运用SYBR Green I荧光染料进行特异性DNA检测的试纸条技术制造技术

本发明专利技术提供一种运用SYBR?Green?I荧光染料在试纸条上进行特异性DNA快速检测的技术，它包括以下步骤：选择尼龙膜作为试纸条的材料；将探针点到尼龙膜上，探针为待检测的特异性核苷酸序列，然后紫外线照射，烘烤，黑暗干燥储存；以待测样本为模板、以探针为模板设计的引物为引物，进行PCR扩增，之后94℃变性10min，立即放4℃，得到待测序列；缓冲液冲洗尼龙膜，在尼龙膜上点杂交液，其中杂交液中包含SYBR?Green?I和待测序列，室温黑暗杂交，用缓冲液、去离子水顺次清洗尼龙膜，用488-nm激光的成像扫描仪成像，根据尼龙膜是否发光判定结果。该方法简单﹑廉价﹑快速、适用于临床快速诊断。

【技术实现步骤摘要】
运用SYBR Green I荧光染料进行特异性DNA检测的试纸条技术
本专利技术涉及生物技术应用领域，具体地说是一种运用SYBR Green I荧光染料在试纸条上进行特异性DNA快速检测的技术。
技术介绍
病原体检测在很多研究领域一直都有很重要的应用价值，尤其是在医疗和食品行业。病原体的快速、准确检测和识别是有效控制感染和早期治疗的关键。但是，标准的病原体培养不仅需要在培养基上孵育至少8小时，还要进行额外的生化或免疫识别，既繁琐又费时。相比之下，定量聚合酶链式反应(qPCR)和微阵列等基于核酸的检测方法，更快速、灵敏，然而，这些方法中仍然有许多既复杂又昂贵。近年来，已报道的侧向层析检测方法对纸质生物学鉴定的发展做出了巨大贡献。侧向层析检测方法最初是用来进行免疫分析，它运用纳米粒子和乳胶微球体能够对潜在的核酸进行即时的可视化检测。但是此方法标记步骤复杂，不能进行多重检测。
技术实现思路
本专利技术所 要解决的技术问题是针对以上现有技术的不足，提供一种简单、廉价、快速、适用于临床快速诊断的进行特异性DNA检测的试纸条技术。本专利技术所采用的技术方案为:一种运用SYBR Green本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种运用SYBR Green I荧光染料进行特异性DNA检测的试纸条技术，其特征在于包括以下步骤: (1)选择尼龙膜作为试纸条的材料； (2)将探针点到尼龙膜上，所述探针为待检测的特异性核苷酸序列，然后用紫外线对尼龙膜进行照射，然后烘烤，最后黑暗干燥储存； (3)运用普通PCR技术，以待测样本为模板、以探针为模板设计的一对引物为引物进行PCR扩增，扩增完之后再94°C变性lOmin，然后立即放4°C，得到待测序列； (4)使用缓冲液冲洗固定了探针的尼龙膜，然后在尼龙膜上点上杂交液，其中杂交液中包含SYBR Green I和步骤(3)得到的待测序列，室温黑暗杂交，接着用缓冲液、去离子水顺次清洗尼龙膜，最后用488-nm激光的成像扫描仪对湿润的尼龙膜成像，根据尼龙膜是否发出绿色荧光判定结果的阴阳性。2.根据权利要求1所述的运用SYBRGreen I荧光染料进行特异性DNA检测的试纸条技术，其特征在于:所述步骤(1)中尼龙膜为长条状，尺寸为3cmX0.5cm。3.根据权利要求1所述的运用SYBRGreen I荧光染料进行特异性DNA检测的试纸条技术，其特征在于:所述步骤(2)中探针为若干个，该若干个探针以固定的间隔点在尼龙膜上。4.根据权利要求 3所述的运用SYBRGreen I荧光...

【专利技术属性】
技术研发人员：李孟皇，边红武，韩凝，武金霞，
申请(专利权)人：杭州希诺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：