Anti AFP CAR‑T细胞及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种Anti AFP CAR‑T细胞及其制备方法和应用，所述Anti AFP CAR‑T细胞在T细胞内表达SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白；所述SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白中，所述SCFV用于结合所述AFP蛋白，并且所述SCFV的氨基酸序列为第一序列。该细胞经过对T细胞修饰和改造得到，并且能够特异性识别和杀伤肝癌，适用于相应肿瘤疾病的预防和治疗。

Anti AFP CAR T cell and preparation method and application thereof

The invention provides a Anti AFP CAR T cell and its preparation method and the application of the Anti AFP CAR T cells expression of SCFV - IgD - CD28 - OX40 - CD3 zeta fusion protein in T cells; the SCFV - IgD - CD28 - OX40 - CD3 zeta fusion protein. The SCFV is used in conjunction with the AFP protein and the amino acid sequence of the SCFV for the first series. The cell is modified and modified by T cells, and can specifically identify and kill liver cancer, which is suitable for the prevention and treatment of the corresponding tumor diseases.

【技术实现步骤摘要】
AntiAFPCAR-T细胞及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种AntiAFPCAR-T细胞及其制备方法和应用，属于基因修饰细胞及肿瘤治疗

技术介绍
原发性肝癌(hepatocellularcarcinoma，简称：HCC)居恶性肿瘤发病率的第五位,全球每年死亡人数约100万。目前，大部分原发性肝癌患者缺乏有效的治疗手段,总的生存率仅为3％-5％。肝移植虽已成为治疗原发性肝癌的重要手段，但供体短缺、手术损伤、免疫排斥以及费用高昂等问题构成了肝脏器官移植技术发展的主要障碍。因此，有必要探索一种新的、有效治疗途径。随着分子生物学、基因工程技术及免疫学的飞速发展，以免疫治疗为基础的生物治疗已显示出良好的应用前景。嵌合抗原受体T细胞(ChimericantigenreceptorTcell，简称：CAR-Tcell)是通过基因修饰的手段，使能特异性识别靶抗原的单克隆抗体的单链可变区(singlechainFvdomain，简称：SCFV)表达在细胞表面，同时通过跨膜区与人工设计的细胞胞内的活化增殖信号域相耦连。表达CAR的T细胞可通过SCFV直接识别并结合肿瘤细胞表面的肿瘤相关抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Anti AFP CAR‑T细胞，其特征在于，所述Anti AFP CAR‑T细胞在T细胞内表达SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白；所述SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白中，所述SCFV用于结合所述AFP蛋白，并且所述SCFV的氨基酸序列为第一序列，所述第一序列为：EVQLVQSGAEVKKPGESLTISCKASGYSFPNYWITWVRQMSGGGLEWMGRIDPGDSYYTTYNPSFQGHVTISIDKSTNTAYLHWNSLAASDTAMYYCARYYVSLVDIWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSVLTQPAKVSG...

【技术特征摘要】
1.一种AntiAFPCAR-T细胞，其特征在于，所述AntiAFPCAR-T细胞在T细胞内表达SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白；所述SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白中，所述SCFV用于结合所述AFP蛋白，并且所述SCFV的氨基酸序列为第一序列，所述第一序列为：EVQLVQSGAEVKKPGESLTISCKASGYSFPNYWITWVRQMSGGGLEWMGRIDPGDSYYTTYNPSFQGHVTISIDKSTNTAYLHWNSLAASDTAMYYCARYYVSLVDIWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSVLTQPAKVSGSPGQKITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVNNRPSEVSNRFSGAKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTTGSRSVFGGGTKLTVLG。2.根据权利要求1所述的AntiAFPCAR-T细胞，其特征在于，所述SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白中，所述IgD的氨基酸序列为第二序列，所述第二序列为：TFTCFVVGSDLKDAHLTWEVAGKVPTGGVEEGLLERHSNGSQSQHSRLTLPRSLWNAGTSVTCTLAHPSLPPQRLMALREPAAQAPVKLSTNLLASSDPPEAA。3.根据权利要求2所述的AntiAFPCAR-T细胞，其特征在于，所述SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白中，所述CD28的氨基酸序列为第三序列，所述第三序列为：FWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSALLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS。4.根据权利要求3所述的AntiAFPCAR-T细胞，其特征在于，所述SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白中，所述OX40的氨基酸序列为第四序列；所述CD3ζ的氨基酸序列为第五序列；所述第四序列为：RRDQRLPPDSHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKI；所述第五序列为：RVKFSRSAEPPAYQQGQNQLYNELNLGRSEEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR。5.根据权利要求4所述的AntiAFPCAR-T细胞，其特征在于，所述SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ融合蛋白中，所述SCFV–IgD–CD28–OX40–CD3ζ的氨基酸序列为第六序列，所述第六序列为：EVQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘未斌，
申请(专利权)人：刘未斌，
类型：发明
国别省市：北京,11