一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法技术

本发明专利技术属于分子生物学和病毒学技术领域，具体涉及一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法；所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测引物对序列为：正向引物TobamodF：5’‑TKGAYGGNGTBCCNGGNTGYGG‑3’，反向引物TobamodR：5’‑ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT‑3’；本发明专利技术中的检测引物是基于烟草花叶病毒属中的32种病毒基因组保守区序列进行设计，用该属中的7种病毒对该对引物进行扩增效果验证，扩增效果均较好；从而建立了一种能够检测至少7种烟草花叶病毒属病毒的通用检测引物及方法，且具有检测效率高、灵敏度高、成本低的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法
本专利技术属于分子生物学和病毒学
，具体涉及一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法。
技术介绍
烟草花叶病毒属(Tobamovirus)是帚状病毒科(Virgaviridae)中病毒种类最多的一个属，根据2012年发布的国际病毒分类委员会(ICTV)第九次大会报告，Tobamovirus有25个确定种和6个暂定种，其代表种为TMV。而根据ICTV最新的在线报告显示，Tobamovirus已有35种病毒(http://www.ictvonline.org/virusTaxonomy.asp)。烟草花叶病毒属病毒在世界各地均有分布，能侵染茄科、十字花科、葫芦科等重要作物并引起严重危害，是最具经济重要性的病毒属之一。目前为止，植物病毒中已有Potyvirus、Begomovirus、Luteovirus等病毒属的通用检测引物，大大提高了这些病毒的检测效率。烟草花叶病毒属病毒种类多且侵染性强，尤其是在茄科作物上发病严重，但迄今没有该属病毒的通用检测引物，用单一的特异性检测引物检测疑似病毒的侵染，工作量大、成本高且繁琐。为此，建立烟草花叶病本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物，其特征在于：所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测引物为：正向引物TobamodF：5’‑TKGAYGGNGTBCCNGGNTGYGG‑3’，反向引物TobamodR：5’‑ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物，其特征在于：所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测引物为：正向引物TobamodF：5’-TKGAYGGNGTBCCNGGNTGYGG-3’，反向引物TobamodR：5’-ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT-3’。2.根据权利要求1所述的一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物，其特征在于：所述检测引物对TMGMV扩增出871bp的产物，对PMMoV扩增出877bp的产物，对TMV、ToMV、ToMMV扩增出880bp的产物，对ORSV扩增出889bp的产物，对CGMMV扩增出874bp的产物。3.根据权利要求1所述的一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物，其特征在于：所述的检测引物中N可以是A、C、G、T四种碱基中的任意一种，K为G和T中的一种，Y为C和T中的一种，B为C、G、T中的一种，V为A、C、G中的一种。4.一种烟草花叶病毒属病毒通用检测方法，其特征在于：所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测方法包括以下具体步骤：RT反应体系：反转录试剂盒为PrimeScriptII1ststrandcDNASynthesisKit或TaKaRaReverseTranscriptaseM-MLVRNaseH-Kit，反应体系的总体积为10μL，PrimeScriptII1ststrandcDNASynthesisKit具体方法为，将含1-2μL的模板，0.5μL烟草花叶病毒属通用引物反向引物，0.5μL10mmol/L的dNT...

【专利技术属性】
技术研发人员：李凡，李月月，谭冠林，肖龙，马龑，熊锋，兰平秀，陈小姣，何英云，谭松涛，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：云南,53