以NCAM‑1为检测指标的金标试剂盒及其制备方法和应用技术
【技术实现步骤摘要】
以NCAM-1为检测指标的金标试剂盒及其制备方法和应用
本专利技术属于医用检测工具，涉及狼疮肾炎活跃度的检测工具，特别涉及一种以NCAM-1为检测指标的金标试剂盒及其制备方法和应用。
技术介绍
狼疮肾炎是系统性红斑狼疮最常见的并发症之一，且狼疮肾炎所导致的终末期肾病是导致系统性红斑狼疮病人死亡的主要因素。而从狼疮肾炎发展为终末期肾病最主要的原因就是因为活跃期的狼疮肾炎没有被及时发现，导致了治疗不及时，肾脏引发不可逆的肾小球硬化以及间质血管纤维化。对于狼疮肾炎活跃度的判断，“金标准”是通过肾脏穿刺活检术对肾脏组织进行病理学检查，根据病理学检查结果进行诊断。而肾脏穿刺活检术为有创性检查，禁忌症较多，无法多次常规进行，因此目前临床上缺乏无创、准确、快捷、安全的检测方法和工具。NCAM-1（Neuralcelladhesionmolecule～1，中文名：神经细胞粘附分子～1）是一种非钙依赖性粘附因子，在细胞信号识别及传导、神经再生等方面都具有一定的作用。
技术实现思路
专利技术人在长期的研究中发现，NCAM-1在活跃期狼疮肾炎患者尿液中的浓度明显的高于非活跃期狼疮肾炎患者及...
【技术保护点】
NCAM‑1作为检测指标在检测狼疮肾炎活跃度的金标试剂盒中的应用。
【技术特征摘要】
1.NCAM-1作为检测指标在检测狼疮肾炎活跃度的金标试剂盒中的应用。2.一种如权利要求1所述的检测狼疮肾炎活跃度的金标试剂盒，其特征在于：所述的金标试剂盒通过检测尿液样本中NCAM-1作为检测指标。3.根据权利要求2所述的检测狼疮肾炎活跃度的金标试剂盒，其特征在于：所述金标试剂盒包括底板（7）、吸水垫（6）、硝酸纤维素膜（3）、金标垫（2）和样品垫（1），所述样品垫（1）、金标垫（2）、硝酸纤维素膜（3）和吸水垫（6）依次相接覆盖在底板（7）上，且金标垫（2）被样品垫（1）部分覆盖；所述硝酸纤维素膜（3）上设置有由鼠抗人NCAM-1单克隆抗体、兔抗人NCAM-1单克隆抗体，兔抗人NCAM-1多克隆抗体和羊抗人NCAM-1多克隆抗体中的任意一种包被形成的检测线（4）；由羊抗鼠免疫球蛋白G和羊抗兔免疫球蛋白G多克隆抗体中的任意一种包被形成的控制线（5），所述金标垫（2）包被有胶体金与鼠抗人NCAM-1单克隆抗体和兔抗人NCAM-1单克隆抗体中的任意一种偶联形成的结合物。4.根据权利要求3所述的检测狼疮肾炎活跃度的金标试剂盒，其特征在于：所述检测线（4）、控制线（5）的宽度各控制为0.5mm～0.8mm，所述检测线（4）与控制线（5）之间的间距控制为5mm～10mm。5.根据权利要求3所述的检测狼疮肾炎活跃度的金标试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的制备包括下述步骤：（1）检测线、质控线的包被：以鼠抗人NCAM-1单克隆抗体、兔抗人NCAM-1单克隆抗体、兔抗人NCAM-1多克隆抗体和羊抗人NCAM-1多克隆抗体中的任意一种为溶质，加入缓冲溶液为溶剂，配制成浓度为1～4mg/mL的检测线溶液；以羊抗鼠免疫球蛋白G多克隆抗体或者羊抗兔免疫球蛋白G多克隆抗体为溶质，加入缓冲溶液为溶剂，配制成浓度为0.5～1mg/mL的质控线溶液；通过划膜机将制备得到的控制线溶液、检测线溶液包被在硝酸纤维素膜上，所述硝酸纤维素膜贴在底板上，将完成包被后的硝酸纤维素膜-底板组合体在37℃干燥12～16h；（2）制备金标垫：①以鼠抗人NCAM-1单克隆抗体或兔抗人NCAM-1单克隆抗体为溶质，加入缓冲液为溶剂，配制浓度为0.5～2mg/mL的鼠抗人NCAM-1单克隆抗体溶液或兔抗人NCAM-1单克隆抗体溶液；②将步骤①中制备得到的鼠抗人NCAM-1单克隆抗体溶液或兔抗人NCAM-1单克隆抗体溶液与适量胶体金溶液混合，制得鼠抗人NCAM-1单克隆抗体或兔抗人NCAM-1单克隆...
【专利技术属性】
技术研发人员：王艳云，张林，胡怀忠，陶冶，刘毅，赵毅，周斌，
申请(专利权)人：四川大学华西第二医院，
类型：发明
国别省市：四川,51
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