一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法技术

本发明专利技术提供了一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，包括以下步骤：将口蹄疫合成肽疫苗破乳，将破乳后的抗原样品采用竞争ELISA方法进行定性定量检测；所述破乳方法为：将口蹄疫合成疫苗与破乳剂混合，分层后得水相抗原样品；所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物，所述有机溶剂选自乙腈、正丁醇、苯甲醇、丁基二乙二醇、乙醇中的一种，所述酸选自盐酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸中的一种。本发明专利技术提供的破乳方法破乳能力更强，使样品无需进行纯化处理即可测定，缩短了检测时间；本发明专利技术采用竞争ELISA方法进行定性定量检测抗原浓度，得到的标准曲线斜率会大于常规间接竞争法，从而大大提高了检测灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法
本专利技术涉及油佐剂疫苗检测
，具体涉及一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法。
技术介绍
现有的疫苗质量标准中规定效力检验必须采用本动物进行检验，由于国家实行100％的强化免疫政策，很难选出易感的检验用动物，而且动物攻毒对实验设施要求高(BSL3级实验室)、耗时长(一个月以上)、资金花费大。如果采用血清中和试验选择易感动物，在技术上难以排除具有细胞免疫的非易感动物，在检验实际中经常发生检验数据不规律的问题，影响检验的准确性。因此口蹄疫疫苗尤其是用于牛的疫苗的质量检测一直困扰着兽药监测部门和相关生产企业。因此需要尽快研制体外检验技术，代替现有的本动物试验。当前国家对疫苗的检验正逐步过渡到对疫苗内抗原的检测，而当前较为普遍的方法为疫苗破乳后对抗原进行检测，通过将疫苗进行破乳处理，使抗原转移至水相中，继而对其进行后续的检测分析。由于疫苗乳化过程中所使用的油佐剂中成分复杂，含有表面活性剂，免疫增强剂等物质存在，破乳后的水相中往往会含有上述杂质和破乳剂，行业内并没有能够去除上述杂质和破乳剂的方法，而杂质及破乳剂等还会大大影响其后的检测过程，造成信号掩本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将口蹄疫合成肽疫苗破乳，将破乳后的抗原样品采用竞争ELISA方法进行定性定量检测；所述破乳方法为：将口蹄疫合成疫苗与破乳剂混合，分层后得水相抗原样品；所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物，所述有机溶剂选自乙腈、正丁醇、苯甲醇、丁基二乙二醇、乙醇中的一种，所述酸选自盐酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸中的一种。

【技术特征摘要】
1.一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将口蹄疫合成肽疫苗破乳，将破乳后的抗原样品采用竞争ELISA方法进行定性定量检测；所述破乳方法为：将口蹄疫合成疫苗与破乳剂混合，分层后得水相抗原样品；所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物，所述有机溶剂选自乙腈、正丁醇、苯甲醇、丁基二乙二醇、乙醇中的一种，所述酸选自盐酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸中的一种。2.根据权利要求1所述的油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，其特征在于，破乳剂中有机溶剂选自乙腈、乙醇中的一种，酸选自三氟乙酸、盐酸中的一种。3.根据权利要求1所述的油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，其特征在于，油佐剂疫苗与破乳剂按体积比9:1～5:5进行混合。4.根据权利要求1所述的油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，其特征在于，所述破乳剂中酸与有机溶剂的体积比为(0.05～0.5)：100。5.根据权利要求1所述的油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，其特征在于，所述竞争ELISA方法采用的步骤如下：抗原包被：将已知浓度人工合成的口蹄疫抗原固相化吸附到ELISA板子上；稀释抗体：将已知效价的抗体进行稀释，抗体稀释后效价为1:250000-1:1100000；抗原稀释：在血清稀释板上，用稀释液将待检抗原样品稀释，标准抗原进行不同比例稀释形成不同浓度的标准抗原稀释液；抗原标准曲线绘制及待检抗原样品的定量检测：将稀释好的待检抗原样品和不同浓度的标准抗原稀释液分别与稀释好的抗体在稀释板中...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘自立，马贵军，石海芳，俞爱敏，姬明放，
申请(专利权)人：申联生物医药上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31