一种检测羊边界病毒的实时荧光定量RT‑PCR试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测羊边界病毒的实时荧光定量RT‑PCR试剂盒及应用，属于微生物检测技术领域。该试剂盒包含A液、B液和C液；所述A液为荧光定量RT‑PCR反应液，2×UltraSYBR Mixture，上游引物Forward primer与下游引物Reverse primer；所述B液为含羊边界病病毒cDNA，作为阳性对照；所述C液为RNase‑Free water，作为阴性对照。特异性检测和敏感性检测证实，本发明专利技术提供的实时荧光定量RT‑RCR试剂盒具有高度的特异性，灵敏度高，可实时监测反应并且定量检测出羊边界病病毒的拷贝数，快速准确的获得检测结果，可作为羊边界病实验室快速诊断和疫情监测的一种快速、准确、简便的检测工具。

【技术实现步骤摘要】
一种检测羊边界病毒的实时荧光定量RT-PCR试剂盒及应用
本专利技术涉及微生物检测
，具体说是涉及一种快速、简便并且可实时定量检测羊边界病病毒（BDV）的实时荧光定量RT-PCR试剂盒及其应用。
技术介绍
边界病(borderdisease，BD)，因首先发现于英格兰和威尔士的边界地区而得此名，又称羔羊被毛颤抖病(Hairyshakerdiseaseoflambs)，是由边界病病毒引起新生羔羊以身体多毛，生长不良和神经异常为主要特征的一种先天性传染病。边界病病毒（BDV）属黄病毒科瘟病毒属，是有囊膜的单股正链RNA病毒。边界病病毒有免疫抑制作用，怀孕期感染边界病病毒后，无论胎儿是否具有免疫应答能力，病毒均可在体内的各种组织中持续存在而成为病毒的携带者和疾病的传染源。被感染的羔羊在生长成熟后的几年内，仍具有对其后代的感染性，边界病病毒的主要自然宿主是绵羊，山羊也可感染，牛和猪均有易感性；血清学调查表明某些品种的野生鹿和野生反刍动物也可感染本病，并成为家养反刍动物的感染原。实验条件下兔子可感染本病毒，并用于边界病病毒复制。边界病病毒主要存在于流产的胎儿，胎膜、羊水及持续感染动物的分本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测羊边界病病毒的实时荧光定量RT‑PCR试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含A液、B液和C液；所述A液为荧光定量RT‑PCR反应液，2×UltraSYBR Mixture，上游引物Forward primer与下游引物Reverse primer；所述B液为含羊边界病病毒cDNA，作为阳性对照；所述C液为RNase‑Free water，作为阴性对照；所述的上游引物Forward primer：5'‑ GCC CAT AGT AGG ACT AGC A‑ 3'；所述的下游引物Reverse primer：5'‑ CGA ACT ACT GAC GAC TGT C‑ 3'；序列扩增大小为115...

【技术特征摘要】
1.一种检测羊边界病病毒的实时荧光定量RT-PCR试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含A液、B液和C液；所述A液为荧光定量RT-PCR反应液，2×UltraSYBRMixture，上游引物Forwardprimer与下游引物Reverseprimer；所述B液为含羊边界病病毒cDNA，作为阳性对照；所述C液为RNase-Freewater，作为阴性对照；所述的上游引物Forwardprimer：5'-GCCCATAGTAGGACTAGCA-3'；所述的下游引物Reverseprimer：5'-CGAACTACTGACGACTGTC-3'；序列扩增大小为115bp。2.根据权利要求1所述检测羊边界病病毒的实时荧光定量RT-PCR试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有一次性荧光定量PCR反应八联管。3.根据权利要求1所述检测羊边界病病毒的实时荧光定量RT-PCR试剂盒，其特征在于，所述的上游引物Forwardprimer与下游引物Reverseprimer使用前稀释到2pmol/L。4.根据权利要求1所述检测羊边界病病毒的实时荧光定量RT-PCR试剂盒，其特征在于，所述的2×UltraSYBRMixture组分包括GoldStarTaqDNAPolymerase1-5U、KCL20-30mM、MgS...

【专利技术属性】
技术研发人员：李军，冯世文，彭昊，潘艳，刘丽娅，陈泽祥，胡帅，杨威，钟舒红，马春霞，陶立，谢永平，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西,45