The invention belongs to the technical field of molecular biology and biochemistry, in particular to the preparation and the preparation of recombinant protein obtained from the long tail oyster wall cell hydrolase recombinant protein. Recombinant protein of cell wall hydrolase from oyster Crassostrea gigas was obtained by yeast expression system. The invention uses yeast expression system to obtain the recombinant protein of oyster cell wall hydrolase has significant inhibition effect on Escherichia coli, Aeromonas hydrophila, Staphylococcus aureus, Vibrio splendidus, Vibrio vulnificus, Vibrio alginolyticus, Pseudomonas putida and Pseudomonas aeruginosa growth. The recombinant protein obtained by the invention can be used for the development of bacteriostatic agents.
【技术实现步骤摘要】
长牡蛎胞壁水解酶重组蛋白的制备及制备获得的重组蛋白的应用
本专利技术属于分子生物学和生物化学
，具体涉及一种来自长牡蛎胞壁水解酶重组蛋白的制备及制备获得的重组蛋白的应用。
技术介绍
长牡蛎是世界重要的海水养殖贝类之一，在我国水产养殖经济中长期占据举足轻重的地位。近年来，由各种病原微生物引起的疾病在长牡蛎的养殖群体中不断爆发，对养殖产业造成了巨大损失。因此，对长牡蛎开展免疫防御机制研究，发掘有效的抗病相关功能蛋白将有助于人类对其病害进行有效防控。长牡蛎隶属于软体动物，缺乏适应性免疫系统，仅依赖固有免疫系统抵御病原入侵。抗菌肽/蛋白作为固有免疫中重要效应分子，直接参与了对病原微生物的杀伤和清除过程。通过生物信息学技术分析发现，长牡蛎基因组序列编码了若干个胞壁水解酶基因。其中，CgCLE-1(Genbank注册号：XP_011436111.1)基因开放阅读框为501bp，其编码的蛋白含有一段120个氨基酸的Hydrolase_2结构域。CgCLE-1氨基酸序列除与长牡蛎中其他胞壁水解酶序列一致性为55-99％，与梭状芽孢杆菌属Clostridium、芽孢杆菌属Ba...
【技术保护点】
一种长牡蛎胞壁水解酶重组蛋白的制备，其特征在于：利用酵母表达体系获得长牡蛎胞壁水解酶的重组蛋白。
【技术特征摘要】
1.一种长牡蛎胞壁水解酶重组蛋白的制备，其特征在于：利用酵母表达体系获得长牡蛎胞壁水解酶的重组蛋白。2.按权利要求1所述长牡蛎胞壁水解酶重组蛋白的制备，其特征在于：1)通过长牡蛎血淋巴细胞总RNA，反转获得cDNA；2)在CgCLE-1的Hydolase_2结构域编码区两端分别设计含有限制性酶切位点的引物；序列为：5’-GAATTCAGAGGAGAACCGATGGAAGCTA-3’，5’-GCGGCCGCCACAAAGTACAGACCCCCGAGTT-3’；3)以步骤1)获得cDNA为模板，采用步骤2)的引物通过PCR扩增获得该基因片段，并将其克隆到pPICZαA表达载体中构建重组质粒；4)所述获得...
【专利技术属性】
技术研发人员：张峘，王玲玲，王昊，刘瑞，贾志浩，邱丽梅，宋林生，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37
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