本发明专利技术公开了一种人参皂苷Ｒｇ３对映体的模拟移动床色谱分离方法，本发明专利技术采用模拟移动床色谱系统，采用含十八烷基硅烷键合硅胶（Ｃ１８）固定相，流动相采用甲醇、水的混合物，从２０（Ｒ）－人参皂苷Ｒｇ３和２０（Ｓ）－人参皂苷Ｒｇ３的混合物中分离出高纯度的２０（Ｒ）－人参皂苷Ｒｇ３和２０（Ｓ）－人参皂苷Ｒｇ３。由于模拟移动床色谱分离为连续过程，因此本方法的生产自动化程度高，生产效率高，溶剂可以回收利用，整个分离过程不接触有毒溶剂。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及受性药物的拆分技术，特别地，涉及拆分20 (S)-和20 (R)-人参皂苷Rg3对映体的模拟移动床色谱分离方法。技术背景20(S)-人参皂苷Rg3其化学名称分别为3-0--达玛-24-烯-, 12 e， 20 (S)-三醇。20 (R)-人参皂苷 Rg3化学名称分别为3-0--达玛 -24-烯-30， 12 e， 20 (R)-三醇。二者为对映体，生物活性实验表明均具有 较强的抗癌活性，其中20 (R)-人参皂苷Rg3已经开发上市，药品名称为 "参一胶囊"，由吉林亚泰医药股份有限公司生产。20 (R)-人参皂苷Rg3抗癌机理主要是抑制肿瘤新生血管生成和抑制 肿瘤细胞的黏附作用，深受广大患者的青睐。而20 (S)-人参皂苷Rg3 也正在进行II期临床研究阶段，而且发现其具有抗病毒活性。因此拆分二者是十分有意义的。鞍山科技大学专利卡波前列素甲酯模拟移动床色谱分离方法。申请 号:00110348. 2本专利技术公开了一种卡波前列素甲酯的模拟移动床色谱分离 方法，解决了批处理方法存在的溶媒、填料消耗量大、纯度受到限制等问 题。而且改善了操作环境，提高了生产自动化水平。本专利技术的特征是采 用模拟移动床色谱系统，填料为反相硅胶，以甲醇、水的混合液为流动相。 原料经去杂预处理，进入模拟移动床色谱系统。模拟移动床色谱系统出来 的产品经过浓縮、重结晶等处理得到纯度为90%以上的合格产品。鞍山科技大学专利用模拟移动床色谱分离提取替考拉宁的方法。申请 号02132707.3，本专利技术采用模拟移动床色谱(简称SMBC)系统，取代现有的活性炭法精提方法。本专利技术与目前精提替考拉宁的活性炭法比较，效价由原来的829提高到900以上，纯度由95%提高到97%，收率由35%提高到 70%。另外模拟移动床过程是连续过程，活性炭方法是间歇的，因此模拟 移动床技术的引入提高了生产的自动化水平，生产效率，并使生产环境得 到极大的改善。目前未见到有关模拟移动床色谱拆分20 (S)和20 (R)-人参皂苷Rg3 对映体的报道，属首次发现。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种利用模拟移动床色谱拆分20(S)和20 (R)-人参皂苷Rg3对映体的技术方法。本专利技术为实现上述专利技术目的采用的技术方案如下 一种人参皂苷Rg3 对映体的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于，用含有十八垸基硅烷键 合硅胶为填充剂作固定相，用甲醇和水的混合物作流动相，用模拟移动床 色谱系统将20 (R)-人参皂苷Rg3和20 (S)-人参皂苷Rg3的混合物分 开。进一步地，包括以下步骤(1) 将20 (R)-人参皂苷Rg3和20 (S)-人参皂苷Rg3的混合物溶于流 动相，浓度为lmg/mL 200mg/mL。(2) 从模拟移动床色谱系统中分出20 (R)-人参皂苷Rg3和20 (S)-人 参皂苷Rg3溶液。(3) 分别浓縮、重结晶、过滤、干燥得到纯度高于90%的20 (R)-人参 皂苷Rg3和20 (S) -人参皂苷Rg3。本专利技术的有益效果本专利技术用模拟移动床色谱，将20 (R)-人参皂苷 Rg3和20 (S)-人参皂苷Rg3对映体分开，纯度达到90%以上。工艺简单，生产可工业化，产品稳定。流动相可回收，降低成本、减少污染，真正实 现了清洁生产。具体实施方式本专利技术可通过下面的实验例进一步说明。1. 采用模拟移动床色谱(简称SMBC)系统，该系统是众所周至的。样品溶 液和洗脱液分别从样品入口与洗脱液入口注入色谱系统，20 (R)-人参皂 苷Rg3和20 (S)-人参皂苷Rg3对映体分别从萃余液和萃取液两个出口流 出系统，操作温度20 6(TC。最佳的操作温度为25"C。2. 色谱柱填料以及流动相选择 填料为十八烷基硅烷键合硅胶，采用公知的方法制备，填料粒经20 60um，粒经越小，分离效果越好。最佳粒经为40 45 P m。流动相为甲醇和 水，体积比为30 70: 70 30。最佳体积比为83: 17。3. 分离步骤20 (R)-人参皂苷Rg3和20 (S)-人参皂苷Rg3混合物溶于流动相，浓 度为lmg/mL 200mg/mL。进样浓度增加有利于提高产率，但其浓度受人参 皂苷Rg3溶解度的限制。色谱系统由4 24根制备柱组成，柱子越多，分 离效果越好，但系统的非线性成度越高，最佳柱子数目为4 8个。样品溶 液和洗脱液分别从样品入口与洗脱液入口注入色谱系统，经过SMBC分离， 从萃取液出口可获得高纯度的20 (R)-人参皂苷Rg3溶液，从萃余液出口 则获得得高纯度的20 (S)-人参皂苷Rg3溶液。分别经浓縮、重结晶、过 滤、干燥等得到20 (R)-人参皂苷Rg3和20 (S)-人参皂苷Rg3纯品。4. 纯品检验流动相甲醇水(83: 17) 流速lml/min色谱柱4. 6X250mm， 5 u m， C18填料 检测器SPD-10AVP (日本)紫外检测器 检测波长为203nm 下面结合实施例进一步说明本专利技术 1.流动相的选择流动相中，甲醇和水的含量对分离20 (R)-人参皂苷Rg3和20 (S) -人参皂苷Rg3影响很大，进而影响模拟移动床色谱的分离效果。首先用 分析色谱柱(4.6X250mm)选择流动相。如表1， 20 (R)-人参皂苷Rg3 和20 (S)-人参皂苷Rg3分离度随着甲醇含量的减少而增加，但是保留时 间明显增加，同时系统的柱压也明显增加。表1流动相的选择<table>table see original document page 6</column></row><table>2. SMBC分离 以下列出两个分离实例。分离实例1 a.操作条件运行模式1-4-3 (8个色谱柱)流动相甲醇/水(70/30)进样浓度人参皂苷Rg3混合物浓度20mg/ml进样液流速UF=4ml/min洗脱液流速UE二40ml/min萃余液流速20ml/min萃取液流速24ml/min切换时间350S柱温20°Cb. 成品分析用十八烷基硅垸键合硅胶柱分析萃余液和萃取液组成。萃余液中20(R) -人参皂苷Rg3纯度为92. 5%;萃取液中20 (S)-人参皂苷Rg3纯度为 90. 3%。 分离实例2c. 操作条件运行模式1-4-3 (8个色谱柱)流动相甲醇/水(30/70)进样浓度人参皂苷Rg3混合物浓度10mg/ml进样液流速Ue5ml/min洗脱液流速UE=50ml/min萃余液流速30ml/min萃取液流速25ml/min 切换时间360S 柱温60°Cd. 成品分析用十八烷基硅烷键合硅胶柱分析萃余液和萃取液组成。萃余液中20(R) -人参皂苷Rg3纯度为93. 5%;萃取液中20 (S)-人参皂苷Rg3纯度为 91. 8%。 分离实例3e. 操作条件运行模式1-4-3 (8个色谱柱)流动相甲醇/水(50/50)进样浓度人参皂苷Rg3混合物浓度15mg/ml进样液流速UF=6ml/min洗脱液流速UE=49ml/min萃余液流速30ml Zmin萃取液流速25ml/min切换时间360S柱温4CTCf. 成品分析用十八烷基硅烷键合硅胶柱分析萃余液和萃取液组成。萃余液中20(R)-人参皂苷Rg3纯度为92. 5%;萃本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种人参皂苷Ｒｇ３对映体的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于，用含有十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂作固定相，用甲醇和水的混合物作流动相，用模拟移动床色谱系统将２０（Ｒ）－人参皂苷Ｒｇ３和２０（Ｓ）－人参皂苷Ｒｇ３的混合物分开。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李平亚，卢丹，卢爱萍，刘金平，杜秀娟，
申请(专利权)人：李平亚，
类型：发明
国别省市：82[中国|长春]
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