用于选择离子进行离子碎裂的方法和系统技术方案

本发明专利技术教示是针对在样品分析中选择离子以进行后续离子碎裂的方法和系统。在一些情况下，用于分析和鉴别前驱物离子以进行进一步处理的系统和方法可以得益于任意地/随机地选择前驱物离子的发现方法，而非选择强度最高的前驱物离子亚群用于进一步分析以尝试使高质量、可鉴别的MS/MS谱的数量最大。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于选择离子进行离子碎裂的方法和系统相关申请案本申请案要求2014年10月30日提交的美国临时申请案第62/072930号的优先权益，其完整内容以引用的方式并入本文中。
本专利技术教示大体上涉及质谱分析领域。
技术介绍
对于许多应用，包括毒理学、法医学及环境测试，以及食品和药物研究来说，可能需要分析一种物质以测定其组成。通常，分析有待分析的样品中众多不同的所关注分析物的存在。此类样品可以例如呈从测试个体取得的体液形式，所述体液通常包括所关注的药物代谢物以及来自测试个体的不相关的内源性离子。正确地测定复杂物质中大量所关注分析物的存在或不存在会是困难并且耗时的。通常使用质谱仪产生样品的质谱以发现其组成。举例来说，常常使用色谱设备，如液相色谱仪在一段时间内将样品中的离子洗脱至质谱仪中并且可以利用递归MS技术鉴别洗脱样品的各部分内所含的各种分析物的结构。在具有MS/MS能力的大部分仪器中，可以一种自动模式进行生成质谱，选择前驱物离子及生成产物离子的MS/MS谱的方法。当前在串联质谱分析中实行的自动方案一般执行一种样品的单一MS(例如，探测扫描)以鉴别所述样品内的候选物进行进一步处理，并在所观察的所有物质中选择一小组前驱物离子，通过MS/MS进行分析。这通常是通过电离样品并分离具有不同质量的离子，并且测量探测扫描中离子流的强度以记录其相对丰度来实现。举例来说，利用飞行时间质谱仪，使离子脉冲以行进预定的飞行路径。随后利用检测器记录离子。离子到达检测器花费的时间量，即“飞行时间”可以用于计算离子的质荷比m/z。接着，可以在碰撞池(或其它构件)中经由碰撞诱导解离(collisioninduceddissociation，CID)使所选前驱物离子碎裂以生成MS/MS谱，由此获得另外的信息。在选择前驱物离子进行进一步处理时，当前的自动方案一般集中在通过探测扫描中检测到的强度测定洗脱样品内含量最丰富的前驱物离子，以使高品质、可鉴别的MS/MS谱的数量最大化。也就是说，选择进行进一步处理的前驱物离子及在MS/MS期间使用的参数一般经选择以使能够鉴别出各种前驱物离子(及其成分)的结构的几率最大化。举例来说，基于强度对经由探测扫描检测到的强度最高的20种前驱物离子进行分级并在一或多个下游产物离子阶段中从强度最高到强度最低进行连续处理。此采集模式的实例包括信息依赖性采集(IDA)或数据依赖性采集(DDA)。
技术实现思路
本专利技术教示提供在样品分析中选择离子以进行后续离子碎裂。如上所述，当前MS/MS中的自动方案一般对样品执行单一探测扫描，并在所观察的所有物质中选择一小组化合物离子(有时称为前驱物离子)进行进一步分析以试图使高品质、可鉴别的MS/MS谱的数量最大化。然而，申请人已经测定，此类方法偏向于样品中含量最丰富的物质(或最容易地电离的物质)，反而可能会降低这些自动技术的覆盖率或灵敏度的可能范围。举例来说，尽管肽充分电离的含量丰富的蛋白质可以产生在MS下展示高强度的若干前驱物离子，但针对这些物质的分析将耗费仪器时间，而所述时间可以改为用于检测共洗脱样品内属于不同的、被忽略的分析物的强度较低的离子。本申请人认识到，在一些情况下，用于分析和鉴别前驱物离子进行进一步处理的系统和方法可以得益于一种替代性发现方法。因此，当前方案一般集中在探测扫描中所检测到的前驱物离子的相对强度，而根据本专利技术教示的各种方面的方法和系统去除了在选择离子进行进一步处理时偏向于含量最丰富离子的常规倾向。根据本专利技术教示的各种方面，提供一种分析样品的方法，所述方法包含：(a)对来自样品的离子进行质谱探测扫描以采集化合物离子谱，所述前驱物离子谱展现多个峰，每个峰对应于具有指定m/z比的多个离子；(b)选择所述探测扫描中对应于第一多个化合物离子的第一峰进行进一步处理；(c)对于对应于所述第一峰的所述第一多个化合物离子进行质谱分析以便采集第一产物离子谱；(d)选择所述探测扫描中对应于第二多个化合物离子的第二峰进行进一步处理；及(e)对于对应于所述第二峰的所述第二多个化合物离子进行质谱分析以便采集第二产物离子谱，其中所述探测扫描的第一峰和第二峰中至少一个是任意地选择。根据本专利技术教示的各种方面，提供一种分析样品的方法，所述方法包含：(a)对来自样品的离子进行质谱探测扫描以采集前驱物离子谱，所述前驱物离子谱展现多个峰，每个峰对应于具有指定m/z比的多个离子；(b)选择对应于所述探测扫描的第一峰的前驱物离子进行进一步处理；(c)对于对应于所述第一峰的前驱物离子进行质谱分析以便采集第一产物离子谱；(d)选择对应于所述探测扫描的第二峰的前驱物离子进行进一步处理；及之后，(e)对于对应于所述第二峰的所述前驱物离子进行质谱分析以便采集第二产物离子谱，其中相对于所述探测扫描中的第一峰，所述探测扫描的第二峰可以展现较高的强度。在一些方面，所述方法可进一步包含重复步骤(d)-(e)N次，以便随后选择对应于N个峰的前驱物离子进行进一步处理及对于所述选择的前驱物离子进行质谱分析以采集N个产物离子谱，其中选择对应于N个峰的前驱物离子不是基于探测扫描中所述峰的相对强度。在一些方面，例如，可从前驱物离子谱的多个候选峰中随机或任意地选择第一及第二前驱物离子。候选峰可以多种方式鉴别并且可以应用一或多个过滤器来鉴别这些候选峰。举例来说，在一些方面，可以基于前驱物离子谱中各峰的阈值强度鉴别前驱物离子谱中的候选峰。替代地或另外，可以基于所选电荷状态鉴别前驱物离子谱中的候选峰(例如，鉴别展现电荷状态≥2的前驱物离子)。同样，可以基于在排除范围外和/或基于与纳入清单中所标识的一或多种所关注物质的对应性鉴别前驱物离子谱中的候选峰。举例来说，纳入清单可以是用户定义的清单，其包含所关注的m/z范围或一或多种选择的多反应监测(MRM)转变。尽管选择离子进行进一步处理可以随机进行，但如果存在所需候选物的先验知识，则所述选择也可以基于经验数据加权。举例来说，在选择离子进行进一步处理时，所述方法可以相对于探测扫描中所鉴别的对应于纳入清单中不存在的m/z比的候选峰，指定对应于所选m/z比(例如，如纳入清单中所列)的峰较高权重或优先级。根据本专利技术教示的各种方面，选择对应于探测扫描的第一峰和第二峰的前驱物离子进行进一步处理可进一步包含提供所关注肽的纳入清单，所述纳入清单对于每一所关注肽包含以下至少一种：所述肽的预测滞留时间、所述肽所属的至少一种所关注蛋白质及所述肽的序列。可以将对应于探测扫描的峰的前驱物离子的质量与纳入清单中肽的质量相比较以便对其选择指定较高优先级或权重。在各种方面中，本文所描述的方法也可以适用于离子的下游处理(例如，在MSn技术中的产物离子分析)。举例来说，所述方法可进一步包含对于对应于第一产物离子谱的一或多个峰的产物离子进行质谱分析。在一些方面，所述方法可以包含：(c)(1)选择所述第一产物离子谱中对应于第一多个产物离子的第一峰进行进一步处理；(c)(2)对于对应于所述第一产物离子谱的第一峰的所述第一多个产物离子进行质谱分析以便采集第一个第二代离子产物谱；(c)(3)选择所述第一产物离子谱中对应于第二多个产物离子的第二峰进行进一步处理；及随后(c)(4)对于对应于所述第一产物离子谱的第二峰的所述第二多个产物离子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分析样品的方法，所述方法包含：(a)对来自样品的离子进行质谱探测扫描以采集化合物离子谱，所述前驱物离子谱展现多个峰，所述峰各自对应于具有指定m/z比的多个离子；(b)选择所述探测扫描中对应于第一多个化合物离子的第一峰进行进一步处理；(c)对于对应于所述第一峰的所述第一多个化合物离子进行质谱分析以便采集第一产物离子谱；(d)选择所述探测扫描中对应于第二多个化合物离子的第二峰进行进一步处理；及(e)对于对应于所述第二峰的所述第二多个化合物离子进行质谱分析以便采集第二产物离子谱，其中所述探测扫描的所述第一峰和所述第二峰中至少一个是任意地选择。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.30 US 62/072,9301.一种分析样品的方法，所述方法包含：(a)对来自样品的离子进行质谱探测扫描以采集化合物离子谱，所述前驱物离子谱展现多个峰，所述峰各自对应于具有指定m/z比的多个离子；(b)选择所述探测扫描中对应于第一多个化合物离子的第一峰进行进一步处理；(c)对于对应于所述第一峰的所述第一多个化合物离子进行质谱分析以便采集第一产物离子谱；(d)选择所述探测扫描中对应于第二多个化合物离子的第二峰进行进一步处理；及(e)对于对应于所述第二峰的所述第二多个化合物离子进行质谱分析以便采集第二产物离子谱，其中所述探测扫描的所述第一峰和所述第二峰中至少一个是任意地选择。2.根据权利要求1所述的方法，其中选择所述第二峰的步骤不是基于所述探测扫描中所述第一峰与所述第二峰的相对强度。3.根据权利要求1所述的方法，其进一步包含重复步骤(d)-(e)N次，以便选择对应于多个化合物离子的N个峰进行进一步处理，及对所述选择的化合物离子进行质谱分析以采集N个产物离子谱，其中所述N个峰是任意地选择。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述任意选择不是基于所述第一峰相对于所述第二峰的相对强度。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一化合物离子和所述第二化合物离子随机地选自所述化合物离子谱的多个候选峰。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述候选峰是基于所述化合物离子谱中的阈值强度从所述化合物离子谱鉴别。7.根据权利要求5所述的方法，其中所述候选峰是基于选择的电荷状态从所述化合物离子谱鉴别。8.根据权利要求5所述的方法，其中所述候选峰是基于在排除窗口外从所述化合物离子谱鉴别。9.根据权利要求5所述的方法，其中所述候选峰对应于纳入清单中所鉴别的一或多种所关注物质。10.根据权利要求9所述的方法，其中所述纳入清单包含所关注的m/z范围。11.根据权利要求9所述的方法，其中所述纳入清单包含一或多个选择的MRM转变。...

【专利技术属性】
技术研发人员：尼克·鲁姆菲尔德，斯蒂芬·A·泰特，
申请(专利权)人：DH科技发展私人贸易有限公司，
类型：发明
国别省市：新加坡,SG