一种Vero细胞的复苏方法技术

本发明专利技术提供了一种Vero细胞的复苏方法，将冻存的Vero细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出，在取出后1min内于37℃摇晃至含有Vero细胞专用冻存液的Vero细胞液完全融化将Vero细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜Vero细胞专用培养基的离心管中，用移液枪上下吹打20‑30次，于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min；移去上清液，加入1‑2ml的新鲜Vero细胞专用培养基，用移液枪上下吹打40‑50次，然后均匀的加入到盛有7‑9ml的新鲜Vero细胞专用培养基，于37℃，5%CO2培养箱中培养。

Method for recovery of Vero cell

The present invention provides a method for recovery of Vero cells, the frozen Vero cell freezing tube removed from liquid nitrogen or 80 DEG C in the refrigerator, after removing the 1min for storing the liquid liquid frozen Vero cells completely melted at 37 DEG C to shake Vero cells containing Vero cells will be added to the liquid filled with centrifugal 2 3ml fresh Vero cell specific medium tube, with a pipette under 20 and 30 times, in 1000 1500g/min speed centrifuge for 3 10min; the supernatant was removed, adding 1 2ml fresh Vero cells specific medium, with a pipette under 40 and 50 times, then uniform join containing 7 9ml fresh Vero cells special culture medium, to 37 DEG C, 5%CO2 incubator.

【技术实现步骤摘要】
一种Vero细胞的复苏方法
本专利技术属于生物技术应用领域，具体地，涉及一种Vero细胞的复苏方法。
技术介绍
细胞培养是生物与健康相关研究领域的一项重要技术。随着生命科学的迅速发展，目前细胞培养已成为细胞生物学、分子生物学、遗传学和免疫学等学科研究的重要基础。为了深入探讨细胞的生长活动规律、有关疾病的病理和药物的药理（毒理）机制，开发具有不同针对性的细胞培养方法具有重要意义。细胞复苏是培养细胞的一种，是生命及再生医学领域中广泛应用的关键技术，在研究中往往需要对冻存的细胞进行复苏，从而进行体内外的相关研究。Vero细胞是日本学者1962年从非洲绿猴(cercopithecusaethiopsmonkey)肾建立的猴肾细胞系。其名称的由来是取自世界语中“绿”字的VERDE前两个字母和“肾”字前两个字母合在一起，但世界语中不允许VERE存在，而需以“O”结尾，故命名为“Vero”。其第93代被带到美国NIH的过敏与传染病研究所热带病毒研究室，第113代被提交给ATCC，编号为ATCCNO.CCL-81。除了常规的科研需要之外，经过全面的研究鉴定，Vero细胞具有胞核学稳定，没有外源因子污本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Vero细胞的复苏方法，其特征在于：包括以下步骤：将冻存的Vero细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出，在取出后1min内于37℃摇晃至含有Vero细胞专用冻存液的Vero细胞液完全融化将Vero细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜Vero细胞专用培养基的离心管中，用移液枪上下吹打20‑30次，于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min；移去上清液，加入1‑2ml的新鲜Vero细胞专用培养基，用移液枪上下吹打40‑50次，然后均匀的加入到盛有7‑9ml的新鲜Vero细胞专用培养基，于37℃，5%CO2培养箱中培养；所述Vero细胞专用冻存液以重量组分计，包括以下组分：二甲基亚砜5...

【技术特征摘要】
1.一种Vero细胞的复苏方法，其特征在于：包括以下步骤：将冻存的Vero细胞冻存管从液氮或者-80℃冰箱中取出，在取出后1min内于37℃摇晃至含有Vero细胞专用冻存液的Vero细胞液完全融化将Vero细胞液加入到盛有2-3ml新鲜Vero细胞专用培养基的离心管中，用移液枪上下吹打20-30次，于1000-1500g/min的转速下离心3-10min；移去上清液，加入1-2ml的新鲜Vero细胞专用培养基，用移液枪上下吹打40-50次，然后均匀的加入到盛有7-9ml的新鲜Vero细胞专用培养基，于37℃，5%CO2培养箱中培养；所述Vero细胞专用冻存液以重量组分计，包括以下组分：二甲基亚砜5-15份、羟乙基淀粉3-8份、葡萄糖5-15份、维生素E1-5份、20%甘露醇2-10份、丙二醇1-2份、(S)-(-)-1-(4-氟异喹啉-5-基）磺酰基-2-甲基-1,4-二氮环庚烷0.8-2份和基础培养基80-90份。2.根据权利要求1所述的Vero细胞的复苏方法，其特征在于：所述Vero细胞专用培养基包括70-90%的基础培养基以及10-30%的胎牛血清。3.根据权利要求1或2所述的Vero细胞的复苏方法，其特征在于：所述基础培养基以重量组分计，包括以下组分：葡萄糖80-90份、碳酸氢钠10-20份、丙酮酸钠8-18份、人血白蛋白2-10份、氯化钾30-50份、无水硫酸镁5-12份、氯化钠60-80份、无水磷酸二氢钠8-16份、PHA-植物血球凝集素0.2-1份、叶酸0.2-0.6份、肌醇0.5-1.5份、烟酰胺0.2-0.8份、...

【专利技术属性】
技术研发人员：马荣华，
申请(专利权)人：苏州北开生化设备有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32