改性的H因子结合蛋白（FHBP）及其使用方法技术

本申请涉及改性的H因子结合蛋白(FHBP)及其使用方法。本申请提供了H因子结合蛋白及其使用方法，所述蛋白能够引发针对至少一种脑膜炎奈瑟球菌菌株具有杀菌性的抗体。

Modified factor H binding protein (fHbp) and its application

【技术实现步骤摘要】
改性的H因子结合蛋白(FHBP)及其使用方法本申请是申请日为2011年3月29日、中国申请号为201510771883.0、专利技术名称为“改性的H因子结合蛋白(FHBP)及其使用方法”的分案申请的再分案申请(原申请号为201180017429.6)。交叉引用本申请要求申请号为61/319,181，申请日为2010年3月30日、申请号为61/334,542，申请日为2010年5月13日、申请号为61/381,025，申请日为2010年9月8日、申请号为61/423,757，申请日为2010年12月16日、以及申请号为61/440,227，申请日为2011年2月7日的美国临时专利申请的优先权，各申请的全部内容通过引用并入本申请。关于联邦政府资助研究的声明本专利技术在美国国家过敏与感染性疾病研究所和国立卫生研究院基金的资助下完成，基金号R01AI046464、R01AI082263、和AI070955。政府对本专利技术享有一定权利。前言脑膜炎奈瑟球菌是一种革兰氏阴性细菌，寄居在人上呼吸道，最值得注意的是，它导致脑膜炎和败血症在世界范围内的零星和周期性流行爆发。两岁以下儿童的发病率和死亡率最高。与其他革兰氏阴性细菌相似，脑膜炎奈瑟球菌通常具有细胞质膜、肽聚糖层、外膜和菌毛，外膜与荚膜多糖一起构成细菌细胞壁，菌毛突出在外环境中。有荚膜的脑膜炎奈瑟球菌菌株是青少年中导致细菌性脑膜炎和败血症的主要原因。侵袭性脑膜炎奈瑟球菌感染的流行和经济上的重要性促使人们研究有效的疫苗，使之能对各种菌株，特别是具有不同血清型或血清亚型的遗传多样性B群菌株产生免疫力。H因子结合蛋白(fHbp，在本领域也称为脂蛋白2086(Fletcheretal(2004)InfectImmun72:2088-2100))、基因组衍生的奈瑟菌属抗原(GNA)1870(Masignanietal.(2003)JExpMed197:789-99)或“741”)是一种脑膜炎奈瑟球菌蛋白，其在细菌中以表面暴露的脂蛋白形式表达。fHbp的一个重要功能是与人补体因子H(fH)结合，其能够下调补体的活性。fH与细菌表面的结合是病原体在未经免疫的人血清或血液中存活并逃避先天性宿主防御的重要机制。最近，发现人H因子基因簇的遗传变异影响对发生脑膜炎球菌疾病的易感性(DavilaSetal.(2010)NatGeneticsdoi:10.1038/ng.640)。fH与人fH的fHbp的特异性结合能够解释为何脑膜炎奈瑟球菌仅严格地作为人的病原体。仍需要一种能够引发有效的杀菌抗体应答的fHbp多肽。专利技术概述本申请提供了H因子结合蛋白及其使用方法，所述蛋白能够引发针对至少一种脑膜炎奈瑟球菌种菌株具有杀菌性的抗体。本申请涉及下述各项。1.一种非天然存在的H因子结合蛋白(fHbp)，所述蛋白对人H因子(fH)的亲和性低于fHbpID1，其中所述非天然存在的fHbp存在供抗体结合的构象表位，所述抗体对至少一种脑膜炎奈瑟球菌菌株具有杀菌活性。2.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp与天然存在的对照fHbp相比，包含至少一个氨基酸取代。3.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp与人fH结合的亲和性为fHbpID1与人fH亲和性的50％或更低。4.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp与人fH结合的亲和性为fHbpID1与人fH亲和性的40％、30％、20％、10％、5％、2％、1％、0.1％、或0.1％以下。5.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp引发的杀菌性抗体的血清水平至少与fHbpID1引发的水平一样高。6.根据项5所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp引发的杀菌性抗体的血清水平至少比fHbpID1引发的水平高2倍。7.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自变体1fHbp。8.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自变体2fHbp。9.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自变体3fHbp。10.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含可变片段VA、VC,、和VE，其全部衍生自谱系1。11.根据项7所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自模块群IfHbp或模块群IVfHbp。12.根据项8所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自模块群IIIfHbp或模块群VIfHbp。13.根据项9所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自模块群IIfHbp或模块群VfHbp。14.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自模块群VII、VIIII、IX、或XfHbp。15.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp为人工制备的嵌合体。16.根据项15所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自嵌合体I的氨基酸序列。17.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp在对应于氨基酸残基41、60、80、113、114、117、119、121、128、130、147、148、149、178、195、199、211、220、222、236、241、247、或248的位置处包含氨基酸取代，所述编号基于成熟fHbpID1的编号。18.根据项1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp在对应于氨基酸残基87、109、115、118、126、138、197、201、202、203、209、217、225、235、或245的位置处包含氨基酸取代，所述编号基于成熟fHbpID1的编号。19.根据项17所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp在对应于氨基酸残基41的位置处包含氨基酸取代。20.根据项19所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含R41S作为所述氨基酸取代。21.根据项19所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含R41A作为所述氨基酸取代。22.根据项17所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含R130A作为所述氨基酸取代。23.根据项17所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含H119A作为所述氨基酸取代。24.根据项17所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含E218A或E239A作为所述氨基酸取代。25.根据项19-24任一项所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自fHbpID1。26.根据项17所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含fHbpID14，所述fHbpID14含有R41S作为所述氨基酸取代。27.根据项17所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含fHbpID4，所述fHbpID4含有R41S作为所述氨基酸取代。28.根据项17所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp包含fHbp本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种非天然存在的H因子结合蛋白(fHbp)，所述蛋白对人H因子(fH)的亲和性低于fHbp ID 1，其中所述非天然存在的fHbp存在供抗体结合的构象表位，所述抗体对至少一种脑膜炎奈瑟球菌菌株具有杀菌活性。/n

【技术特征摘要】
20100330 US 61/319,181;20100513 US 61/334,542;20101.一种非天然存在的H因子结合蛋白(fHbp)，所述蛋白对人H因子(fH)的亲和性低于fHbpID1，其中所述非天然存在的fHbp存在供抗体结合的构象表位，所述抗体对至少一种脑膜炎奈瑟球菌菌株具有杀菌活性。


2.根据权利要求1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp衍生自变体1fHbp、变体2fHbp、或变体3fHbp。


3.根据权利要求1所述的非天然存在的fHbp，其中所述fHbp为人工制备的嵌合体，其中所述fHbp衍生自嵌合体I的氨基酸序列，其中所述fHbp在对应于氨基酸残基41的位置处包含氨基酸取代。


4.一种免疫原性组合物，包含：
a)根据权利要求1-3任一项所述的fHbp；以及
b)药学上可接受的辅料。


5.一种免疫原性组合物，包含：
a)一种分离的H因子结合蛋白(fHbp)，其包含与fHbpID4、fHbpID14、fHbpID15的至少85％的氨基酸序列同一性，其中所述fHbp对人H因子(fH)的亲和性低于fHbpID1；以及
b)药学上可接受的辅料。


6.一种核酸，所述核酸编码根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·T·伯尼克，D·M·格拉诺夫，R·帕乔菲特，
申请(专利权)人：奥克兰儿童医院及研究中心，
类型：发明
国别省市：美国;US