利用HPLC测定盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质的方法技术

本发明专利技术公开了利用HPLC测定盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质的方法，所述方法的色谱条件为：色谱柱为辛烷基硅烷键合硅胶柱；流动相为磷酸盐缓冲液与第一有机溶剂的混合溶液。采用该方法可以将盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质在同一色谱条件下进行快速高效的分离，有效控制原料药和制剂的质量。该检测方法专属性强、检测灵敏度高、精密度高、准确性强、操作方便，可有效控制产品质量。

Method for determination of related substances in hydrochloride hydrochloride bulk drug and its preparation by HPLC

The invention discloses a test method for the determination of related substances of amine raw materials in its preparation by using HPLC, the method of chromatographic condition: chromatographic column for octyl silane bonded silica gel column; the mobile phase was a mixed solution of phosphate buffer and the first organic solvent. The method can be used for the rapid and efficient separation of the substances in the hydrochloride hydrochloride API and its preparations under the same chromatographic conditions, and effectively control the quality of the raw materials and preparations. The detection method has the advantages of strong specificity, high sensitivity, high precision, good accuracy and convenient operation, and can effectively control the quality of products.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物分析
，具体而言，本专利技术涉及一种利用HPLC(高效液相色谱法)测定盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质的方法。
技术介绍
盐酸阿考替胺(Acotiamidehydrochloridehydrate)是全球首个功能性消化不良(Functionaldyspepsia，FD)治疗药，是由日本安斯泰来制药公司和日本泽里新药株式会社联合开发的一种新型的促进胃蠕动的毒蕈碱M1和M2受体阻断剂，其在消化道主要是通过抑制乙酰胆碱酯酶的机制起作用，可促进胃动力、改善胃容纳障碍、增强胃底扩张。盐酸阿考替胺口服片剂(商品名为Acofide，规格为100mg)，于2013年6月6日在日本被批准用于治疗功能性消化不良，临床上用于餐后饱胀、上腹胀痛、早期腹胀等功能性消化不良疾病的治疗，具有良好的疗效，无耐药性并显示高安全性。与一般促胃肠动力药(伊托必利、莫沙比利)不同，盐酸阿考替胺能够通过促进肠内胆碱神经末梢乙酰胆碱的释放来提高胃肠蠕动而改善受损的胃动力与滞后的胃的排空，为第一个胃肠蠕动改善药物。然而，目前分析盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质的方法仍有待改进。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提供一种快速分析分离盐酸阿考替胺降解产物、工艺副反应杂质和中间体的高效液相色谱法，从而实现了盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质在同一色谱条件下的分离测定。盐酸阿考替胺的化学名称为N-[2-(二异丙基氨基)乙基]-2-[(2-羟基-4,5-二甲氧基苯甲酰基)氨基]-1,3-噻唑-4-羧酰胺的盐酸盐三水化合物，其结构式为：盐酸阿考替胺合成采用路线：盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质有以下三个来源：一为本品合成过程中带入的原料、中间体、降解产物；二为合成反应中生成的副产物；三为贮存过程中由于环境的影响产生的降解产物，主要有：杂质1为原料：(4S)-3-[(5S)-5-(4-氟苯基)-5-羟基-1-氧代戊基]-4-苯基-2-噁唑烷酮；杂质2为原料：2-氨基噻唑-4-甲酸甲酯；杂质3为中间体：(S)-3-((2R,5R)-5-(4-氟苯基)-2-((S)-(4-氟苯基氨基)(4-羟基苯基)甲基)-5-羟基苯基)-4-苯基-2-噁唑烷酮；杂质4为副反应产物：2-(2,4,5-三甲氧基-苯甲酰胺基)-噻唑-4-羧酸-(2-二异丙基氨基-乙基)-酰胺；杂质5为副反应产物、降解产物：N-[2-(二异丙基氨基)乙基]-2-羟基-4,5-二甲氧基苯甲酰胺；杂质6为副反应产物、降解产物：2-氨基-N-[2-(二异丙基氨基)乙基]噻唑-4-羧酰胺；杂质7为副反应产物、降解产物：2-[(2-羟基-4,5-二甲氧基苯甲酰基)氨基]-1,3-噻唑-4-羧酸。对于合成、生产、贮存盐酸阿考替胺原料药及制备、贮存盐酸阿考替胺制剂的过程中都可能产生的以上杂质，均需进行严格控制，以保证产品质量。因此，实现盐酸阿考替胺及其制剂中有关物质的快速分离和分析在合成和制剂过程的质量控制方面都具有重要的现实意义。在本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种利用HPLC测定盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质的方法。所述方法的色谱条件为：色谱柱为辛烷基硅烷键合硅胶柱；流动相为磷酸盐缓冲液与第一有机溶剂的混合溶液。由此，可以将盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质在同一色谱条件下进行快速高效的分离，可有效控制原料药和制剂的质量。该检测方法灵敏度高、专属性强、精密度高、准确性强、操作方便，可有效控制产品的质量。根据本专利技术实施例的测定盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质的方法，还可以具有以下附加技术特征：根据本专利技术的实施例，梯度洗脱的条件为：0分钟时，所述磷酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为85％:15％；20分钟时，所述磷酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为65％:35％；25-30分钟时，所述磷酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为50％:50％；30.01－35分钟时，所述磷酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为(50－85)％:(50－15)％；由此得到的分离效果最佳，峰形最好。根据本专利技术的实施例，所述梯度洗脱的条件为：时间/min磷酸盐缓冲液/％第一有机溶剂/％0851520653525505030505030.018515358515根据本专利技术的实施例，所述磷酸盐缓冲液为选自磷酸二氢钾缓冲液、磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钾缓冲液、磷酸氢二钠缓冲液中的至少一种，优选为磷酸二氢钾缓冲液或磷酸二氢钠缓冲液，最优选为磷酸二氢钾缓冲液。由此，可以进一步改善色谱峰的峰形。根据本专利技术的实施例，所述磷酸盐缓冲液中含有0.1体积％～0.3体积％的二乙胺，优选含有0.2体积％的二乙胺。由此，可以进一步改善色谱峰的峰形。根据本专利技术的实施例，所述磷酸盐缓冲液的pH值为5.0～6.0，优选为6.0。根据本专利技术的实施例，采用磷酸调节所述磷酸盐缓冲液的pH值至5.0～6.0。由此，可以进一步改善主峰与杂质峰之间的分离度，降低主峰的拖尾因子，提高主峰的理论塔板数。根据本专利技术的实施例，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.001mol/L～0.10mol/L，优选为0.01mol/L～0.05mol/L，最优选为0.02mol/L。由此，可以在保证分离效果的情况下将对仪器和色谱柱的损害减小至最低。根据本专利技术的实施例，所述第一有机溶剂为甲醇和/或乙腈，优选为乙腈。由此，可以进一步提高分离效率。根据本专利技术的实施例，本专利技术的分析方法包括：采用第二有机溶剂和水的混合溶液将待检测样品配制成样品溶液，将样品溶液注入高效液相色谱仪，完成盐酸阿考替胺及制剂中有关物质的测定。根据本专利技术的实施例，所述第二有机溶剂为甲醇和/或乙腈，优选为乙腈。根据本专利技术的实施例，所述第二有机溶剂和水的混合比为(80体积％：20体积％)～(20体积％：80体积％)，优选为30体积％：70体积％。根据本专利技术的实施例，注入高效液相色谱仪的样品溶液为2～20μL，优选为10μL。根据本专利技术的实施例，高效液相色谱仪的检测波长为215nm～225nm，优选为220nm。由此，可以显著提高检测灵敏度。根据本专利技术的实施例，所述流动相的流速为0.8～1.2mL/min，优选为1.0mL/min。由此，可以进一步提高分离度。根据本专利技术的实施例，所述色谱柱的柱温为25℃～35℃，优选为30℃。由此，可以显著改善相邻色谱峰之间的分离度。根据本专利技术的实施例，所述制剂包括药学上可接受的给药剂型，任选地，所述制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂。根据本专利技术的具体实施例，测定盐酸阿考替胺及其制剂中有关物质的方法，可以依照以下步骤实现：取盐酸阿考替胺原料药约25mg或盐酸阿考替胺制剂适量(约相当于盐酸阿考替胺25mg)，精密称定，置50ml量瓶中，加乙腈-水(30:70)超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成每1ml中约含盐酸阿考替胺0.5g的溶液，作为供试品溶液；精密量取0.1ml，置100ml量瓶中，用乙腈-水(30:70)稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。依照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)试验，用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液为流动相A，以第一有机溶剂为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用HPLC测定盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质的方法，其特征在于，所述方法的色谱条件为：色谱柱为辛烷基硅烷键合硅胶柱；流动相为磷酸盐缓冲液与第一有机溶剂的混合溶液。

【技术特征摘要】
1.一种利用HPLC测定盐酸阿考替胺原料药及其制剂中有关物质的方法，其特征在于，所述方法的色谱条件为：色谱柱为辛烷基硅烷键合硅胶柱；流动相为磷酸盐缓冲液与第一有机溶剂的混合溶液。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，梯度洗脱的条件为：0分钟时，所述磷酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为85％:15％；20分钟时，所述磷酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为65％:35％；25-30分钟时，所述磷酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为50％:50％；30.01－35分钟时，所述磷酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为(50-85)％:(50-15)％；任选地，所述梯度洗脱的条件为：时间/min磷酸盐缓冲液/％第一有机溶剂/％0851520653525505030505030.018515358515。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液为选自磷酸二氢钾缓冲液、磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钾缓冲液、磷酸氢二钠缓冲液中的至少一种，优选为磷酸二氢钾缓冲液或磷酸二氢钠缓冲液，最优选为磷酸二氢钾缓冲液。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液中含有0.1体积％～0.3体积％的二乙胺，优选含有0.2体积％的二乙胺。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液...

【专利技术属性】
技术研发人员：付美玲，高宏平，钱丽娜，杨科，
申请(专利权)人：中美华世通生物医药科技武汉有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42