一种跌打丸质量标准检测方法技术

本发明专利技术提供了一种跌打丸质量标准检测方法，属于中药技术领域，包括如下步骤：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)阴性样品溶液的制备；(4)分别精密吸取供试样品溶液、对照品溶液和阴性样品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，即得。采用本发明专利技术的方法，能够提高血竭素在盐酸中的稳定性，跌打丸中血竭素含量被充分提取，避免血竭素含量合格率低，提高检测方法的准确性与稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种跌打丸质量标准检测方法
本专利技术涉及属于中药
，具体是一种跌打丸质量标准检测方法。
技术介绍
跌打丸是骨伤科常用的中成药，由三七、红花、血竭、骨碎补、乳香、没药、甘草等24种中药研制而成，具有活血散淤、消肿止血之功效，主治跌打损伤、瘀血肿痛、闪腰岔气等症，一般多用于内服。跌打丸为天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂生产的药品，其质量标准收载于《中华人民共和国药典》2015版一部。现跌打丸质量标准中血竭素含量测定的方法为高效液相色谱法，该方法采用3％磷酸甲醇25mL加热回流提取30min，经过方法学考察与验证后，发现此方法对跌打丸中血竭素含量提取不充分，并且血竭素在磷酸中稳定性差，从而导致跌打丸的血竭素含量合格率低。本专利技术重新研究了跌打丸质量标准检测方法，能够提高检测方法的准确度和稳定性，为跌打丸的质量标准检测提供了新的思路。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术旨在提供一种跌打丸质量标准检测方法。为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：一种跌打丸质量标准检测方法，包括如下步骤：(1)对照品溶液的制备：取血竭素高氯酸盐对照品，精密称定，加3％盐酸甲醇制成每1mL含血竭素高氯酸盐20μg的溶液，相当于血竭素14.52μg，即得；(2)供试品溶液的制备：取样品适量，剪碎，取2g，精密称定，精密加入3％盐酸甲醇溶液50mL，密塞，称定重量，加热回流15min，放冷，再称定重量，用3％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，续滤液，即得；(3)阴性样品溶液的制备：按处方称取血竭素的各味药材，按处方工艺制得样品，再按照所述步骤(2)供试样品溶液的制备方法，制得阴性样品溶液；(4)分别精密吸取供试样品溶液、对照品溶液和阴性样品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，即得。进一步地，所述步骤(4)的色谱条件如下：色谱柱：GLInertsilODS-3，250mm×4.6mm，5μm；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液，两者体积比为49：51；柱温：35℃；流速：0.8mL/min；检测波长：440nm；理论板数按血竭素峰计算应不低于4000。进一步地，所述步骤(2)中的样品为小蜜丸或大蜜丸。进一步地，所述小蜜丸每10丸重2g；所述大蜜丸每丸重3g。进一步地，所述步骤(4)中注入高效液相色谱的溶液为10μL。进一步地，所述样品含血竭以血竭素计，小蜜丸每1g不得少于0.10mg，大蜜丸每丸不得少于0.30mg。相对于现有技术，本专利技术具有以下优势：(1)采用本专利技术的方法，能够提高血竭素在盐酸中的稳定性，跌打丸中血竭素含量被充分提取，避免血竭素含量合格率低，提高检测方法的准确性与稳定性。(2)采用本专利技术的方法，有效排除了其他杂质的干扰，稳定性好、精密度高、重现性好、便捷且易于掌握，检测起来更加方便、快捷。附图说明图1为对照品色谱图(GLInertsil)。图2为供试品色谱图(GLInertsil)。图3为阴性色谱图(GLInertsil)。图4为血竭素标准曲线。图5为对照品色谱图(迪马柱)。图6为供试品色谱图(迪马柱)。图7为对照品色谱图(菲罗门柱)。图8为供试品色谱图(菲罗门柱)。具体实施方式方法学考察1.1仪器和试剂仪器：岛津LC-20AD高效液相色谱仪。试剂：乙腈(色谱纯，Fish公司)，甲醇(色谱纯，Fish公司)，盐酸(分析纯，天津科密欧化学试剂科贸公司，纯度35-37％)，磷酸二氢钠(色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司)，水为纯化水。对照品：血竭素高氯酸盐(中国食品药品检定研究院购置，批号：110811-201506，供含量测定用，纯度为98.6％)，跌打丸：天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂(批号：4510031、4510033、4510038、4510039、4510040、4510043、4510044、4510046、4518001、4518002、4518003)。1.2色谱条件色谱柱：GLInertsilODS-3，250mm×4.6mm，5μm；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液，两者体积比为49：51；柱温：35℃；流速：0.8mL/min；检测波长：440nm；理论板数按血竭素峰计算应不低于4000。1.3提取溶剂的选择取同一批号(4510046)样品适量，剪碎，取2g，精密称定，分别精密加入3％磷酸甲醇溶液25mL和3％盐酸甲醇溶液25mL，密塞，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，分别补足减失的重量，摇匀，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，分别在0h、4h、8h、12h、18h、24h进样，峰面积见表1。表1提取溶剂的考察结果表明，用盐酸甲醇做提取溶剂时血竭素含量高于用磷酸甲醇作为提取溶剂，并且用磷酸作为提取溶剂时，日间稳定性差，RSD超过了规定范围3％，而盐酸甲醇的RSD则合格，日间稳定性好，故把提取溶剂改为3％盐酸甲醇进行下一步考察。1.4提取方法的考察与确定1.4.1提取方式与提取时间的考察取同一批号(4510046)样品适量，剪碎，取2g，精密称定，精密加入3％盐酸甲醇溶液25mL，密塞，称定重量，分别采用加热回流法、超声波法与震荡法三种提取方式，时间分别为15min、30min、45min、60min，放冷，再称定重量，用3％盐酸甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，测定样品中的血竭素含量，结果见表2。表2血竭素提取方法与时间的比较结果表明，加热回流法提取15min时血竭素含量最高，随着加热时间增加，血竭素含量逐渐降低，由此可推断出，血竭素对热不稳定，加热时间过长会破坏血竭素含量，故选择采用加热回流法提取15min的方式进行提取。1.4.2提取溶剂浓度的考察对照品溶液的制备：取血竭素高氯酸盐对照品适量，精密称定，分别加入0.5％、1％、3％、6％、9％的盐酸甲醇溶液配制成每1mL含血竭素高氯酸盐20μg的溶液(相当于血竭素14.52μg)，即得。供试品溶液的制备：取同一批号(4510046)样品适量，剪碎，取2g，精密称定，分别精密加入0.5％、1％、3％、6％、9％盐酸甲醇溶液25mL，密塞，称定重量，采用加热回流提取方式，时间为15min，放冷，再称定重量，分别用0.5％、1％、3％、6％、9％盐酸甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，进行测定，分别用相对应浓度的盐酸甲醇对照品和样品计算血竭素含量，结果见表3。表3提取溶剂浓度的比较结果表明，提取溶剂浓度为3％时，血竭素含量最高，随着溶剂浓度增加，血竭素含量逐渐减小，由此可推断出，高浓度的盐酸甲醇对血竭素有破坏性，因此提取溶剂浓度确定为3％。1.4.3提取溶剂用量的考察取同一批号(4510046)样品适量，剪碎，取2g，精密称定，分别精密加入3％盐酸甲醇溶液15mL、25mL、50mL、75mL，密塞，称定重量，加热回流15min，放冷，再称定重量，用3％盐酸甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，测定样品中血竭素含量，结果见表4。表4提取溶剂用量的比较结果表明，随着溶剂用量逐渐增大，含量也逐渐增大提，取越充分，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种跌打丸质量标准检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)对照品溶液的制备：取血竭素高氯酸盐对照品，精密称定，加3％盐酸甲醇制成每1mL含血竭素高氯酸盐20μg的溶液，相当于血竭素14.52μg，即得；(2)供试品溶液的制备：取样品适量，剪碎，取2g，精密称定，精密加入3％盐酸甲醇溶液50mL，密塞，称定重量，加热回流15min，放冷，再称定重量，用3％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，续滤液，即得；(3)阴性样品溶液的制备：按处方称取血竭素的各味药材，按处方工艺制得样品，再按照所述步骤(2)供试样品溶液的制备方法，制得阴性样品溶液；(4)分别精密吸取供试样品溶液、对照品溶液和阴性样品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，即得。

【技术特征摘要】
1.一种跌打丸质量标准检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)对照品溶液的制备：取血竭素高氯酸盐对照品，精密称定，加3％盐酸甲醇制成每1mL含血竭素高氯酸盐20μg的溶液，相当于血竭素14.52μg，即得；(2)供试品溶液的制备：取样品适量，剪碎，取2g，精密称定，精密加入3％盐酸甲醇溶液50mL，密塞，称定重量，加热回流15min，放冷，再称定重量，用3％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，续滤液，即得；(3)阴性样品溶液的制备：按处方称取血竭素的各味药材，按处方工艺制得样品，再按照所述步骤(2)供试样品溶液的制备方法，制得阴性样品溶液；(4)分别精密吸取供试样品溶液、对照品溶液和阴性样品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，即得。2.根据权利要求1所述的跌打丸质量标准检测方法，其特征在于：所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：江永萍，袁婷婷，商丹丹，曲磊，孟亚飞，宋立平，
申请(专利权)人：天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂，
类型：发明
国别省市：天津,12