与聚合酶联用的缓冲液制造技术

提供了包含阳离子表面活性剂和阴离子表面活性剂的扩增反应混合物。本文提供了用于储存聚合酶的溶液。在一些实施方式中，溶液包含聚合酶；阴离子表面活性剂；和阳离子表面活性剂。在一些实施方式中，阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的浓度为0.0001％至0.1％。在一些实施方式中，阴离子去污剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。在一些实施方式中，阳离子去污剂是十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。在一些实施方式中，阴离子去污剂是SDS并且阳离子去污剂是CTAB。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与聚合酶联用的缓冲液相关申请的交叉引用本申请要求2014年7月22日提交的美国临时专利申请号62/027,668的优先权，该文通过引用纳入本文。专利技术背景聚合酶用于大量不同的分子反应，包括但不限于聚合酶链反应(PCR)。
技术实现思路
本文提供了用于储存聚合酶的溶液。在一些实施方式中，溶液包含聚合酶；阴离子表面活性剂；和阳离子表面活性剂。在一些实施方式中，阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的浓度为0.0001％至0.1％。在一些实施方式中，阴离子去污剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。在一些实施方式中，阳离子去污剂是十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。在一些实施方式中，阴离子去污剂是SDS并且阳离子去污剂是CTAB。在一些实施方式中，溶液还包含两性离子表面活性剂。在一些实施方式中，两性离子表面活性剂是3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)。在一些实施方式中，两性离子表面活性剂的浓度为0.01-1.0％。在一些实施方式中，其中，聚合酶是热稳定的。还提供了包含聚合酶、阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的反应混合物。在一些实施方式中，反应混合物还包含核酸样品。在一些实施方式中，反应混合物还包含以下中的至少一种：核苷酸或寡核苷酸引物，适于聚合酶链反应(PCR)的缓冲剂，和镁。在一些实施方式中，阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的浓度为0.0001％至0.1％。在一些实施方式中，阴离子去污剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。在一些实施方式中，阳离子去污剂是十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。在一些实施方式中，阴离子去污剂是SDS并且阳离子去污剂是CTAB。在一些实施方式中，反应混合物还包含两性离子表面活性剂。在一些实施方式中，两性离子表面活性剂是3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)。在一些实施方式中，两性离子表面活性剂的浓度为0.01-1.0％。在一些实施方式中，聚合酶是热稳定的。还提供了进行引物延伸反应的方法。在一些实施方式中，该方法包括：形成包含以下组分的反应混合物：可能包含靶序列的核酸样品；与靶序列退火的引物；聚合酶；阴离子表面活性剂；和阳离子表面活性剂。将引物与可能存在的靶序列退火；并且用聚合酶将引物延伸至少一个核苷酸。在一些实施方式中，延伸包括热循环条件。在一些实施方式中，延伸包括聚合酶链反应(PCR)。在一些实施方式中，阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的浓度为0.0001％至0.1％。在一些实施方式中，阴离子去污剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。在一些实施方式中，阳离子去污剂是十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。在一些实施方式中，阴离子去污剂是SDS并且阳离子去污剂是CTAB。在一些实施方式中，反应混合物还包含两性离子表面活性剂。在一些实施方式中，两性离子表面活性剂是3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)。在一些实施方式中，两性离子表面活性剂的浓度为0.01-1.0％。在一些实施方式中，聚合酶是热稳定的。还提供了包含聚合酶、阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的试剂盒。在一些实施方式中，第一容器含有聚合酶且第二容器包含阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂。在一些实施方式中，容器包含聚合酶，阴离子表面活性剂，和阳离子表面活性剂。在一些实施方式中，阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂处于母液浓度。在一些实施方式中，阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的浓度为0.0001％至0.1％。在一些实施方式中，阴离子去污剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。在一些实施方式中，阳离子去污剂是十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。在一些实施方式中，阴离子去污剂是SDS并且阳离子去污剂是CTAB。在一些实施方式中，试剂盒还包含两性离子表面活性剂。在一些实施方式中，两性离子表面活性剂是3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)。在一些实施方式中，两性离子表面活性剂的浓度为0.01-1.0％。在一些实施方式中，聚合酶是热稳定的。定义除非另有说明，本文所用的所有科技术语具有本专利技术所属领域普通技术人员通常所理解的含义。通常，本文所用的命名和下述细胞培养、分子遗传学、有机化学和核酸化学以及杂交中的实验室步骤均为本领域熟知和常用的。使用标准技术进行核酸和肽合成。按照本领域和各种通用参考文献所述的常规方法进行这些技术和步骤(通常参见，Sambrook等，《分子克隆：实验室手册》(MOLECULARCLONING：ALABORATORYMANUAL)，第2版(1989)冷泉港实验室出版社(ColdSpringHarborLaboratoryPress)，纽约冷泉港(ColdSpringHarbor，N.Y.)，其通过引用纳入本文)，将它们引入本文全文中。本文所用的命名以及下述分析化学和有机合成中的实验室步骤均为本领域熟知且常用。“表面活性剂”是降低两种液体之间或液体和固体之间的表面张力(或界面张力)的化合物。表面活性剂可用作去污剂、润湿剂、乳化剂、泡沫剂和分散剂。表面活性剂通常是两性的有机化合物。术语“Sso7”或“Sso7DNA结合结构域”或“Sso7样DNA结合结构域”或“Sso7结构域”指核酸和多肽多态性变体、等位基因、突变体和种间同源物，其：(1)氨基酸序列与WO2012/177695的SEQIDNO：4或SEQIDNO：10的氨基酸序列具有大于约60％(65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％或更高)的序列相同性；或(2)在严谨杂交条件下特异性杂交至WO2012/177695的SEQIDNO：4或SEQIDNO：10的Sso7d编码核酸序列；及其保守修饰变体。该术语包括全长Sso7d多肽和具有序列非特异性双链结合活性的多肽片段。Sso7样蛋白包括但不限于Sso7d、Sac7d和Sac7e。比野生型Sso7d的特异性增加的各种Sso7d突变结构域描述于，例如，WO2012/138417和WO2012/138416。“结构域”指蛋白质或蛋白质复合物的单元，包含多肽子序列、完整多肽序列，或多个多肽序列，这些序列中该单元具有限定的功能。该功能理解为广义定义并且可以是配体结合、催化活性或者可对蛋白质结构有稳定化效果。用于蛋白质部分时，“异源”指该蛋白质包含在天然情况下彼此不存在于同一关系中的两个或更多结构域。这类蛋白质(如融合蛋白)含有来自不相关蛋白质的两个或更多个结构域，其排列为生成新的功能性蛋白质。“接合”是指本领域已知的用于功能性连接蛋白质结构域的任何方法，包括但不限于用或不用中间结构域的重组融合，内含肽-介导的融合，非共价结合，和共价键合，包括二硫键键合；氢键键合；静电键合；和构象键合，例如，抗体-抗原，和生物素-亲和素结合。本文使用的“热稳定聚合酶”或“热稳定性聚合酶”指使用DNA或RNA作为模板通过向核苷酸链中加入核苷酸单元以催化多核苷酸合成的酶且该酶在高于45℃的温度下达到最佳活性。“嗜热酶”是指从任何嗜热物种分离的A家族DNA聚合酶，包括但不限于水生栖热菌(Thermusaquaticus)、布鲁克栖热菌(Thermusbrockianus)、和嗜热栖热菌(Thermusth本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于储存聚合酶的溶液，所述溶液包含，聚合酶；阴离子表面活性剂；和阳离子表面活性剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.22 US 62/027,6681.一种用于储存聚合酶的溶液，所述溶液包含，聚合酶；阴离子表面活性剂；和阳离子表面活性剂。2.如权利要求1所述的溶液，其特征在于，所述阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的浓度为0.0001％至0.1％。3.如权利要求1所述的溶液，其特征在于，所述阴离子去污剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。4.如权利要求1所述的溶液，其特征在于，所述阳离子去污剂是十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。5.如权利要求1所述的溶液，其特征在于，所述阴离子去污剂是SDS并且所述阳离子去污剂是CTAB。6.如权利要求1所述的溶液，所述溶液还包含两性离子表面活性剂。7.如权利要求6所述的溶液，其特征在于，所述两性离子表面活性剂是3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)。8.如权利要求6所述的溶液，其特征在于，所述两性离子表面活性剂的浓度为0.01-1.0％。9.如权利要求1-8中任一项所述的溶液，其特征在于，所述聚合酶是热稳定的。10.一种反应混合物，其包含聚合酶；阴离子表面活性剂；和阳离子表面活性剂。11.如权利要求10所述的反应混合物，还包含核酸样品。12.如权利要求10所述的反应混合物，还包含以下中的至少一种：核苷酸或寡核苷酸引物，适于聚合酶链反应(PCR)的缓冲剂，和镁。13.如权利要求11-12所述的反应混合物，其特征在于，所述阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的浓度为0.0001％至0.1％。14.如权利要求11-12所述的反应混合物，其特征在于，所述阴离子去污剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。15.如权利要求11-12所述的反应混合物，其特征在于，所述阳离子去污剂是十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。16.如权利要求11-12所述的反应混合物，其特征在于，所述阴离子去污剂是SDS并且所述阳离子去污剂是CTAB。17.如权利要求11-12所述的反应混合物，还包含两性离子表面活性剂。18.如权利要求17所述的反应混合物，其特征在于，所述两性离子表面活性剂是3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)。19.如权利要求17所述的反应混合物，其特征在于，所述两性离子表面活性剂的浓度为0.01-1.0％。20.如权利要求11-19中任一项所述的反应混合物，其特征在于，所述聚合酶是热稳定的。21.一种进行引物延伸反应的方法，所述方法包括，形成包含以下组分的反应混合物：可包含靶序列的核酸样品；与所述靶序列退火的引物；聚合酶；阴离子表面活性剂；和阳离子表面活性剂；若存在靶序列，将引物与所述靶序列退火；并且用聚合酶将...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚小松，
申请(专利权)人：生物辐射实验室股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US