The invention discloses a wheat fertility restorer gene and application thereof, which belongs to the field of plant biotechnology, in particular to a clone of Recessive Genic Male Sterility Gene and its promoter, and its application in hybrid breeding in. A fertility restorer gene was successfully cloned by flow cytometry and high-throughput sequencing
【技术实现步骤摘要】
小麦育性恢复基因及其应用
本专利技术属于植物生物
,具体涉及植物隐性核雄性不育基因的克隆,及其雄性不育系的繁殖方法和在杂交育种中的应用,更具体地涉及一个隐性核雄性不育基因及其启动子的克隆,及其在杂交育种中的应用。技术背景杂种优势是生物界的普遍现象,杂交种育种是选育新品种的主要途径,是近代育种工作最重要方法。与水稻、玉米、高粱等相比,小麦杂种优势利用的研究相对滞后,近十年来其平均产量的增长也趋于停滞、甚至出现连续多年下滑的局面。小麦是自花授粉作物,小麦杂种优势利用的核心问题是高效生产小麦杂交种的技术体系,国内外大量科学家为此已做出巨大的努力,并取得一系列重要成果。综合近50年来的研究进展,小麦杂种优势利用研究主要集中于:核质互作雄性不育的利用(“三系法”)、化学杀雄技术的利用(“化杀法”)和光温敏核雄性不育的利用(“两系法”)。三系法由于不育系难以繁殖、恢复源较窄、细胞质副效应等原因,未能在生产上大面积应用。化杀法避开了恢复与保持间的相互关系,曾被认为是一种很有希望的小麦杂交制种新技术,但由于其在制种过程中稳定性差、制种成本高及环境污染等多方面原因,在实际生产上也难以推广利用。基于光温敏的两系法虽然具有制种成本低、恢复源广泛,较易获得优势组合等优点,但也面临着两大关键问题——环境因素的不稳定性对不育系育性的影响和利用光温敏特性所选育的小麦不育系十分有限。隐性核雄性不育突变体用于作物杂种优势利用,其不育性具有易被恢复而不易被保持的特性。与细胞质雄性不育杂交小麦体系相比,隐性核雄性不育突变体用于杂交小麦开发具有以下优点:1)不存在外源细胞质的负面影响, ...
【技术保护点】
一种育性恢复基因,其特征在于所述育性恢复基因的核苷酸序列选自下列组的序列之一:(a)如SEQ ID NO:1或2所示的核苷酸序列;(b) 其编码氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列;(c)在严谨条件下能够与(a)或(b)中所述序列的DNA杂交的DNA序列;或(d)与(a)或(c)所述序列有至少80%(优选为至少85%)序列相似性,且具有育性恢复功能的DNA序列;或(e)与(a)‑(d)之任一所述序列互补的DNA序列。
【技术特征摘要】
2016.07.25 CN 20161058876841.一种育性恢复基因,其特征在于所述育性恢复基因的核苷酸序列选自下列组的序列之一:(a)如SEQIDNO:1或2所示的核苷酸序列;(b)其编码氨基酸序列如SEQIDNO:3所示的核苷酸序列;(c)在严谨条件下能够与(a)或(b)中所述序列的DNA杂交的DNA序列;或(d)与(a)或(c)所述序列有至少80%(优选为至少85%)序列相似性,且具有育性恢复功能的DNA序列;或(e)与(a)-(d)之任一所述序列互补的DNA序列。2.一种表达盒,所述表达盒含有一个育性恢复基因,其特征在于所述育性恢复基因的核苷酸序列选自下列组的序列之一:(a)如SEQIDNO:1或2所示的核苷酸序列;(b)其编码氨基酸序列如SEQIDNO:3所示的核苷酸序列;(c)在严谨条件下能够与(a)或(b)中所述序列的DNA杂交的DNA序列;或(d)与(a)-(c)所述序列有至少80%(优选为至少85%)序列相似性,且具有育性恢复功能的DNA序列;或(e)与(a)-(d)之任一所述序列互补的DNA序列。3.根据权利要求2所述的表达盒,其中所述的育性恢复基因可操作性的连有一个可驱动其表达的启动子,所述启动子包括但不限于组成型表达启动子、诱导型启动子、组织特异表达启动子、或时空特异表达启动子。4.根据权利要求3所述的表达盒,其中所述的启动子是一个花粉特异表达启动子,优选地所述花粉特异表达启动子的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示。5.根据权利要求2-4之任一所述的表达盒,其中所述的表达盒还包含一个花粉失活基因,所述花粉失活基因可以干扰含有该基因的雄配子的产生或功能。6.根据权利要求5所述的表达盒,其中所述的花粉失活基因包括但不限于barnase基因、淀粉酶基因、DAM甲基化酶等,优选的所述花粉失活基因是玉米a淀粉酶基因,更优选的其核苷酸序列如SEQIDNO:6所示。7.根据权利要求2-6之任一所述的表达盒,其中所述的表达盒还包含一个筛选基因,所述筛选基因可以用于将含有该表达盒的植株、植物组织细胞或载体筛选出来。8.根据权利要求7所述的表达盒,其中所述的筛选基因包括但不限于抗生素抗性基因、或是抗除草剂基因、或是荧光蛋白基因等,优选的所述筛选基因包括但不限于:氯霉素抗性基因、潮霉素抗性基因、链霉素抗性基因、奇霉素抗性基因、磺胺类抗性基因、草甘磷抗性基因、草丁膦抗性基因、bar基因、红色荧光基因DsRED、mCherry基因、青色荧光蛋白基因、黄色荧光蛋白基因、荧光素酶基因、绿色荧光蛋白基因等。9.一种调控植物育性的方法,所述方法通过将育性恢复基因转入到兰州核雄性不育突变体或其等位突变体中,使兰州核雄性不育突变体或其等位突变体的雄性育性恢复,其特征在于所述育性恢复基因的核苷酸序列选自下列组的序列之一:(a)如SEQIDNO:1或2所示的核苷酸序列;(b)其编码氨基酸序列如SEQIDNO:3所示的核苷酸序列;(c)在严谨条件下能够与(a)或(b)中所述序列的DNA杂交的DNA序列;或(d)与(a)-(c)所述序列有至少80%(优选为至少85%)序列相似性,且具有育性恢复功能的DNA序列;或(e)与(a)-(d)之任一所述序列互补的DNA序列。10.根据权利要求9所述的方法,其中所述的育性恢复基因可操作性的连有一个花粉特异表达的启动子,可以驱动育性恢复基因在植物花粉中的表达。11.根据权利要求10所述的方法,其中所述的启动子选自由MS26、NP1、MSP1、PAIR1、PAIR2、ZEP1、MELL、PSS1、TDR、UDT1、GAMYB4、PTC1、API5、WDA1、CYP704B2、MS26、MS22、DPW、MADS3、OSC6、RIP1、CSA、AID1、5126、Ms45、FRG1等育性调控基因的启动子构成的组之一。12.根据权利要求11所述的方法,其中所述的启动子的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示。13.一种雄性不育系的繁殖方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:(a)向兰州核雄性不育系或其等位不育系中转入下述载体,以获得含有下述载体的保持系,所述载体包含:育性恢复基因FRG1,所述育性恢复基因FRG1可以恢复兰州核雄性不育系...
【专利技术属性】
技术研发人员:马力耕,王峥,李健,何航,陈少霞,邓兴旺,
申请(专利权)人:未名兴旺系统作物设计前沿实验室北京有限公司,北京大学,
类型:发明
国别省市:北京,11
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