一种对映‑6,7‑螺断贝壳杉烯型二萜化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种对映‑6,7‑螺断贝壳杉烯型二萜化合物和相应的制备方法，以及其与异构体的应用，具体是从香茶菜属植物冬凌草Rabdosia rubescens中提取分离得到，称之为6‑表‑11‑O‑乙酰基狭叶香茶菜素。研究证实，6‑表‑11‑O‑乙酰基狭叶香茶菜素与其异构体11‑O‑乙酰基狭叶香茶菜素具有明显的抗白血病和抗肺癌的活性。6‑表‑11‑O‑乙酰基狭叶香茶菜素经超导核磁共振波谱、高分辨质谱和傅立叶变换红外光谱等多种手段检测，确定其分子式为C

An olefinic two terpene compound and its preparation method and application of 6,7 Ying screw off.

The invention discloses a graphene type two terpene compounds and the corresponding preparation method of mapping 6,7 kauri snails, as well as its application and isomers, specifically isolated from Rabdosia rubescens and Rabdosia rubescens, called the 6 table 11 O acetyl angustifoline. The research confirmed that 6 table 11 O acetyl angustifoline and its isomer 11 O acetyl angustifoline has obvious anti leukemia and anti cancer activity. Table 6 11 O acetyl angustifoline by nuclear magnetic resonance spectroscopy, high-resolution mass spectrometry and Fu Liye transform infrared spectroscopy and other means of detection, to determine its molecular formula is C

【技术实现步骤摘要】
一种对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物及其制备方法，以及其与异构体的应用，属于药物化学的

技术介绍
唇形科香茶菜属植物全球约有150种，其中有我国产90种、21变种，资源丰富。冬凌草Rabdosiarubescens系唇形科香茶菜属，为多年生植物，植株高50-120cm，广泛分布在全国各地，包括河南、陕西、贵州、浙江等省。(中国植物志编委会.中国植物志[M].北京：科学出版社，1997，66：457.)作为中国药典收录的中草药，冬凌草具有清热解毒、活血止痛之功效，常用于咽喉肿痛、蛇虫咬伤等疾病的治疗。此外，冬凌草的使用具有地域特色：在河南地区，主要用于治疗炎症疾病和癌症；在贵州省凤岗县，则用于治疗感冒头痛和关节痛。(中国植物志编委会.中国植物志[M].北京：科学出版社，1997，66：457.；中国药典委员会.中国药典[M].北京：中国医药科技出版社，2015，一部：115.)迄今为止，对冬凌草的化学成分进行了大量的研究，并发现其含有丰富的二萜，且其中的对映-贝壳杉烷型和对映-贝壳杉烯型二萜被发现具有抗肿瘤活性、细胞毒活性、抗菌和抗炎活性等，是冬凌草的主要有效成分。(BaiNS,HeK,ZhouZ,etal.ent-KauranediterpenoidsfromRabdosiarubescensandtheircytotoxiceffectsonhumancancercelllines[J].PlantaMedica,2010,76:140-145；XieRJ,YanFL,HaiGF,etal.TwonewditerpenoidsandotherconstituentsfromIsodonrubescens[J].Fitoterapia,2011,82:726-730；LiuX,XueYB,DongK,etal.Threenewent-kauranediterpenoidsfromIsodonrubescensandtheircytotoxicities[J].ChineseJNatMed,2012,10:464-470；莫艳珠，潘炉台，续梅等.Guidongnin抗炎、抑菌药理作用研究.贵州科学，1996,14(4):48-50.)同时，香茶菜属植物的化学成分受生态环境影响显著，不同的生态环境下的同种植物的次生代谢产物的结构差异颇大，结构类型多样化。(HuZ,ZhanR,DuX,etal.Cytotoxicent-kauranediterpenoidsfromIsodonhenryi[J].ChemPharmBull,2011,59:1562-1566.)因此，进一步研究开发该种植物，尤其是具有良好的抗肿瘤活性的对映-贝壳杉烷型和对映-贝壳杉烯型二萜类成分，具有重要的理论和实用价值。本专利技术所述的对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物为首次从冬凌草中分离提取得到，在现有技术中未有报道。实验证明此化合物及其C-6位的异构体具有明显的抗肺癌、抗白血病的活性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物(命名为：6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素)及其制备方法和，其与异构体的应用，所述化合物及其C-6位的异构体具有明显的抗肺癌、抗白血病的活性。本专利技术的技术方案：一种对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物，所述化合物化学名为对映-6α-甲氧基-11α-乙酰氧基-15-氧代-6,7-螺断-6,19-醚-7,20-内酯-16-贝壳杉烯，分子式为C23H30O7，化学结构式如下：前述对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物的制备方法为：(1)甲醇冷浸提取：取阴干的冬凌草枝叶，经粉碎后用甲醇冷浸提取，减压浓缩，得稀甲醇提取液；(2)浓缩稀甲醇提取液：将稀甲醇提取液减压浓缩得甲醇浸膏；(3)柱层析分离：将甲醇浸膏与硅胶拌样，转入层析柱，硅胶粒度200～300目，用石油醚-乙酸乙酯洗脱液洗脱，将洗脱液进行薄层检测，浓缩合并类似洗脱流分，静置，过滤，得粗品。(4)单体化合物的纯化：将粗品经半制备高效液相色谱分离，以甲醇-水洗脱液洗脱，反复收集同一保留时间的色谱峰，浓缩除去溶剂，即得。所述步骤(1)中，甲醇浓度为85％～95％，提取次数为2-4次，每次2-4日。具体地说，甲醇浓度为95％，提取次数为3次，每次3日。所述步骤(3)中，洗脱剂石油醚-乙酸乙酯的体积比为1：0、10：1、7：1、5：1或0：1。具体地说，洗脱剂石油醚-乙酸乙酯的体积比为10：1。所述步骤(3)中，类似洗脱流分是指主要斑点的Rf值为0.2-0.8的洗脱流分。具体地说，类似洗脱流分是指主要斑点的Rf值为0.4的洗脱流分。所述步骤(4)中，洗脱剂甲醇-水的体积比为95：5、85：15、80：20或75:25。具体地说，洗脱剂甲醇-水的体积比为85：15所述步骤(4)中，同一保留时间的色谱峰是指保留时间为14min的色谱峰。前述对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物及其C-6位异构体在制备抗肿瘤药物中的应用。前述对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物及其C-6位异构体在制备抗肺癌药物中的应用。前述对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物及其C-6位异构体在制备抗白血病药物中的应用。前述的对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物C-6位异构体的化学名为对映-6β-甲氧基-11α-乙酰氧基-15-氧代-6,7-螺断-6,19-醚-7,20-内酯-16-贝壳杉烯，分子式为C23H30O7，化学结构式如下：本专利技术从贵州省遵义市习水县产的冬凌草(Rabdosiarubescens)中首次提取分离得到的一种对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物，名为6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素。本专利技术产品经超导核磁共振波谱、高分辨质谱、傅立叶变换红外光谱等多种手段检测，确定6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素的分子式为C23H30O7，化学结构式为：产品6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素为白色固体，易溶于乙酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇等有机试剂。光学活性[α]20D-150.5°(c0.558，MeOH)；UV(MeOH)λmax268nm；IR(KBr)νmax1745,1690cm-1。我们对这个化合物及其C-6位的异构体测试了一系列的生物活性，包括抗癌、抗白血病。实验证明6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素及其C-6位异构体11-O-乙酰基狭叶香茶菜素在制备抗肺癌药物和抗白血病药物中的应用价值，二者对人肺癌细胞A549的IC50值分别为15.81M和9.89M，对人白血病细胞K562的IC50值分别为1.93M和0.59M。附图说明图1为低分辨质谱图，说明了6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素的分子量；图2为高分辨质谱图，说明了6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素的分子式；图3为核磁共振1H-NMR谱图，说明了6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素结构中氢的归属；图4为核磁共振13C-NMR谱图，说明了6-表-11-O-乙酰基狭叶香茶菜素结构中碳的归属；图5为本专利技术所述化合物的关键1H-1HCOSY(H-H)、HMBC和ROESY相关谱图；图6为本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对映‑6,7‑螺断贝壳杉烯型二萜化合物，其特征在于：所述化合物化学名为对映‑6α‑甲氧基‑11α‑乙酰氧基‑15‑氧代‑6,7‑螺断‑6,19‑醚‑7,20‑内酯‑16‑贝壳杉烯，分子式为C

【技术特征摘要】
1.一种对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物，其特征在于：所述化合物化学名为对映-6α-甲氧基-11α-乙酰氧基-15-氧代-6,7-螺断-6,19-醚-7,20-内酯-16-贝壳杉烯，分子式为C23H30O7，化学结构式如下：2.一种如权利要求1所述的对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物的制备方法，其特征在于：(1)甲醇冷浸提取：取阴干的冬凌草枝叶，经粉碎后用甲醇冷浸提取，减压浓缩，得稀甲醇提取液；(2)浓缩稀甲醇提取液：将稀甲醇提取液减压浓缩得甲醇浸膏；(3)柱层析分离：将甲醇浸膏与硅胶拌样，转入层析柱，硅胶粒度200～300目，用石油醚-乙酸乙酯洗脱液洗脱，将洗脱液进行薄层检测，浓缩合并类似洗脱流分，静置，过滤，得粗品。(4)单体化合物的纯化：将粗品经半制备高效液相色谱分离，以甲醇-水洗脱液洗脱，反复收集同一保留时间的色谱峰，浓缩除去溶剂，即得。3.如权利要求2所述的对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，甲醇浓度为85％～95％，提取次数为2-4次，每次2-4日。4.如权利要求2所述的对映-6,7-螺断贝壳杉烯型二萜化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，洗脱剂石油醚-乙酸乙酯的体积比为1：0、...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘炉台，张敬杰，罗国勇，
申请(专利权)人：贵阳中医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52