白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白在DENV2感染HaCaT细胞中的应用制造技术
The use of Aedes albopictus salivary 34K2 recombinant protein in DENV2 infected HaCaT cells
The present invention relates to the field of biotechnology, in particular to a Aedes albopictus salivary 34K2 recombinant protein to promote dengue virus proliferation, its preparation method including rAb 34K2 protein can promote the proliferation of DENV2 in HaCaT cells. The mechanism of inhibiting DENV2 infection of HaCaT cells expressing IFN type I interferon alpha / beta promotes the proliferation of virus, and rAb 34K2 protein can induce the apoptosis of HaCaT cells infected with DENV2, has important significance in the research on the mechanism of disease transmission of mosquito Aedes albopictus salivary protein group.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
，具体涉及白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白在DENV2感染HaCaT细胞中的应用。
技术介绍
蚊虫唾液蛋白具有抗凝血、抗炎、免疫调控的功能，是当前研究的热点。唾液腺转录组学和蛋白质组学研究均发现在伊蚊属蚊虫唾液腺中有一组雌蚊特异性高表达、分子量大小为34kDa但功能未知的唾液组分蛋白，故命名为34K蛋白家族。该蛋白编码基因均含有信号肽序列，表明其参与组成蚊虫唾液组分蛋白。白纹伊蚊俗称花脚蚊，因生性凶猛、攻击力强，也被称为“亚洲虎蚊”，是我国登革热的重要媒介。对白纹伊蚊唾液腺组学研究显示有两个34K蛋白存在于白纹伊蚊唾液内，分别命名为34K1，34K2。我们先前的研究发现蚊虫吸血可调控34K2蛋白的表达，但该蛋白在蚊虫吸血、传病中的作用并不清楚。为此，我们依据NCBI上白纹伊蚊34K-2成熟肽基因序列，原核克隆表达了该蛋白并分离纯化获得了有活性的重组蛋白，进而探讨了该重组蛋白在DENV2感染HaCaT细胞(人角质形成细胞)中的应用。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术提供了白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白(以下简称rAb-34K2)在DEN...
【技术保护点】
一种白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白的应用，其特征在于：白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白在DENV2感染HaCaT细胞中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白的应用，其特征在于：白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白在DENV2感染HaCaT细胞中的应用。2.根据权利要求1所述的的应用，其特征在于：所述的白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白在DENV2感染HaCaT细胞中细胞增殖和抑制病毒增殖中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：是利用实时无标记细胞动态分析法监测不同浓度的白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白对HaCaT细胞生长的影响。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：对DENV2感染HaCaT细胞中抑制病毒增殖的应用，是通过DENV2NS1基因/内参基因GAPDHRNA的比值对病毒核酸相对表达量进行统计学分析。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述统计学分析，包括以下步骤：(1)以感染DENV2的HaCaT细胞的RNA逆转录的cDNA为模板，用引物NSIF(SEQIDNO：1)和NS1R(SEQIDNO：2)、引物GAPDHF(SEQIDNO：3)和GAPDHR(SEQIDNO：4)分别对NSI基因和GAPDH基因的进行PCR扩增；(2)扩增产物经纯化回收后进行10-3-10-9的梯度稀释用...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴家红，商正玲，程金芝，马亚萍，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：贵州;52
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