，封装放入-20℃-0℃保存；(3)孵化过程：在孵化管中添加盐度为2％的孵化水，加入孵化液和冷冻卵，在28℃的密闭箱中进行孵化。进一步的，步骤(1-2)中卤虫卵与脱壳液的添加量分别为：每100g卤虫卵加入600mL脱壳液。进一步的，步骤(1-3)中的脱氯为采用1.5g/L的硫代硫酸钠溶液进行冲洗3次，或用1.5g/L的硫代硫酸钠溶液浸泡1-2min。进一步的，步骤(1-3)中在进行过筛收集脱壳卵前需要判断是否脱壳完全，判断依据为卤虫卵颜色由棕色最后呈现橘红色，脱壳时间为10-20min。进一步的，步骤(3)中孵化水、冷冻卵和孵化液的添加量分别为：200mL:0.7g:0.5mL。相对于现有技术，本专利技术创造所述的一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方与方法具有以下优势：方法简单，配方易得价格便宜；冷冻保存时间长，可高达1年，并且孵化率高，孵化稳定性高。具体实施方式除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本专利技术所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下面结合实施例来详细说明本专利技术。本专利技术中均采用哈萨克卤虫作为实验菌种。孵化率测定方法按照天津海友佳音生物科技股份有限公司企业标准Q/12NJ4842-2013执行。实施例一(1)脱壳过程：(1-1)将卤虫卵水合反应1h，水合用盐度为1％的盐水，水合过程中充入空气，以防止卵沉底，不利于水合。(1-2)充分吸水后按每100g卤虫卵加入600mL脱壳液的比例加入脱壳液不断搅拌充气，气量充足，保证充气均匀；脱壳液预先放在冰水混合物中降温，在脱壳过程中会产生大量热，脱壳液温度上升，因此脱壳过程需冰浴并不断搅拌充气，控制温度在4℃；卤虫卵颜色由棕色变为灰白色，最后呈橘红色，表明脱壳完全，脱壳时间为15min。(1-3)脱壳完成后，用200目筛网收集脱壳卵，使用大量淡水冲洗冲洗，时沿网兜边沿冲洗，以防止直冲对卵的损伤。(1-4)自来水冲洗后，闻着没有次氯酸钠的刺鼻气味后，浸入1.5％的硫代硫酸钠溶液中脱氯2min，自来水冲洗后即得到经过脱壳处理的卤虫卵。(2)冷冻过程：将经过去壳处理的脱壳卵称重，包装，按每克卵加0.5mL的冷冻液的比例加入冷冻液，冷冻液为海藻糖浓度为0.3g/mL，氯化钠的盐浓度20‰，封装好后放入-20℃的环境中保存，保存时间为7天。(3)孵化过程：采用250mL孵化管进行试验，每支孵化管加200mL氯化钠盐度为2％的孵化水，每支孵化管中加0.7g卤虫卵，同时加0.5mL孵化液，然后将孵化管放置于密闭箱中进行充气孵化，孵化温度为28℃，24h时测定孵化率。其中，孵化液为浓度为0.018g/mL过氧化钙的进行处理的卤虫卵样品号为1-1；孵化液为浓度为0.018g/mL过氧化钙和浓度为0.2g/mLVc的进行处理的卤虫卵样品号为1-2；孵化液为浓度为0.018g/mL过氧化钙、浓度为0.2g/mLVc和浓度为0.3g/mL碳酸钠的进行处理的卤虫卵样品号为1-3；实施例二(1)脱壳过程：(1-1)将卤虫卵水合反应1h，水合用盐度为1％的盐水，水合过程中充入空气，以防止卵沉底，不利于水合。(1-2)充分吸水后加入按每100g卤虫卵加入600mL脱壳液的比例加入脱壳液不断搅拌充气，气量充足，保证充气均匀；脱壳液预先放在冰水混合物中降温，在脱壳过程中会产生大量热，脱壳液温度上升，因此脱壳过程需冰浴并不断搅拌充气，控制温度在4℃；卤虫卵颜色由棕色变为灰白色，最后呈橘红色，表明脱壳完全，脱壳时间为15min。(1-3)脱壳完成后，用200目筛网收集脱壳卵，使用大量淡水冲洗冲洗，时沿网兜边沿冲洗，以防止直冲对卵的损伤。(1-4)自来水冲洗后，闻着没有次氯酸钠的刺鼻气味后，用1.5％的硫代硫酸钠溶液冲洗3次，自来水冲洗后即得到经过脱壳处理的卤虫卵。(2)冷冻过程：将经过去壳处理的脱壳卵称重，包装，按每克卵加0.5mL的冷冻液的比例加入冷冻液，冷冻液为海藻糖浓度为0.07g/mL，氯化钠的盐浓度10‰，，封装好后放入-20℃的环境中保存，保存时间为14天。(3)孵化过程：采用250mL孵化管进行试验，每支孵化管加200mL氯化钠盐度为2％的孵化水，每支孵化管中加0.7g卤虫卵，同时加0.5mL孵化液，然后将孵化管放置于密闭箱中进行充气孵化，孵化温度为28℃，24h时测定孵化率。其中，孵化液为浓度为0.01g/mL过氧化钙的进行处理的卤虫卵样品号为2-1；孵化液为浓度为0.01g/mL过氧化钙和浓度为1g/mLVc的进行处理的卤虫卵样品号为2-2；孵化液为浓度为0.01g/mL过氧化钙、浓度为1g/mLVc和浓度为0.5g/mL碳酸钠的进行处理的卤虫卵样品号为2-3。实施例三(1)脱壳过程：(1-1)将卤虫卵水合反应1h，水合用盐度为1％的盐水，水合过程中充入空气，以防止卵沉底，不利于水合。(1-2)充分吸水后加入按每100g卤虫卵加入600mL脱壳液的比例加入脱壳液不断搅拌充气，气量充足，保证充气均匀；脱壳液预先放在冰水混合物中降温，在脱壳过程中会产生大量热，脱壳液温度上升，因此脱壳过程需冰浴并不断搅拌充气，控制温度在4℃；卤虫卵颜色由棕色变为灰白色，最后呈橘红色本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方，其特征在于：包括配合使用的脱壳液、冷冻液和孵化液；所述脱壳液包括次氯酸钠和氢氧化钠；所述冷冻液包括海藻糖和氯化钠。

【技术特征摘要】
1.一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方，其特征在于：包括配合使用的脱壳液、冷冻液和孵化液；所述脱壳液包括次氯酸钠和氢氧化钠；所述冷冻液包括海藻糖和氯化钠。2.根据权利要求1所述的一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方，其特征在于：所述孵化液包括但不限于过氧化钙、Vc和碳酸钠的一种或任意几种。3.根据权利要求2所述的一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方，其特征在于：孵化液中过氧化钙的添加浓度为0.01-0.2g/mL；Vc的添加浓度为0.1-1g/mL；碳酸钠的添加浓度为0.01-0.5g/mL。4.根据权利要求1所述的一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方，其特征在于：所述冷冻液中的海藻糖浓度为0.001-1g/mL，氯化钠的浓度为10-30‰。5.根据权利要求1所述的一种卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化的配方，其特征在于：所述脱壳液中的次氯酸钠与水的体积比为2.5：1；氢氧化钠的量按照每克干燥的卤虫卵的0.15克计算。6.采用如权利要求1-5任一项所述的卤虫脱壳卵冷冻保存和孵化配方的冷冻保存和孵化方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)脱壳过程：(1-1)将卤虫卵放入盐度为1％的盐水中进行0.5-1h的水合反应；...

【专利技术属性】
技术研发人员：于宏，孙朦朦，孟令炜，何家瑞，王永苓，
申请(专利权)人：天津海友佳音生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12