The invention relates to a method for measuring soluble sugar, which comprises the following steps: sample pretreatment, distilled water extraction, soluble sugar, color rendering and color matching, making standard curves and calculating soluble sugar content. The present invention in different experimental conditions and determination of content, the choice of different sample pretreatment methods, in order to ensure favorable experimental conditions; simplify the experimental procedure, reduce the sampling quality, centrifugation, supernatant was collected, and cancel the supernatant, constant volume and other steps, to complete the extraction process of exploration in the tube with scale plug, reducing the time and the cost, especially suitable for the determination of bulk samples.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种可溶性糖的测定方法,尤其涉及一种可溶性糖的快速、经济的测定方法。
技术介绍
现有技术中可溶性糖的测定方法一般以葡萄糖作为可溶性糖的测定指标,测定方法有4种,苯酚硫酸法测定时试剂反应剧烈,液体容易溅出,苯酚易被氧化;斐林试剂比色法会使次甲基兰与空气接触被氧化;3、5-二硝基水杨酸比色法仅是还原糖的测定;蒽酮硫酸比色法显色稳定,重现性好,操作简便,比较稳定,结果准确可靠,原理是可溶性糖在硫酸作用下生成糖醛或羟甲基糠醛化合物,而后者可与蒽酮作用形成蓝绿色络合物(糖醛衍生物),在620nm波长下的吸光值与可溶性糖含量成正比。可溶性糖易溶于水及乙醇溶液,可用温水或乙醇溶液提取试样中的可溶性糖。请参阅图1所示,其为本专利技术的现有技术中可溶性糖的测定方法,其具体过程为:方法一:(1)乙醇提取可溶性糖:各种植物叶片或种子在110℃的烘箱内鼓风固定15min,然后调温至70℃过夜。干叶片磨碎后称取50mg样品倒入10mL刻度离心管内加入4mL80%乙醇,置于80℃水浴不断搅拌40min,离心(如3000rpm,30min),收集上清液,其残渣加80%乙醇重复提2次,合并上清液。在上清液中加10mg活性炭,80℃脱色30min,定容至10mL,过滤后取滤液测定。(2)可溶性糖的测定:取一定量的乙醇提取液,浓缩至0.05~0.1mL(或者取乙醇提取液1mL),加入3mL蒽酮试剂[150mg蒽酮溶于100mL稀硫酸(76mL浓硫酸入30mL水中)],90℃保温15min,在620nm处测定OD值。取20~50u ...
【技术保护点】
一种可溶性糖的测定方法,其特征在于,该具体过程为:步骤a1.样品前处理:将植物组织在110℃杀青15min,70℃烘干,粉碎,过40目筛;步骤a2.蒸馏水提取可溶性糖:称取20mg样品于10mL带塞的刻度试管中,加入10mL蒸馏水至该刻度试管中,盖好塞子,放在铝制试管架上;将其置于80℃水浴中浸提60min,向其中加40mg活性碳,盖好塞子,反复震荡摇匀;在该80℃水浴中脱色30min,取出冷却至室温,过滤后取滤液测定;步骤a3.显色和比色:取1mL蒸馏水提取液,向其内加入10mL蒽酮试剂,盖好塞子,反复震荡摇匀;在90℃水浴中保温15min,取出冷却至室温,在620nm处测定OD值;步骤a4.制作标准曲线:样品测定前,配制并测定葡萄糖标准溶液的OD值,以OD值对葡萄糖标准溶液浓度数值绘标准曲线并得到回归方程;步骤a5.计算可溶性糖含量:将测得的各样品OD值代入回归方程得到各样品浓度,并计算可溶性糖含量。
【技术特征摘要】
1.一种可溶性糖的测定方法,其特征在于,该具体过程为:
步骤a1.样品前处理:
将植物组织在110℃杀青15min,70℃烘干,粉碎,过40目筛;
步骤a2.蒸馏水提取可溶性糖:
称取20mg样品于10mL带塞的刻度试管中,加入10mL蒸馏水至该
刻度试管中,盖好塞子,放在铝制试管架上;将其置于80℃水浴中浸提60
min,向其中加40mg活性碳,盖好塞子,反复震荡摇匀;在该80℃水浴
中脱色30min,取出冷却至室温,过滤后取滤液测定;
步骤a3.显色和比色:
取1mL蒸馏水提取液,向其内加入10mL蒽酮试剂,盖好塞子,反复
震荡摇匀;在90℃水浴中保温15min,取出冷却至室温,在620nm处测
定OD值;
步骤a4.制作标准曲线:
样品测定前,配制并测定葡萄糖标准溶液的OD值,以OD值对葡萄
糖标准溶液浓度数值绘标准曲线并得到回归方程;
步骤a5.计算可溶性糖含量:
将测得的各样品OD值代入回归方程得到各样品浓度,并计算可溶性
糖含量。
2.根据权利要求1所述的可溶性糖的测定方法,其特征在于,上述步
骤a1中,若在野外,还需测定其他数量指标如激素或酶,用记号笔于封口
袋上分别标记,将样品迅速放入封口袋中,用细绳绑好放入液氮罐中冰冻
至少15min,以减少可溶性糖、激素和酶等被呼吸的消耗量。
3.根据权利要求1或2所述的可溶性糖的测...
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