使用基因疗法治疗和预防神经变性疾病制造技术

本文提供治疗和/或预防神经变性疾病诸如阿尔茨海默病的组合物和方法。在具体方面，本文施用的组合物编码细胞免疫应答元件。组合物可以以这样的方式制备和施用：编码细胞免疫应答元件的序列在施用组合物的对象中表达。组合物包括表达系统、传递系统和某些细胞免疫应答元件基因。

Treatment and prevention of neurodegenerative diseases using gene therapy

The present invention provides compositions and methods for the treatment and / or prevention of neurodegenerative diseases, such as Alzheimer's disease. In particular, the composition applied in this paper encodes a cellular immune response element. Compositions can be prepared and administered in such a manner that sequences of cell immune response elements are expressed in an object in which the composition is applied. The composition comprises an expression system, a delivery system, and certain cellular immune response element genes.

【技术实现步骤摘要】
使用基因疗法治疗和预防神经变性疾病本申请是专利技术名称为“使用基因疗法治疗和预防神经变性疾病”、申请号为“200880010918.7”、申请日为2008年2月4日的申请的分案申请。相关申请的交叉参考本专利技术要求2007年2月6日提交的申请序列号60/900,138的优先权，其通过引用全部并入本文。专利
本文提供治疗和/或预防神经变性疾病诸如阿尔茨海默病的组合物和方法。在某些方面，所述组合物和方法涉及过继细胞疗法和DNA免疫。专利技术背景神经炎症与阿尔茨海默病(AD)病理学相关(Chen,K.etal.,281PeptideJ.Biol.Chem.3651-59(2006)和Frenkel,D.etal.,115J.Clin.Inves.2423-33(2005))。神经炎症涉及大量活化的小胶质细胞和星形胶质细胞以及少量T细胞的积聚，其大部分粘附至毛细血管后微静脉(Agadjanyan,M.G.etal.,174J.Immunol.1580-86(2005)；Dickson,D.etal.,7Glia75-83(1993)；和Fillit,H.etal.,129Neurosci.Lett.318-20(1991))。小胶质细胞和星形胶质细胞均已显示产生β-淀粉样蛋白(Aβ)，其是AD的主要病理学特征之一。Aβ本身已显示充当引起许多炎症组分活化的促炎剂(pro-inflammatoryagent)。伴随的生物化学变化包括表征炎症和自由基攻击的许多分子的出现或上调。特别重要的可能是补体蛋白质、急性期反应物和炎症细胞因子。服用非甾体类抗炎药物的患者患AD的风险低于没有服用非甾体类抗炎药的那些患者。这些结果在寻求AD抗炎疗法中引起了增加的兴趣(Fillit,H.1991)。专利技术概述尽管神经变性疾病诸如阿尔茨海默病在传统上不被认为由炎症或免疫系统介导，但是在某些情况下，免疫系统在变性过程中起重要作用。设计为诱导体液免疫应答的免疫治疗方法先前已开发用于治疗AD。那些研究使得人体试验导致有益的和不利的效果。在动物模型中已显示，设计为诱导细胞免疫应答的免疫疗法可有益于中枢神经系统损伤，尽管取决于诱导的T细胞应答类型，T细胞可具有或是有益或是有害的作用。这些研究提供开发基于免疫系统治疗神经变性疾病的新途径。适合的免疫系统广义上可分为两种应答类型：细胞和体液(抗体)应答类型。在细胞应答中，三种主要类型或种类的免疫应答已被确定在理解炎症过程调节的机制中起关键作用，例如Th1应答(包括例如IFN-γ)相比于Th2或Th3应答(包括例如IL-4、IL-10、IL-13和TGF-β)。不同种类的T细胞应答对于开发阿尔茨海默病的接种策略具有重要的启示。本文提供的内容包括治疗和/或预防神经变性疾病诸如阿尔茨海默病的组合物和方法。在某些方面，所述组合物和方法涉及DNA疫苗和过继细胞基因疗法，以便治疗或改善神经变性疾病。在某些具体方面，所述组合物和方法涉及编码细胞免疫应答元件诸如Th2或Th3细胞因子的DNA疫苗。在一个方面，提供用于治疗或改善神经变性疾病的方法，其包括施用诱导细胞免疫应答的组合物。在另一个方面，提供用于治疗或改善神经变性疾病的方法，其通过施用包含细胞免疫应答元件的组合物而施用诱导细胞免疫应答的组合物来进行；优选地，细胞免疫应答元件是蛋白质、肽、核酸或多核苷酸。在一个相关方面，还提供治疗或改善神经变性疾病的方法，其包括施用两种或更多种、三种或更多种、四种或更多种、五种或更多种、或六种或更多种细胞免疫应答元件。在另一个方面，还提供制造用于治疗或预防神经变性疾病的组合物的方法，其可以包括制备多核苷酸或其片段，所述多核苷酸或其片段具有转录连接至编码细胞免疫应答元件基因或其片段的序列的启动子/增强子。在一个相关方面，提供制备用于在对象中表达细胞免疫应答元件多核苷酸或其片段的组合物的方法，其包括：制备多核苷酸，所述多核苷酸具有转录连接至编码细胞免疫应答元件基因或其片段的序列的启动子/增强子；以及将促进转染的物质与所述多核苷酸组合。还提供给哺乳动物——优选人——施用的组合物和方法。在另一个方面，组合物可以包括药学上可接受的载体和包含编码细胞免疫应答元件多肽的序列的多核苷酸。在某些方面，提供试剂盒，其可以包括适于容纳给对象——优选人——施用的药物的容器、包含编码细胞免疫应答元件多肽的序列的多核苷酸、药学上可接受的载体以及附至容器的标签或包装说明书(packageinsert)。在其它方面，提供施用与细胞免疫应答元件多肽或其片段同源的多肽的方法。在某些实施方式中，提供诱导细胞免疫应答元件的组合物。该方法和组合物可以包括蛋白质、核酸或多核苷酸；优选地，多核苷酸和/或核酸是DNA或RNA；优选地，多核苷酸是环状DNA；优选地，多核苷酸是质粒；优选地，多核苷酸包含转录连接至编码细胞免疫应答元件基因的序列的启动子/增强子；优选地，多核苷酸包含复制起点(ORI)；优选地，多核苷酸包含多克隆位点(MCS)；优选地，启动子适于在真核细胞中表达；在某些优选的实施方式中，多核苷酸是载体；优选是病毒载体，在其它优选的实施方式中，多核苷酸是RNA；优选地，多核苷酸是双链RNA；优选地，多核苷酸是短干扰RNA(siRNA)，或优选地，一种以上减少炎症的组合物可同时施用。在某些实施方式中，单个细胞免疫应答元件在单个多核苷酸或质粒上；在其它实施方式中，一种以上的细胞免疫应答元件可以在单个多核苷酸或质粒上。在其它实施方式中，单个多核苷酸或质粒包括一种或更多种细胞免疫应答元件以及进一步包括一种或更多种已知治疗或改善神经变性疾病影响的多肽或其片段(即，脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)、β-淀粉样蛋白、β-淀粉样肽1-42(β-淀粉样蛋白1-42)、载脂蛋白E(ApoE)或ApoE-2)。其它实施方式涉及施用细胞免疫应答元件的蛋白质、肽和/或多肽。在其它实施方式中，提供施用编码细胞免疫应答元件多肽的核酸和/或多核苷酸的方法。组合物可以以这样的方式制备和施用：细胞免疫应答元件多肽表达于被施用组合物的对象中。组合物可以包括免疫调节基因诸如抗炎细胞因子、细胞因子激动剂或抗TNF抗体的表达系统、传递系统和编码序列。优选地，该方法和组合物的细胞免疫应答元件增加减少炎症的基因，优选地，增加基因表达是通过上调表达；优选地，减少炎症的基因是Th2细胞因子；优选地，Th2细胞因子是IL-4、IL-5、IL-10、IL-13或TGF-β；在其它优选的实施方式中，包含细胞免疫应答元件的组合物抑制或削弱增加炎症的基因，优选地，增加炎症的基因是Th1细胞因子；优选地，削弱基因表达是通过下调表达；优选地，Th1细胞因子优选是1L-2、IL-12或TNFα；在某些实施方式中，组合物通过刺激表达或产生减少炎症的基因来影响调节，然而在其它实施方式中，组合物通过抑制增加刺激的基因表达来影响调节，诸如Th1拮抗物。令人惊讶的是，如实施例3和4所描述，显示了施用编码IFN-γ的多核苷酸可以治疗和预防动物模型中阿尔茨海默病的影响。尽管IFN-γ是Th1细胞因子，但它作为基因疫苗施用已显示使神经变性疾病的影响减到最小。因此，本文提供包含多核苷酸的组合物和方法作为治疗或改善对象的神经变性本文档来自技高网...

【技术保护点】
主要由编码IL‑4的核酸，和任选地选自编码ApoE‑2、神经生长因子(NGF)和脑源神经营养因子(BDNF)的核酸的一种或多种核酸组成的组合物，其用于治疗或改善阿尔茨海默病的方法的应用，其中所述组合物将被施用。

【技术特征摘要】
2007.02.06 US 60/900,1381.主要由编码IL-4的核酸，和任选地选自编码ApoE-2、神经生长因子(NGF)和脑源神经营养因子(BDNF)的核酸的一种或多种核酸组成的组合物，其用于治疗或改善阿尔茨海默病的方法的应用，其中所述组合物将被施用。2.用于权利要求1任一项所述应用的组合物，其中所述核酸被施用给哺乳动物。3.用于权利要求2所述应用的组合物，其中所述哺乳动物是人。4.用于前述权利要求任一项所述应用的组合物，其中所述施用包括选自静脉注射、肌肉注射、腹膜内注射、皮下注射、电穿孔、注射、吸入和基因枪的一种或更多种方法。5.用于权利要求1-3任一项所述应用的组合物，其中所述核酸包括多核苷酸，并且其中所述多核苷酸包括环状DNA，所述环状DNA包含复制起点(ORI)、启动子和多克隆位点(MCS)。6.用于...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞泰俊，
申请(专利权)人：俞泰俊，
类型：发明
国别省市：美国,US