降低活体内氧化氮水平的方法及其可用的组合物技术

一种活体降低主体内氧化氮水平的方法，所说方法包括： 以有效量的含有至少一种二硫代氨基甲酸酯的氧化氮清除剂向所说的主体给药。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术的领域本专利技术涉及一种降低哺乳动物体内氧化氮水平的方法。特别地，一方面，本专利技术涉及一种通过以作为氧化氮的清除剂的二硫代氨基甲酸盐-金属配合物向遭受发炎和/或传染病痛苦的主体给药而降低哺乳动物体内氧化氮水平的方法，另一方面本专利技术涉及这里所公开的方法中所用的组合物和配方。本专利技术的技术背景氧化氮(·NO)是一种自由基细胞信使，具有多种生物功能，包括调节血管紧张度，调控大脑中的细胞通讯，以及通过非特异性免疫应答处死病原体(见例如Ignarro，L.J.，Ann.Rev.Toxicol30535-560(1990)；Moncada，S.，Acta.Physiol.Scand.145201-227(1992)；和Lowenstein andSnyder，Cell 70705-707(1992)。氧化氮是L-精氨酸的化学等价的胍基氮原子的五-电子酶催化氧化作用的产物，这种氧化作用受酶即氧化氮合成酶的催化。已经鉴定出两种主要类型的氧化氮合成酶组成型的氧化氮合成酶和诱导型的氧化氮合成酶。组成型的·NO合成酶存在于内皮中，其中·NO作为有效的血管扩张剂连续不断地以低浓度从内皮中产生以调节血压和血管紧张度；诱导型的·NO合成酶存在于多种细胞中，包括巨噬细胞，噬中性白细胞，白细胞，肝细胞，血管内皮细胞和平滑肌细胞。后面这种·NO合成酶受脂多糖(LPS)和细胞活素诱导，以高浓度产生·NO达好几天，在抗发炎和抗感染的非特异性免疫中起重要作用(Kilbourn和Griffith，J.Natl.CancerInst.，84827-831，(1992)；Moncada和Higga，N.Eng.J.Med.，3292002-2-12，(1993))。在严重感染的情况下，·NO和细胞活素的过量产生可导致威胁生命的低血压，多器官坏死和最终死亡(St.John和Dorinsky，Chest.103932-943(1993)。在血液中，内皮产生的·NO各向同性地沿各个方向扩散进入邻近的组织。当·NO扩散进入血管平滑肌时，它与催化cGMP产生的鸟苷酸环化酶结合，诱导血管扩张(见例如，Ignarro，L.J.，Supra；Moncada，S.，Supra；和Lowestein和Snyder，Supra)。另一方面，当·NO扩散进入血液循环时，它与血红细胞中的血红蛋白反应生成硝酸盐和高铁血红蛋白(Kelm和Schrader，Circ.Res.661561-1575(1990))。硝酸盐通过肾脏排泄而被消除，高铁血红蛋白被红细胞中的高铁血红蛋白还原酶催化转变，回到血红蛋白。因此，动物和人类的细胞活素诱导的休克和腐烂性休克中硝酸盐水平增加也就不足为奇了(见例如，Nava等，J.Cardiovasc.Pharmacol.20(Suppl.12)S132-134(1992)；Hibbs等.J.Clini.Invest.89867-877(1992)；和Evans等Circulatory Shock4177-81(1993)。已经证实，由LPS和细胞活素(如白介素-1(IL-1)，白介素-2(IL-2)，肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素)诱导产生的氧化氮的过量产生能导致全身性低血压(Kilbourn和Griffith，supra，Moncada和Higgs，supra)。研究了用抑制·NO的产生(通过抑制氧化氮合成酶)的试剂作为治疗由·NO的过量产生而导致的全身性低血压，例如，观察到NG-甲基-L-精氨酸(NMMA)-一种氧化氮生物合成路线的竞争性抑制剂(在静脉注射后)能够逆转动物体内LPS-诱导的低血压(Aisaka等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，60881-886(1989)；Rees等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，863375-3379，(1989))。然而，正如最近的许多报道中所述的那样，抑制·NO合成酶对主体是有害的。参见，例如Henderson等在Arch.Surg.1291271-1275(1994)，Hambrecht等在J.Leuk.Biol.52390-394(1992)，Luss等在Biochem.and Biophys.Res.Comm.204635-640(1994)，Robertson等在Arch.Surg.129149-156(1994)，Stat man等在J.Surg.Res.5793-98(1994)，和Minnard等在Arch.Surg.129142-148(1994)所报道的。因此，本领域还需要能够有效地治疗与·NO的过量产生有关的全身性低血压如腐烂性休克的方法。本专利技术的简要描述按照本专利技术，研制了用于降低活体的氧化氮水平的方法。与现有技术中所述的抑制方法(见前述的参考文献)相反，本专利技术采用一种清除方法，其中使过量产生的氧化氮结合到一种合适的氧化氮清除剂上，产生的配合物使得氧化氮无害并最终从主体的尿中排出。按照本专利技术，还研制了用于实现上述方法的组合物和配方。可望用于本专利技术方法的氧化氮清除剂为二硫代氨基甲酸盐-亚铁配合物，该配合物结合·NO，形成一个稳定的水溶性的具有特征性的三-线光谱(亚硝酰-铁配合物的标志)的二硫代氨基甲酸盐-铁-NO配合物，该光谱可以很容易地用电子顺磁(EPR)光谱仪在室温下检测到(见Komarov等在Biochem.Biophys.Res.Commun.，1951191-1198(1993)；Lai和Komarov在FEBSLett.，345120-124，(1994)中的报道)。这种在实际时间内检测体液中·NO的方法最近由Lai在这里通过参考文献引入的美国专利US5,358,703中作了描述。本专利技术涉及作为治疗遭受发炎和/或感染性疾病的主体的手段而用于降低活体的·NO水平的方法。以含有二硫代氨基甲酸盐的氧化氮清除剂向需要这样的治疗的主体给药，这些清除剂与活体产生的·NO作用，形成一个稳定的二硫代氨基甲酸盐-铁-NO配合物。虽然游离的·NO是一个有效的血管扩张剂，但是与二硫代氨基甲酸盐-铁-配合物螯合的·NO却不是。然后含NO的配合物通过肾脏过滤，在尿中浓缩，最后被主体排泄掉，因此降低了活体中·NO的水平。附图的简要说明附图说明图1说明·NO抑制剂对从家鼠尿中检测到的-配合物(MGD为N-甲基-D-葡萄糖胺二硫代氨基甲酸盐)的体外9.5-Ghz EPR光谱的影响。在NMMA(50mg/kg)(B)或地塞米松(3mg/kg)(C)的存在下，给家鼠皮下注射0.4mL-配合物，详细的试验步骤在实施例中加以描述。注射给药两个小时后，处死动物，采集尿样并转移到扁平石英池内，于22℃下进行EPR测量。-配合物的三线光谱用空心圆圈指示(○)，作为-配合物光谱的一部分的一条宽EPR线用箭头指示。图1A表示注射以上的-配合物时得到的结果。图1B表示注射-配合物和NMMA时得到的结果。图2表示注射了15N-精氨酸的家鼠尿中的-配合物和-配合物体外9.5-GhzEPR光谱。给小鼠注射0.4mL-配合物(326mg/Kg的MGD和34mg/Kg的FeSO4)和(A)10mg15N-精氨酸或(B)5mg15N-精氨酸。注射后两个小时，处死动物，把尿样转移本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赖青山，
申请(专利权)人：MCW研究基础公司，
类型：发明
国别省市：