结合细胞内PRL‑1多肽或PRL‑3多肽的抗体制造技术

本发明专利技术人提供了一种能够结合至细胞内PRL‑1多肽或PRL‑3多肽的抗体，其中所述抗体能够结合至与抗体269、抗体223或抗体318结合的表位。这样的抗‑PRL抗体能够结合至细胞内PRL‑1或PRL‑3。它们可以适合被用作抗癌症或癌症转移的治疗剂，或者在临床诊断中来鉴定PRL‑3或PRL‑1阳性的患者。

【技术实现步骤摘要】
结合细胞内PRL-1多肽或PRL-3多肽的抗体本申请是申请日为2008年5月3日，申请号为201210272198.X，专利技术名称为“结合细胞内PRL-1多肽或PRL-3多肽的抗体”的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术涉及医学领域、细胞生物学领域、分子生物学领域及生物化学领域。本专利技术还涉及医学领域。具体而言，本专利技术涉及疾病尤其是癌症的治疗和诊断，以及用于这样的用途的组合物。
技术介绍
癌症是全世界的一个严重健康问题。在2007年，据估计全世界有760万人死于癌症。例如在英国，癌症每年造成126,000人死亡。四分之一的人死于癌症。已知用于癌症的治疗法包括外科手术、化学疗法和放射疗法。如果发现地够早，许多癌症可以被治愈。100年之前，德国化学家保罗·奥利克(PaulEhrlich)提出了抗体作为“魔方”的观念。抗体能够以特殊的方式识别及结合它们的抗原，因此是用于经免疫系统识别及破坏恶性细胞的理想制剂。由于这个原因，抗体构成了一类发展最为快速的人类癌症疗法。大量潜在的癌症或肿瘤标记物以及癌症抗原已经在文献中被鉴定，并且已经开发出对抗它们中的一些的抗体治疗物。例如，已知的癌症治疗物赫赛汀(Herceptin)(曲妥珠单抗(Trastuzumab))是一种能杀死HER2阳性癌细胞的单克隆抗体。赫赛汀可结合癌细胞上的HER2(人表皮生长因子受体2)抗原。同样，贝伐单抗(Bevacizumab)(阿瓦斯汀TM(AvastinTM))是一种靶向血管内皮生长因子(VEGF)的单克隆抗体，VEGF是一种参与新血管形成的生长因子。通过抑制血管发生，贝伐单抗可阻止肿瘤细胞接收稳定的血液供应，从而防止接收肿瘤存活需要的氧和营养物。然而，抗体治疗对于不同癌症的适应性不是普遍的。妨碍抗体治疗普遍应用的一个限制是抗体分子较大的体积，并因此不能通过质膜或细胞膜。在不进行改良的情况下，抗体(包括单克隆抗体)通常仅适宜于靶向位于宿主细胞表面或外部的癌症抗原14-15。在以上的实例中，HER2受体位于细胞表面，因此是赫赛汀进行抗体结合可及的。同样，VEGF被分泌到血液中，能够被贝伐单抗结合。PRL是一类细胞内C末端异戊二烯化的蛋白质。缺乏异戊二烯化信号的PRL突变形式一般位于核内16-17。通过EM免疫金标记显示PRL-1和PRL-3定位于质膜和早期内体的内叶(innerleaflet)18。PRL-3和PRL-1的过表达已被表明与多种人癌症相关3-12,19。PRL-1和PRL-3已知与肿瘤转移相关。已经知道，大多数癌症患者死于转移，而非死于他们的原发疾病。迫切需要防止癌症转移的有效方法。迄今为止抗体还没有被用于靶向细胞内抗原或癌症标记物，这是因为抗体无法通过细胞膜，因而无法接近抗原。
技术实现思路
本专利技术人现已证明，针对PRL-1和PRL-3的抗体可意外地结合至它们的细胞内靶标。根据文献中的提示，以前从未认为可能用抗体靶向细胞内PRL以消除癌细胞和癌症转移，这是因为PRL的细胞内定位。本专利技术人已表明实际情况不是这样，并提供抗-PRL-1抗体和抗-PRL-3抗体用作癌症治疗剂，尤其是癌症转移的治疗剂。Li等人(2005)描述了PRL-1和PRL-3特异性单克隆抗体的产生。然而，这些抗体的序列以及这些抗体的可变区序列还没有被公开。而且，产生这些抗体的杂交瘤在当时并不为公众可及，并且迄今为止也不为公众可及。从而，在Li等人(2005)中描述的抗体迄今为止公众也无法获得。再者，考虑到PRL-1和PRL-3的细胞内定位，没有说明所述抗体可用于治疗癌症。本专利技术人公开了两种针对PRL-1的小鼠单克隆抗体(269和223)以及一种针对PRL-3的小鼠单克隆抗体(318)的可变区。本专利技术人公开了抗-PRL-1抗体269和抗-PRL-3抗体318的结合表位。本专利技术人还公开了产生这些抗体的方法，以及制备具有与这些抗体相同或相似结合性质的抗体的方法，这些方法的每一种迄今为止均是不可能的。根据本专利技术的第1方面，本专利技术人提供了一种能够结合至PRL-1多肽或PRL-3多肽的抗体，其中所述抗体能够结合与抗体269、抗体223或抗体318或者它们的变体、同系物、衍生物或片段结合的表位。所述抗体能够结合至与抗体269结合的PRL-1多肽上的表位。所述抗体可包括能够结合至表位TYKNMR和/或TLNKFI的抗-PRL1抗体，或者它的变体、同系物、衍生物或片段。所述抗体能够结合至与抗体223或抗体318结合的PRL-3多肽上的表位。所述抗体可包括能够结合至表位KAKFYN和/或HTHKTR的抗-PRL3抗体，或者它的变体、同系物、衍生物或片段。所述抗体可包含单克隆抗体269的可变区(SEQIDNO:2、SEQIDNO:4)、单克隆抗体223的可变区(SEQIDNO:6、SEQIDNO:8)或单克隆抗体318的可变区(SEQIDNO:10、SEQIDNO:12)。根据本专利技术的第2方面，提供了一种抗体，所述抗体包含单克隆抗体269的可变区(SEQIDNO:2、SEQIDNO:4)或者它的能结合PRL-1的变体、同系物、衍生物或片段。根据本专利技术的第3方面，本专利技术人提供了一种抗体，所述抗体包含单克隆抗体223的可变区(SEQIDNO:6、SEQIDNO:8)或者它的能结合PRL-1的变体、同系物、衍生物或片段。根据本专利技术的第4方面，本专利技术人提供了一种抗体，所述抗体包含单克隆抗体318的可变区(SEQIDNO:10、SEQIDNO:12)或者它的能结合PRL-3的变体、同系物、衍生物或片段。所述抗体能够结合至细胞内PRL-1多肽或PRL-3多肽。所述抗体能够通过细胞质膜。所述抗体能够结合并抑制PRL-1或PRL-3的生物活性，优选蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)活性。所述抗体能够防止癌症转移，所述癌症优选结肠直肠癌、卵巢癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、前列腺癌、胃癌、肺癌、阴茎癌、子宫颈癌、脑癌、食道癌、膀胱癌、肾细胞癌、卵巢淋巴瘤和皮肤黑色素瘤。所述癌症可包括表达PRL-1或PRL-3的癌症。所述抗体可包括单克隆抗体或人源化单克隆抗体。作为本专利技术的第5方面，提供了一种包含如前述的抗-PRL-1抗体和抗-PRL-3抗体的结合物。根据本专利技术的第6方面，本专利技术人提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含这样的抗体或结合物，以及可药用的赋形剂、稀释剂或载体。本专利技术在第7方面中提供了一种能够结合至PRL-1或PRL-3的抗体，用于一种癌症或癌症转移的治疗方法或预防方法中，所述抗体可包括如前述的抗体、如上文列出的结合物或如上文列出的药物组合物。所述方法可包括将癌细胞暴露于所述抗体或结合物。所述方法可包括将治疗有效量的所述抗体、结合物或组合物给予患有或疑似患有癌症的个体。所述癌症可包括转移癌。所述癌症可为表达PRL-1或PRL-3的癌症。所述癌症可包括结肠直肠癌、卵巢癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、前列腺癌、胃癌、肺癌、阴茎癌、子宫颈癌、脑癌、食道癌、膀胱癌、肾细胞癌、卵巢淋巴瘤和皮肤黑色素瘤。治疗个体中的转移瘤数目与未治疗个体相比可减少至少50％。它可减少至少60％。它可减少低至少70％。它可减少至少80％。治疗个体中的转移瘤数目与未治疗的个体相比可减少至少90％。根据本专利技术的第8方面，提供了一种如上文列出本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗PRL‑1的抗体在制备用于治疗或预防癌症或癌症转移的药物中的用途，所述治疗或预防包括以所述抗体靶向细胞内PRL‑1以消除癌症细胞和癌症转移。

【技术特征摘要】
2007.05.03 US 60/924,201;2008.02.22 US 61/064,2291.抗PRL-1的抗体在制备用于治疗或预防癌症或癌症转移的药物中的用途，所述治疗或预防包括以所述抗体靶向细胞内PRL-1以消除癌症细胞和癌症转移。2.权利要求1的用途，其中所述抗体选自：(a)可结合PRL-1的抗体，其包括包含SEQIDNO:2的重链可变区序列及包含SEQIDNO:4的轻链可变区序列；(b)能够结合至细胞内PRL-1多肽的(a)的抗原结合片段；以及(c)包含这样的序列的抗体，所述序列与(a)或(b)至少90％相同，并且能够结合至细胞内PRL-1多肽。3.权利要求1或2的用途，其中所述抗体结合并抑制细胞内PRL-1的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)活性。4.前述权利要求任一...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾琦，
申请(专利权)人：新加坡科技研究局，
类型：发明
国别省市：新加坡,SG