一种从海绵中提取的胆甾醇醋酸酯及制法制造技术

＊＊＊ 本发明专利技术涉及一种从海绵中提取获得胆甾醇醋酸酯的方法，该新化合物被命名为：２５（２９）－亚甲基－２６－甲基－２６－乙基胆甾醇醋酸酯（Ｒｈａｂｄａｓｔｅｒｏｌ ａｃｅｔａｔｅ）化学结构式为：该化合物是由南海海绵经提取、分离、硅胶柱层析和重结晶及乙酰化过程而制得，不但具有新的化学结构而且具有较强的降血压和抗心率失常的作用，因此有良好的开发应用前景。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从海绵中提取分离，并通过化学方法获得胆甾醇醋酸酯的方法。海绵是最原始的多细胞动物之一，种类繁多，分布极广，以海产为主。我国南海地处热带和亚热带，海洋生物物种极为丰富，特别是海绵，约占世界总数的一半，人们已从海绵生物中发现了许多结构独特的有机化合物如萜类、甾体、苷类、生物碱、多肽和聚醚类等，其中许多具有抗肿瘤、抗心血管病、抗菌和抗病毒等生理活性，不少化合物具有潜在的临床应用价值，特别是以这些化合物为模式经过化学结构的修饰，获得生理活性更强、毒性更低的有机化合物，更加引起关注。本专利技术所述的胆甾醇醋酸酯化学名称为25(29)-亚甲基-26-甲基-26-乙基胆甾醇醋酸酯(英文名称Rhabdasterol acetate)，该化合物结构式为 中国专利96122199.2所公开的胆甾醇在结构上的不同之处是增加一个乙酰基，减少一个氢原子，即原结构中氢原子被乙酰基所取代，该化合物的物理常数如下m.p.102～104℃；D20(CH2Cl2,C=9.76mg/ml,C=0.97)-44.6°；νmaxKBr(cm-1):3438,2937,2823,1731,1641,1463,1371,1332,1249,1135,1039,962,887,833；δ1H(CDCl3):5.38(1H,d,J=4.5Hz,6-H),4.70(2H,S,29-H),4.61(1H,m,3α-H),2.03(3H,S,-OCH3),1.02(3H,S,19-CH3),1.00(3H,d,J=6.95Hz,30-CH3),0.95(3H,d,J=6.64Hz,21-CH3),0.84(3H,t,J=7.40,28-CH3),0.69(3H,S,18-CH3)；δ13C(CDCl3):170.53(C=O),155.28(C25),139.65(C5),122.61(C6),107.08(C29),73.99(C3),56.68(C14),55.99(C17),50.80(C10),50.05(-OCH3),42.35(C4),41.70(C13),39.74(C26),38.12(C12),36.99(C1),36.59(C20),35.76(C22),34.63(C7),31.88(C8),31.88(C9),30.39(C23),28.28(C2),28.16(C24),27.77(C27).24.26(C16),21.38(C15),21.03(C11),19.79(C19),19.28(C30),18.72(C21),11.94(C28),11.84(C18)；m/z:408(15.4),394(61.7),296(100),147(54.62),145(60.33),81(71.6),69(54.6),55(71.4),43(77.6)。该化合物的提取、分离以及化学反应的方法包括如下过程晒干的南海海绵切碎后用95％工业乙醇浸泡，抽提三次，将抽提物减压除去乙醇获得浆状物，将浆状物分散于适量的蒸馏水中，以等量的乙酸乙酯萃取三次，萃取物经减压除去乙酸乙酯获得棕色浆状物，此浆状物经硅胶柱层析，以不同比例的石油醚-乙酸乙酯和丙酮进行梯度淋洗，获得五个不同极性的洗出液，经浓缩获得A,B,C,D,E五个组分，B组分再经硅胶柱层析获得粗产物。将此粗产物用丙酮-甲醇重结晶二次，获得无色针状晶体，在针状晶体中加入相应量的醋酸酐和吡啶，在25～85℃的温度下，搅拌反应1～3小时，反应完全后，经减压除去吡啶和多余的酸酐，再经柱层析获得白色固体物。本专利技术所述化合物的药理作用由中山大学药学系测试，初步药效学试验表明1．该化合物对正常大鼠的血压、心率有一定的作用，在4mg/kg药量下，降压率达4.1％，心率变化率为4.2％。2．该化合物对豚鼠右心房自律性有一定的影响，在终浓度0.06mg/ml下，收缩力最大反应为-4.3％。由上述的试验数据表明，本专利技术所述的化合物不但具有新的结构，而且对动物正常血压、心率失常现象有较强的影响，因此该化合物具有重要的理论价值和应用前景。实施例1．南海海绵Rhabdastrella sp.晒干(3.0kg)，切碎后用95％工业乙醇(5kg)于室温下抽提三次，合并抽提物并减压浓缩至浆状物，将浆状物均匀分散于500ml蒸馏水中，以乙酸乙酯(500ml)萃取三次，合并萃取物并减压浓缩得棕色浆状物71g。该浆状物经硅胶(200g，青岛海洋化工厂，硅胶H,10～40μ)柱层析(φ=3.6×48cm)，以500ml不同比例的乙酸乙酯-石油醚(10％,15％,20％,30％)和500ml30％丙酮-石油醚进行梯度淋洗，获得五个不同极性的洗出液，将其中15％的乙酸乙酯-石油醚组分经减压浓缩得固体物2.8g，再进行硅胶(120g，青岛海洋化工分厂，300～400目)柱层析(φ=2.4×48cm，洗脱剂15％乙酸乙酯-石油醚)，获得粗产物2.1g，将此粗产物用丙酮-甲醇在室温下进行二次重结晶，获得无色针状晶体350mg。经红外，质谱和核磁共振谱等数据确定此化合物为25(29)-亚甲基-26-甲基-26-乙基胆甾醇(1)。2．乙酰化作用 ①在25ml单口圆底烧瓶中加入113.0mg化合物(1),1.5ml醋酸酐，1.5ml吡啶。在室温密封体系下，磁搅拌反应3小时(通过TLC判断反应已完全)，减压除去溶剂和多余酸酐，再通过硅胶(10g,300～400目)柱层析(φ=1.2×43cm，洗脱剂2％乙酸乙酯-石油醚)获得化合物(2)103.2mg，以胆甾醇计算产率为83.2％。②在25ml单口圆底烧瓶中加入115.0mg化合物(1),1.5ml醋酸酐，1.5ml吡啶。控制温度在65℃下，装上氯化钙干燥管，磁搅拌反应1小时(通过TLC判断反应已完全)，减压除去吡啶和多余酸酐，再通过硅胶(10g,300～400目)柱层析(φ=1.2×43cm，洗脱剂2％乙酸乙酯-石油醚)获得化合物(2)112.0mg，产率为88.7％。经红外光谱，质谱和核磁共振谱等数据确定其化学结构为权利要求1．一种从海绵中提取的胆甾醇醋酸酯，其特征在于该化合物从南海海绵中用权利要求2中所述的方法提取分离并经化学反应获得，结构式如下化学名称25(29)-亚甲基-26-甲基-26-乙基胆甾醇醋酸酯，该化合物物理常数为m.p.102～104℃；D20(CH2Cl2,C=9.76mg/ml,C=0.97)-44.6°；νmaxKBr(cm-1):3438,2937,2823,1731,1641,1463,1371,1332,1249,1135,1039,962,887,833；δ1H(CDCl3):5.38(1H,d,J=4.5Hz,6-H),4.70(2H,S,29-H),4.61(1H,m,3α-H),2.03(3H,S,-OCH3),1.02(3H,S,19-CH3),1.00(3H,d,J=6.95Hz,30-CH3),0.95(3H,d,J=6.64Hz,21-CH3),0.84(3H,t,J=7.40,28-CH3),0.69(3H,S,18-CH3)；δ13C(CDCl3):170.53(C=O),155.28(C25),139.65(C5),12本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从海绵中提取的胆甾醇醋酸酯，其特征在于该化合物从南海海绵中用权利要求２中所述的方法提取分离并经化学反应获得，结构式如下：＊＊＊化学名称：２５（２９）－亚甲基－２６－甲基－２６－乙基胆甾醇醋酸酯，该化合物物理常数为：ｍ．ｐ．１０２ ～１０４℃；［α］↓［Ｄ］↑［２０］（ＣＨ↓［２］Ｃｌ↓［２］，Ｃ＝９．７６ｍｇ／ｍｌ，Ｃ＝０．９７）－４４．６°；ν↓［ｍａｘ］↑［ＫＢｒ］（ｃｍ↑［－１］）：３４３８，２９３７，２８２３，１７３１，１６４１，１４６３，１３７１，１３３２，１２４９，１１３５，１０３９，９６２，８８７，８３３；δ↑［１］Ｈ（ＣＤＣｌ↓［３］）∶５．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，６－Ｈ），４．７０（２Ｈ，Ｓ，２９－Ｈ），４．６１（１Ｈ，ｍ，３α－Ｈ），２．０３（３Ｈ，Ｓ，－ＯＣＨ↓［３］），１．０２（３Ｈ，Ｓ，１９－ＣＨ↓［３］），１．００（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９５Ｈｚ，３０－ＣＨ↓［３］），０．９５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６４Ｈｚ，２１－ＣＨ↓［３］），０．８４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４０，２８－ＣＨ↓［３］），０．６９（３Ｈ，Ｓ，１８－ＣＨ↓［３］）；δ↑［１３］Ｃ（ＣＤＣｌ↓［３］）∶１７０．５３（Ｃ＝Ｏ），１５５．２８（Ｃ↓［２５］），１３９．６５（Ｃ↓［５］），１２２．６１（Ｃ↓［６］），１０７．０８（Ｃ↓［２９］），７３．９９（Ｃ↓［３］），５６．６８（Ｃ↓［１４］），５５．９９（Ｃ↓［１７］），５０．８０（Ｃ↓［１０］），５０．０５（－ＯＣＨ↓［３］），４２．３５（Ｃ↓［４］），４１．７０（Ｃ↓［１３］），３９．７４（Ｃ↓［２６］），３８．１２（Ｃ↓［１２］），３６．９９（Ｃ↓［１］），３６．５９（Ｃ↓［２０］），３５．７６（Ｃ↓［２２］），３４．６３（Ｃ↓［７］），３１．８８（Ｃ↓［８］），３１．８８（Ｃ↓［９］），３０．３９（Ｃ↓［２３］），２８．２８（Ｃ↓［２］），２８．１６（Ｃ↓［２４］），２７．７７（Ｃ↓［２７］）．２４．２６（Ｃ↓［１６］），２１．３８（Ｃ↓［１５］），２１．０３（Ｃ↓［１１］），１９．７９（Ｃ↓［１９］），１９．２８（Ｃ↓［３０］），１８．７２（Ｃ↓［２１］），１１．９４（Ｃ↓［２８］），１１．８４（Ｃ↓［１８］）；ｍ／ｚ：４０８（１５．４），３９４（６１．７），２９６（１００），１４７（５４．６２），１４５（６０．３３），８１（７１．６），６９（５４．６）...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邓松之，章勤，肖定军，
申请(专利权)人：中国科学院广州化学研究所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]