一种利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法技术

本发明专利技术涉及检测技术领域，具体是一种利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法。包括以下步骤：1)羊角月牙藻的培养；2)生长抑制试验；3)不同浓度全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻增长率的影响。本发明专利技术的利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法克服了目前测定水中PFOA生物毒性中周期长、操作复杂的困难，提供了一个简便、灵敏、系统的检测水中全氟辛烷磺酸(PFOA)毒性的方法，该方法方便、快速、成本低廉。

Method for detecting toxicity of PFOS in water by horn crescent algae

The invention relates to the technical field of detection, in particular to a method for detecting the toxicity of PFOS in water by horn crescent algae. It includes the following steps: 1) cultivation of horn crescent algae; (2) growth inhibition test; (3) effects of different concentrations of PFOS on growth rate of crescent algae. Methods Selenastrum capricornutum determination of PFOS toxicity by the invention overcomes the determination of biological toxicity of water cycle in PFOA long and complicated operating difficulties, provides a simple and sensitive system, determination of perfluorooctane sulfonate (PFOA) method of toxicity, the method is convenient, fast and cost low.

【技术实现步骤摘要】
一种利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法
本专利技术涉及检测
，具体是一种利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法。
技术介绍
全氟辛酸是一种全氟有机酸，具有疏水和疏油特性，在碳氧化合物表面能使氟化物具有极高的表面活性，且耐高温和耐强氧化剂，化学结构远较其他表面活性剂稳定，因此被广泛用于数百种化学工业、机械工业和日用全氟化工产品中。20世纪50年代伙计、医药品和化妆品，以及电子产品的生产和化学镀膜领域。其大量生产和使用已在全球生态系统中造成了严重的环境累计和持久性污染，成为严重威胁生态环境和人类健康的安全隐患。2005年，美国环境保护书(EPA)见PFOA列为可以致癌物质。由于该类物质的极性和迁移性使其可以在不降解情况下进入海洋或地下水中，对水体中生物体构成威胁。急性毒性数据显示，PFOA类物质半致死浓度远高于环境中的实际含量。因此，关于PFOA的低剂量、长期慢性毒性研究更具有现实意义。目前，人类对PFOA等全氟化合物有机化合物对水体重的生物体的毒性影响主要集中在大型植物、两栖动物、鱼类、蚌类和大型溞类。这些模式和非模式的生物生长周期均在两周以上，试验周期长，浪费资源。羊角月牙藻因其生长迅速，易于实验室培养，国内外均已将羊角月牙藻作为化学品、农药登记中环境试验的模式生物，广泛应用于生命科学、毒理学、环境科学和农业科学等领域。
技术实现思路
针对上述现有技术中的不足之处，本专利技术旨在提供一种简便、灵敏、系统的利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法，该方法方便、快速、成本低廉。为解决上述技术问题，本专利技术一种利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法，包括以下步骤：1)羊角月牙藻的培养羊角月牙藻用L9培养基进行培养，每2～4天转接一次，至少连续转接三次，确保其处于对数生长期，在23±1℃、4440～8880lux持续光照条件下培养；2)生长抑制试验将全氟辛烷磺酸设为5个浓度梯度，分别为2.0、4.0、8.0、16.0、32.0、64.0及128.0mg/L，每个梯度设置3个平行，另设1个空白对照组，在每个三角瓶中分别加入50ml配制好的2倍试验液浓度及50ml浓度为4×107cells/L的藻液，试验在23±1℃，持续光照条件下进行，采用概率单位法分别计算72hErC50值；3)不同浓度全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻增长率的影响利用72h生长率抑制百分率评价不同浓度全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻生长抑制的影响，72h后，观察每个处理下羊角月牙藻藻细胞浓度，处理组，藻类生长率的抑制百分率的计算公式为：Ir是处理组藻类生长抑制百分率，μc是空白组生长率的平均值，μt是处理组生长率的平均值，其中μ的计算公式为：μj-i是在时间点j到时间点i之间的平均生长率，Xi是在时间点i时的藻生物量，用细胞数表示为个/ml，Xj是在时间点j时的藻生物量，用细胞数表示为个/ml。优选的，在步骤3)中所述浓度为8.0、16.0及32.0mg/L。本专利技术的利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法克服了目前测定水中PFOA生物毒性中周期长、操作复杂的困难，提供了一个简便、灵敏、系统的检测水中全氟辛烷磺酸(PFOA)毒性的方法，该方法方便、快速、成本低廉。附图说明图1为本专利技术中不同浓度的全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻生长率的影响。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例1本专利技术的利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法，包括以下步骤：1)羊角月牙藻的培养羊角月牙藻用L9培养基进行培养，每2～4天转接一次，至少连续转接三次，确保其处于对数生长期，在23±1℃、4440～8880lux持续光照条件下培养；2)生长抑制试验将全氟辛烷磺酸设为5个浓度梯度，分别为2.0、4.0、8.0、16.0、32.0、64.0及128.0mg/L，每个梯度设置3个平行，另设1个空白对照组，在每个三角瓶中分别加入50ml配制好的2倍试验液浓度及50ml浓度为4×107cells/L的藻液，试验在23±1℃，持续光照条件下进行，采用概率单位法分别计算72hErC50值；3)不同浓度全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻增长率的影响利用72h生长率抑制百分率评价不同浓度全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻生长抑制的影响，72h后，观察每个处理下羊角月牙藻藻细胞浓度，处理组，藻类生长率的抑制百分率的计算公式为：Ir是处理组藻类生长抑制百分率，μc是空白组生长率的平均值，μt是处理组生长率的平均值，其中μ的计算公式为：μj-i是在时间点j到时间点i之间的平均生长率，Xi是在时间点i时的藻生物量，用细胞数表示为个/ml，Xj是在时间点j时的藻生物量，用细胞数表示为个/ml。由急性致死实验筛选合适的处理剂量，结果得知：全氟辛烷磺酸(PFOA)半数抑制浓度为54.0mg/L，无可观察效应浓度NOEC为8.0mg/L，可观察效应浓度LOEC值为16.0mg/L，选择72h-EC50值以下NOEC值以上考察不同PFOA浓度对羊角月牙藻生长抑制率的影响。实施例2以浓度为16.0mg/L的全氟辛烷磺酸(PFOA)溶液来代替实施例1中的步骤3中8.0mg/L的全氟辛烷磺酸(PFOA)溶液，其他条件同实施例1；试验表明，与对照相比，16.0mg/L得全氟辛烷磺酸(PFOA)藻细胞浓度增长量稍低于空白对照组。实施例3以浓度为32.0mg/L的全氟辛烷磺酸(PFOA)溶液来代替实施例1中的步骤3中16.0mg/L的全氟辛烷磺酸(PFOA)溶液，其他条件同实施例1；试验表明，与对照相比，32.0mg/L得全氟辛烷磺酸(PFOA)藻细胞浓度增长量显著于空白对照组。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)羊角月牙藻的培养羊角月牙藻用L9培养基进行培养，每2～4天转接一次，至少连续转接三次，确保其处于对数生长期，在23±1℃、4440～8880lux持续光照条件下培养；2)生长抑制试验将全氟辛烷磺酸设为5个浓度梯度，分别为2.0、4.0、8.0、16.0、32.0、64.0及128.0mg/L，每个梯度设置3个平行，另设1个空白对照组，在每个三角瓶中分别加入50ml配制好的2倍试验液浓度及50ml浓度为4×107cells/L的藻液，试验在23±1℃，持续光照条件下进行，采用概率单位法分别计算72hErC50值；3)不同浓度全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻增长率的影响利用72h生长率抑制百分率评价不同浓度全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻生长抑制的影响，72h后，观察每个处理下羊角月牙藻藻细胞浓度，处理组，藻类生长率的抑制百分率的计算公式为：

【技术特征摘要】
1.一种利用羊角月牙藻检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)羊角月牙藻的培养羊角月牙藻用L9培养基进行培养，每2～4天转接一次，至少连续转接三次，确保其处于对数生长期，在23±1℃、4440～8880lux持续光照条件下培养；2)生长抑制试验将全氟辛烷磺酸设为5个浓度梯度，分别为2.0、4.0、8.0、16.0、32.0、64.0及128.0mg/L，每个梯度设置3个平行，另设1个空白对照组，在每个三角瓶中分别加入50ml配制好的2倍试验液浓度及50ml浓度为4×107cells/L的藻液，试验在23±1℃，持续光照条件下进行，采用概率单位法分别计算72hErC50值；3)不同浓度全氟辛烷磺酸对羊角月牙藻增长率的影响利用72h生长率抑制百分率评价不同浓度全氟辛烷磺...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨鸿波，龚会琴，李占彬，王艳娇，成国坤，肖飞，何伟，谢锋，谭红，
申请(专利权)人：北京化工大学，贵州省分析测试研究院，
类型：发明
国别省市：北京,11