当前位置: 首页 > 专利查询>南开大学专利>正文

分离与富集蛋白质的分子印迹树脂和制备方法技术

技术编号:1561114 阅读:205 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及分离与富集蛋白质的分子印迹树脂和制备方法,以克隆蛋白质为模板用辅助识别的限长聚合物链(识别分子)合成蛋白质印迹聚合物,具体地用于天然微量蛋白质的分离、富集。该分子印迹树脂可用于天然细胞提取物中目标蛋白质的分离、富集。本发明专利技术成球在有机相中进行,印迹在水相中进行,避免了对模板蛋白质的破坏,实用性强。以克隆蛋白质为模板的方法克服了天然微量蛋白质的印迹模板难以得到的瓶颈。使用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳并以硝酸银染色检测吸附蛋白及其洗涤过程,这种检测方法灵敏度高,定量容易,直观准确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子印迹树脂的合成及其应用,特别是一种分子印迹树脂和制备方法及其分离与富集天然微量蛋白质的应用,以克隆蛋白质为模板用辅助识别的限长聚合物链(识别分子)合成蛋白质印迹聚合物,具体地用于天然微量蛋白质的分离、富集。
技术介绍
分子印迹技术是聚合物通过“记忆”印迹分子的立体空间而具有的分子水平上的专一性识别能力。由于蛋白质结构的特殊性及生物活性的要求,近年来印迹蛋白质成为分子印迹领域研究热点。利用非共价作用是印迹蛋白质最简单方法。常用的弱分子间作用力有氢键、静电力、电荷转移、疏水作用以及范德华力等。印迹蛋白质的方法主要有包埋法、表面印迹法、抗原决定基的方法。早期采用最多的聚合方法是包埋法,印迹的蛋白质通过蛋白酶的降解去除,印迹聚合物可以重新吸附印迹分子。Hjéten等(Hjéten J,Liao J L,Nakazato Ketal.,Chromatography,1997,44227-234)采用该法,以丙烯酰胺为单体合成了低交联度的凝胶,对血红蛋白、生长激素、红细胞色素、肌红蛋白和核糖核酸酶等进行了印迹。洗脱印迹分子后得到了具有良好选择性的分子印迹聚合物,不同的印迹分本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分子印迹树脂,其特征在于,它的孔径为20nm,小球直径为0.2mm,按以下步骤制备:1)以丙烯酸丁酯为单体,在引发剂、催化剂和配位剂存在下,通过原子转移自由基聚合反应合成聚合度为30的链聚合物,水解后与烯丙基氯进行部分取代反应, 取代后的侧基作为锚定基团,未取代的羧基作为识别基团从而得到识别分子;2)以克隆蛋白质为模板与识别分子在水溶液中进行组装,用丙烯酸甲酯聚合而成的大孔微球对识别分子/模板蛋白质组装体进行吸附,接着在体系中加入丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺,在 引发剂过二硫酸胺作用下,组装体中识别分子锚定基团侧链的双键和微球表面的双键进行交联共聚,把辅助识别聚合物...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:宓怀风赵琢王春红
申请(专利权)人:南开大学
类型:发明
国别省市:12[中国|天津]

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1
相关领域技术
  • 暂无相关专利