因子H结合蛋白变体及其使用方法技术

提供了可以引发对至少一种脑膜炎奈瑟氏球菌菌株杀菌性的抗体的变体因子H结合蛋白、包含所述蛋白质的组合物、以及所述蛋白质的使用方法。

Factor H binding protein variants and methods of use thereof

Provides a variant of factor H antibody can lead to at least one of Neisseria meningitidis strains bactericidal binding protein, containing the protein compositions, and methods of using the protein.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】因子H结合蛋白变体及其使用方法交叉引用本申请要求于2014年7月23日提交的美国临时专利申请No.62/028,123的权益，该申请通过引用的方式整体并入本文。引言脑膜炎奈瑟氏球菌(Neisseriameningitidis)是一种革兰氏阴性细菌，其定殖于人类上呼吸道，并且最值得注意的是引起脑膜炎和败血症的世界范围内的偶发性和周期性流行性爆发。2岁以下儿童的侵袭和发病率最高。与其它革兰氏阴性细菌一样，脑膜炎奈瑟氏球菌通常具有细胞质膜、肽聚糖层、与荚膜多糖一起构成细菌壁的外膜、和突出到外部环境中的菌毛。脑膜炎奈瑟氏球菌的包囊菌株是儿童和年轻成人中细菌性脑膜炎和败血症的主要原因。侵袭性脑膜炎奈瑟氏球菌感染的流行和经济重要性推动了对可赋予跨不同株，特别是跨具有不同血清型或血清亚型的遗传多样性血清组B的免疫性的有效疫苗的研究。因子H结合蛋白(fHbp，在本领域中也称为脂蛋白2086(Fletcher等人(2004)InfectImmun72:2088-2100)，基因组来源的奈瑟氏球菌抗原(GNA)1870(Masignani等人(2003)JExpMed197:789-99)或“741”)是在细菌中作为表面暴露的脂蛋白表达的脑膜炎奈瑟氏球菌蛋白。fHbp的一个重要功能是结合人补体因子H(fH)，其下调补体激活。fH与细菌表面的结合是病原体在非免疫人血清或血液中存活并逃避先天宿主防御的重要机制。最近，发现人因子H基因簇中的遗传变异影响发展脑膜炎球菌病的易感性(DavilaS等人(2010)NatGeneticsdoi:10.1038/ng.640)。fH与fHbp的结合对人fH和几种非人灵长类动物是特异的，并且可以部分解释为什么脑膜炎奈瑟氏球菌严格地是人类病原体。fHbp出现在由标识(ID)号指定的许多天然序列变体中，如在pubmlst(dot)org/neisseria/fHbp因特网上的fHbp数据库中指定的。仍然需要可引发有效的杀菌性抗体应答的fHbp多肽。概述提供了可以引发对至少一种脑膜炎奈瑟氏球菌菌株具有杀菌性的抗体的变体因子H结合蛋白、包含所述蛋白质的组合物、以及使用所述蛋白质的方法。特征本公开提供了因子H结合蛋白(fHbp)ID1的变体。本公开提供了fHbp的变体，其中所述变体包含选自以下的至少一种的氨基酸取代：a)在氨基酸38处的谷氨酰胺(Q38)的氨基酸取代；b)在氨基酸92处的谷氨酸(E92)的氨基酸取代；c)在氨基酸130处用甘氨酸取代精氨酸(R130G)；d)在氨基酸223处的丝氨酸(S223)的氨基酸取代；和e)在氨基酸248处用组氨酸取代亮氨酸(H248L)，其中所述氨基酸取代相对于fHbpID1(SEQIDNO:1)，其中所述变体包含与SEQIDNO:1具有至少80％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体fHbp以fHbpID1对人fH的亲和力的50％或更小的亲和力结合人因子H(fH)，并且其中所述变体诱导对哺乳动物宿主中至少一种脑膜炎奈瑟氏球菌菌株的杀菌性抗体应答。在一些情况下，在Q38处的氨基酸取代是Q38R、Q38K、Q38H、Q38F、Q38Y或Q38W。在一些情况下，E92处的氨基酸取代是E92K、E92R、E92H、E92F、E92Y或E92W。在一些情况下，S223处的氨基酸取代是S223R、S223K、S223H、S223F、S223Y或S223W。在一些情况下，变体fHbp还可包含相对于fHbpID1的R41S或R41A取代。例如，相对于fHbpID1，变体fHbp可以包含R41S或R41A取代和S223处的取代，例如R41S/S223R。在其它情况下，变体fHbp还可包含相对于fHbpID1的R41S或R41A取代和H248L取代。在某些情况下，变体fHbp可以包含两个、三个或更多个本文公开的取代。在一个具体的实例中，变体fHbp可以包含相对于fHbpID1的以下取代：S223R和H248L。在一些情况下，变体fHbp以fHbpID1对人fH的亲和力的25％或更小的亲和力结合人fH。在一些情况下，变体fHbp以fHbpID1对人fH的亲和力的10％或更小的亲和力结合人fH。在一些情况下，变体fHbp以fHbpID1对人fH的亲和力的5％或更小的亲和力结合人fH。本公开提供了fHbpID22的变体。本公开提供了fHbp的变体，其中所述变体包含选自以下的至少一种氨基酸取代：a)在氨基酸115处用异亮氨酸取代天冬酰胺(N115I)；b)在氨基酸121处用甘氨酸取代天冬氨酸(D121G)；c)在氨基酸128处苏氨酸取代丝氨酸(S128T)；d)131位处的缬氨酸的氨基酸取代(V131)；e)219位处的赖氨酸的氨基酸取代(K219)；f)220位处的甘氨酸的氨基酸取代(G220)，其中所述氨基酸取代相对于fHbpID22(SEQIDNO:2)，其中所述变体包含与SEQIDNO:2具有大于85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的50％或更小的亲和力结合人因子H(fH)，并且其中所述变体在哺乳动物宿主中诱导杀菌性抗体应答。在一些情况下，变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的25％或更小的亲和力结合人fH。在一些情况下，变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的10％或更小的亲和力结合人fH。在一些情况下，变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的5％或更小的亲和力结合人fH。在一些情况下，V131处的氨基酸取代是V131D、V131E、V131K、V131R、V131H、V131F、V131Y或V131W。在一些情况下，在K219处的氨基酸取代是K219N、K219Q、K219D、K219E、K219F、K219Y或K219W。在一些情况下，G220处的氨基酸取代是G220S、G220N、G220Q、G220D、G220E、G220K、G220R、G220H、G220F、G220Y或G220W。在一些情况下，变体fHbp包括与野生型(WT)fHbp(例如WTfHbpID22)的热稳定性相比增加变体fHbp的热稳定性的双重突变。在一些情况下，变体fHbp可包含相对于fHbpID22(SEQIDNO:2)的取代L130R和G133D，其中变体fHbp包含与SEQIDNO:2具有大于85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的50％或更小的亲和力结合人因子H(fH)，其中所述变体在哺乳动物宿主中诱导杀菌性抗体应答，并且其中所述变体与fHbpID22的热稳定性相比具有更高的热稳定性。在一些情况下，变体fHbp可包含取代的组合，如L130R，G133D和选自以下的至少一种氨基酸取代：a)N115I；b)D121G；c)S128T；d)V131；e)K219(例如，K219N)；和f)G220(例如，G220S)，其中所述氨基酸取代相对于fHbpID22(SEQIDNO:2)，其中所述变体fHbp包含与SEQIDNO:2具有大于85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的50％或更小的亲和力结合人因子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种因子H结合蛋白(fHbp)变体，其中所述变体包含选自以下至少一种的氨基酸取代：a)在氨基酸38处的谷氨酰胺(Q38)的氨基酸取代；b)在氨基酸92处的谷氨酸(E92)的氨基酸取代；c)在氨基酸130处用甘氨酸取代精氨酸(R130G)；d)在氨基酸223处的丝氨酸(S223)的氨基酸取代；和e)在氨基酸248处用组氨酸取代亮氨酸(H248L)，其中所述氨基酸取代相对于fHbp ID 1(SEQ ID NO:1)，其中所述变体包含与SEQ ID NO:1具有至少80％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体fHbp以fHbp ID 1对人fH的亲和力的50％或更小的亲和力结合人因子H(fH)，并且其中所述变体在哺乳动物宿主中诱导对至少一种脑膜炎奈瑟氏球菌菌株的杀菌性抗体应答。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.23 US 62/028,1231.一种因子H结合蛋白(fHbp)变体，其中所述变体包含选自以下至少一种的氨基酸取代：a)在氨基酸38处的谷氨酰胺(Q38)的氨基酸取代；b)在氨基酸92处的谷氨酸(E92)的氨基酸取代；c)在氨基酸130处用甘氨酸取代精氨酸(R130G)；d)在氨基酸223处的丝氨酸(S223)的氨基酸取代；和e)在氨基酸248处用组氨酸取代亮氨酸(H248L)，其中所述氨基酸取代相对于fHbpID1(SEQIDNO:1)，其中所述变体包含与SEQIDNO:1具有至少80％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体fHbp以fHbpID1对人fH的亲和力的50％或更小的亲和力结合人因子H(fH)，并且其中所述变体在哺乳动物宿主中诱导对至少一种脑膜炎奈瑟氏球菌菌株的杀菌性抗体应答。2.根据权利要求1所述的变体fHbp，其中在Q38处的氨基酸取代是Q38R、Q38K、Q38H、Q38F、Q38Y或Q38W。3.根据权利要求1所述的变体fHbp，其中在E92处的氨基酸取代是E92K、E92R、E92H、E92F、E92Y或E92W。4.根据权利要求1所述的变体fHbp，其中在S223处的氨基酸取代是S223R、S223K、S223H、S223F、S223Y或S223W。5.根据权利要求1所述的变体fHbp，其中所述变体fHbp以fHbpID1对人fH的亲和力的25％或更小的亲和力结合人fH。6.根据权利要求1所述的变体fHbp，其中所述变体fHbp以fHbpID1对人fH的亲和力的10％或更小的亲和力结合人fH。7.根据权利要求1所述的变体fHbp，其中所述变体fHbp以fHbpID1对人fH的亲和力的5％或更小的亲和力结合人fH。8.根据权利要求1-7中任一项所述的变体fHbp，其还包含选自由R41S和R41A组成的组的氨基酸取代。9.根据权利要求1-8中任一项所述的变体fHbp，其还包含以下氨基酸取代：S223R和H248L。10.一种因子H结合蛋白(fHbp)变体，其中所述变体包含选自以下的氨基酸取代：a)在氨基酸115处用异亮氨酸取代天冬酰胺(N115I)；b)在氨基酸121处用甘氨酸取代天冬氨酸(D121G)；c)在氨基酸128处用苏氨酸取代丝氨酸(S128T)；d)在131位处的缬氨酸(V131)的氨基酸取代；e)在219位处的赖氨酸(K219)的氨基酸取代；f)在220位处的甘氨酸(G220)的氨基酸取代，其中所述氨基酸取代相对于fHbpID22(SEQIDNO:2)，其中所述变体包含与SEQIDNO:2具有大于85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的50％或更小的亲和力结合人因子H(fH)，并且其中所述变体在哺乳动物宿主中诱导杀菌性抗体应答。11.根据权利要求10所述的变体fHbp，其中所述变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的25％或更小的亲和力结合人fH。12.根据权利要求10所述的变体fHbp，其中所述变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的10％或更小的亲和力结合人fH。13.根据权利要求10所述的变体fHbp，其中所述变体fHbp以fHbpID22对人fH的亲和力的5％或更小的亲和力结合人fH。14.根据权利要求10所述的变体fHbp，其中在V131处的氨基酸取代是V131D、V131E、V131K、V131R、V131H、V131F、V131Y或V131W。15.根据权利要求10所述的变体fHbp，其中在K219处的氨基酸取代是K219N、K219Q、K219D、K219E、K219F、K219Y或K219W。16.根据权利要求10所述的变体fHbp，其中在G220处的氨基酸取代是G220S、G220N、G220Q、G220D、G220E、G220K、G220R、G220H、G220F、G220Y或G220W。17.根据权利要求10-16中任一项所述的变体fHbp，其还包含以下取代：L130R和G133D，其中所述氨基酸取代相对于fHbpID22。18.根据权利要求10所述的变体fHbp，其包含取代：L130R、G133D和N115I。19.根据权利要求10所述的变体fHbp，其包含取代：L130R、G133D和D121G。20.根据权利要求10所述的变体fHbp，其包含取代：L130R、G133D和K219N或取代L130R、G133D和D211A。21.根据权利要求10所述的变体fHbp，其包含取代...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·T·比尔宁克，
申请(专利权)人：奥克兰儿童医院及研究中心，
类型：发明
国别省市：美国,US