一种四溴双酚A衍生物TBBPA‑MBPE半抗原合成方法及其用途技术

本发明专利技术提供了一种四溴双酚A衍生物TBBPA‑MBPE半抗原合成方法及其用途，合成步骤如下：(1)以TBBPA为原料与溴乙酸甲酯、烯丙基溴取代生成甲基‑2‑(4‑(2‑(4‑(烯丙氧基)‑3,5‑二溴苯基)丙‑2‑基)‑2,6‑二溴苯氧基)乙酸乙酯；(2)通过与氢氧化钠发生皂化反应，盐酸酸化，得到半抗原2‑(4‑(2‑(4‑(烯丙氧基)‑3,5‑二溴苯基)丙‑2‑基)‑2,6‑二溴苯氧基)乙酸；(3)通过与液溴发生加成反应，与Na2S2CO3发生淬灭反应，从而得到半抗原2‑(2,6‑二溴‑4‑(2‑(3,5‑二溴‑4‑(2,3‑二溴丙氧基)苯基)丙‑2‑基)苯氧基)乙酸。本发明专利技术经过反复试验成功的设计并合成了一种四溴双酚A衍生物TBBPA‑MBPE的半抗原，该方法简单、安全、可行。

A four tetrabromobisphenol A derivative TBBPA MBPE hapten synthesis method and its application

\u672c\u53d1\u660e\u63d0\u4f9b\u4e86\u4e00\u79cd\u56db\u6eb4\u53cc\u915aA\u884d\u751f\u7269TBBPA\u2011MBPE\u534a\u6297\u539f\u5408\u6210\u65b9\u6cd5\u53ca\u5176\u7528\u9014\uff0c\u5408\u6210\u6b65\u9aa4\u5982\u4e0b\uff1a(1)\u4ee5TBBPA\u4e3a\u539f\u6599\u4e0e\u6eb4\u4e59\u9178\u7532\u916f\u3001\u70ef\u4e19\u57fa\u6eb4\u53d6\u4ee3\u751f\u6210\u7532\u57fa\u20112\u2011(4\u2011(2\u2011(4\u2011(\u70ef\u4e19\u6c27\u57fa)\u20113,5\u2011\u4e8c\u6eb4\u82ef\u57fa)\u4e19\u20112\u2011\u57fa)\u20112,6\u2011\u4e8c\u6eb4\u82ef\u6c27\u57fa)\u4e59\u9178\u4e59\u916f\uff1b(2)\u901a\u8fc7\u4e0e\u6c22\u6c27\u5316\u94a0\u53d1\u751f\u7682\u5316\u53cd\u5e94\uff0c\u76d0\u9178\u9178\u5316\uff0c\u5f97\u5230\u534a\u6297\u539f2\u2011(4\u2011(2\u2011(4\u2011(\u70ef\u4e19\u6c27\u57fa)\u20113,5\u2011\u4e8c\u6eb4\u82ef\u57fa)\u4e19\u20112\u2011\u57fa)\u20112,6\u2011\u4e8c\u6eb4\u82ef\u6c27\u57fa)\u4e59\u9178\uff1b(3)\u901a\u8fc7\u4e0e\u6db2\u6eb4\u53d1\u751f\u52a0\u6210\u53cd\u5e94\uff0c\u4e0eNa2S2CO3\u53d1\u751f\u6dec\u706d\u53cd\u5e94\uff0c\u4ece\u800c\u5f97\u5230\u534a\u6297\u539f2\u2011(2,6\u2011\u4e8c\u6eb4\u20114\u2011(2\u2011(3,5\u2011\u4e8c\u6eb4\u20114\u2011(2,3\u2011\u4e8c\u6eb4\u4e19\u6c27\u57fa)\u82ef\u57fa)\u4e19\u20112\u2011\u57fa)\u82ef\u6c27\u57fa)\u4e59\u9178\u3002 The present invention after repeated tests and design successfully synthesized a hapten four tetrabromobisphenol A derivatives TBBPA MBPE, this method is simple, safe and feasible.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原
，尤其涉及一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原合成方法，指一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE其中一个苯环的侧链改造，使之具备耦合用羧基的合成方法，具体为一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原合成方法及其用途。
技术介绍
免疫分析是基于抗原、抗体特异性反应的一种分析方法，已广泛应用于食品与环境中小分子污染物的分析检测。该方法具有灵敏度高、方便快捷、高通量、低成本等优势。而建立此方法的前提是相应抗体的研制。小分子化合物因其分子量小，缺乏免疫原性，在免疫动物时，很难诱导产生特异性细胞及体液免疫反应。为此，需要将小分子物质与大分子载体蛋白偶联，使其成为完全抗原。小分子化合物的抗体，是通过半抗原作为抗原决定簇免疫动物而获得，所以设计并合成合理的半抗原是制备亲和性好、灵敏度高的抗体的关键。其原则是设计合成与待测物结构类似的半抗原，并尽量保持与待测物共有的结构作为母核。对于半抗原结构的选择，如果待测物本身含有-NH2，-COOH，-OH，-SH等功能基团，可直接活化后联入载体蛋白，便可合成人工完全抗原。但大部分待测物分子并不含有功能基团，或功能基团对待测物的特异性和极性影响较大，因此，需要对小分子化合物进行结构改造，使其具有能共价结合到载体蛋白上的一种功能基团(如氨基、羧基、羟基和巯基等)。半抗原合成后，以核磁共振、质谱、红外光谱等技术对其进行结构鉴定，可判定其是否合成成功。
技术实现思路
本专利技术目的是克服现有技术的不足之处，以TBBPA为原料，通过取代、皂化、酸化、加成等四步反应合成半抗原方法，以利于后期制备出对四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE反应型阻燃剂特异性强亲和力高的抗体。本专利技术是通过如下技术方案实现的：一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原合成方法，步骤如下：(1)以TBBPA为原料与溴乙酸甲酯、烯丙基溴取代生成甲基-2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸乙酯(a)；(2)通过与氢氧化钠发生皂化反应，盐酸酸化，得到半抗原2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸(b)；(3)通过与液溴发生加成反应，与Na2S2CO3发生淬灭反应，从而得到半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2,3-二溴丙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸(M4)。工艺过程如下：一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原合成方法，具体步骤如下：步骤1、以TBBPA为原料与溴乙酸甲酯、烯丙基溴取代生成甲基-2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸乙酯；在溶有TBBPA的DMF中加入K2CO3，逐滴加入溴乙酸甲酯，持续搅拌；在反应液中逐滴加入烯丙基溴进行反应；反应完毕后，用水洗涤产物，用乙酸乙酯提取有机相，浓缩，纯化得化合物甲基-2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸乙酯；步骤2、通过与氢氧化钠发生皂化反应，盐酸酸化，得到半抗原2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸；在甲基-2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸乙酯中加入16mL体积比为1:1的甲醇/水混合溶剂、NaOH(360mg)，进行反应2h，加入HCl调pH至酸性，用二氯甲烷(DCM)提取产物3次，浓缩，纯化得到产物半抗原2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸；步骤3、通过液溴发生加成反应，与Na2S2CO3发生淬灭反应，从而得到半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2,3-二溴丙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸；在半抗原2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸中加入二氯甲烷，反应，加入过量Na2S2CO3淬灭反应，浓缩，纯化得到产物四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原。步骤1中，所使用的TBBPA、DMF、K2CO3、溴乙酸甲酯、烯丙基溴的用量比为3.24g：10mL：2.4g：918mg：0.242g；加入溴乙酸甲酯时，温度为100℃；持续搅拌的时间为12h；加入烯丙基溴后反应的时间为4h，用乙酸乙酯提取有机相的次数为3次。步骤2中，甲基-2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸乙酯、甲醇/水混合溶剂、NaOH的用量比为1.2g：16mL：360mg；所述反应时间为2h；所使用的盐酸浓度为1mol/L，pH为4～5；用二氯甲烷提取产物的次数为3次。步骤3中，所使用的半抗原2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸、二氯甲烷的用量比为1.02g：5mL，所述反应时间为15min。所述四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2,3-二溴丙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸用于制备四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE人工免疫抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2,3-二溴丙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸-BSA。有益效果：本专利技术的有益效果：本专利技术经过反复试验成功的设计并合成了一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE的半抗原，是一种新型的四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原的合成方法，该方法不仅简单、安全、可行，而且所得半抗原能与载体蛋白成功结合得到四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE的人工抗原，使用该免疫原免疫动物，获得了能特异性识别四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE的单克隆和多克隆抗体，抗体效价高，特异性强，可广泛用于四溴双酚A的免疫分析研究。附图说明图1是本专利技术实施例提供的产物四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原核磁共振氢谱图(图A)和质谱图(图B)。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。(1)以TBBPA为原料与溴乙酸甲酯、烯丙基溴取代生成甲基-2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸乙酯(a)；在10ml溶有TBBPA(3.24g)的DMF中加入K2CO3(2.4g)，于100℃下逐滴加入溴乙酸甲酯(918mg)，持续搅拌12h。在反应液中逐滴加入烯丙基溴(0.242g，0.002mol)反应4h。用水洗涤，用20mL乙酸乙酯提取有机相3次，浓缩，纯化得化合物a，产率31％。(2)通过与氢氧化钠发生皂化反应，盐酸酸化，得到半抗原2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸(b)；在1.2ga中加入16mL甲醇和水(1:1)的混合溶剂，NaOH(360mg)，反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种四溴双酚A衍生物TBBPA‑MBPE半抗原合成方法，其特征在于，具体步骤如下：步骤1、在溶有TBBPA的DMF中加入K2CO3，逐滴加入溴乙酸甲酯，持续搅拌；在反应液中逐滴加入烯丙基溴进行反应；反应完毕后，用水洗涤产物，用乙酸乙酯提取有机相，浓缩，纯化得化合物甲基‑2‑(4‑(2‑(4‑(烯丙氧基)‑3,5‑二溴苯基)丙‑2‑基)‑2,6‑二溴苯氧基)乙酸乙酯；步骤2、在甲基‑2‑(4‑(2‑(4‑(烯丙氧基)‑3,5‑二溴苯基)丙‑2‑基)‑2,6‑二溴苯氧基)乙酸乙酯中加入16mL体积比为1:1的甲醇/水混合溶剂、NaOH(360mg)，进行反应2h，加入HCl调pH至酸性，用二氯甲烷提取产物3次，浓缩，纯化得到产物半抗原2‑(4‑(2‑(4‑(烯丙氧基)‑3,5‑二溴苯基)丙‑2‑基)‑2,6‑二溴苯氧基)乙酸；步骤3、在半抗原2‑(4‑(2‑(4‑(烯丙氧基)‑3,5‑二溴苯基)丙‑2‑基)‑2,6‑二溴苯氧基)乙酸中加入二氯甲烷，反应，加入过量Na2S2CO3淬灭反应，浓缩，纯化得到产物四溴双酚A衍生物TBBPA‑MBPE半抗原。

【技术特征摘要】
1.一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原合成方法，其特征在于，具体步骤如下：步骤1、在溶有TBBPA的DMF中加入K2CO3，逐滴加入溴乙酸甲酯，持续搅拌；在反应液中逐滴加入烯丙基溴进行反应；反应完毕后，用水洗涤产物，用乙酸乙酯提取有机相，浓缩，纯化得化合物甲基-2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸乙酯；步骤2、在甲基-2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸乙酯中加入16mL体积比为1:1的甲醇/水混合溶剂、NaOH(360mg)，进行反应2h，加入HCl调pH至酸性，用二氯甲烷提取产物3次，浓缩，纯化得到产物半抗原2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸；步骤3、在半抗原2-(4-(2-(4-(烯丙氧基)-3,5-二溴苯基)丙-2-基)-2,6-二溴苯氧基)乙酸中加入二氯甲烷，反应，加入过量Na2S2CO3淬灭反应，浓缩，纯化得到产物四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原。2.根据权利要求1所述的一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MBPE半抗原合成方法，其特征在于，步骤1中，所使用的TBBPA、DMF、K2CO3、溴乙酸甲酯、烯丙基溴的用量比为3.24g：10mL：2.4g：918mg：0.242g；加入溴乙酸甲酯时，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张祯，梁亚如，曾昆，吴向阳，张萌，黄梦璐，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32