一种修复畜禽消化道损伤的多肽、其生产方法及应用技术

本申请公开了一种修复畜禽消化道损伤的多肽、其合成方法及其在饲料方面的应用。该多肽具有修复消化道损伤的功能，属于一种修复肽，用于畜禽养殖，可以提高禽类的免疫机能与抗病力，提高鸡产蛋率和繁殖性能，延长产蛋时间。此外，修复多肽可替代部分抗生素药物，解决大量使用抗生素导致动物肠道菌群失衡、致病菌产生耐药性以及畜牧产品中抗生素药物残留等诸多问题，显著提高养殖业的经济效益。本申请公开的合成上述多肽的方法，操作简单、成本低、产品纯度高。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及一种多肽、其合成方法及应用，属于生物领域。
技术介绍
获得健康、无药残的肉食品及较高的产蛋率，对于畜禽养殖业至关重要，以此才能得到高的经济回报。然而如果养殖的禽类患了传染性疾病，会使产蛋量等经济指标突然下降，而且多数情况下，治愈后也很难恢复到原来的水平。其中，当爆发新城疫时，会使鸡产蛋率从90％下降到20％～40％，鸡群感染禽流感时会在3～5天内从产蛋高峰下降到10％以下。患病鸡在产蛋期间如服用过量金刚烷胺、磺胺类、红霉素、链霉素等药物，不但会使产蛋水平下降而且会有药物残留问题。随着生活水平逐步提高，人们对畜产品的需求量越来越大，对食品质量安全要求也越来越高。产蛋水平降低、药物残留等问题势必会影响经济收益。没有药物残留问题的情况下，增加鸡产蛋率、降低鸡群发病率、降低肉料比是亟待解决的问题。
技术实现思路
根据本申请的一个方面，提供了一种多肽，该多肽具有修复消化道损伤的功能，尤其具有修复畜禽消化道损伤的功能，属于一种修复肽。在畜禽类养殖中使用该多肽，可以增加产蛋率、降低发病率、降低肉料比，显著提高养殖业的经济效益。所述多肽为，如下(A)或(B)的多肽：(A)氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly的多肽；(B)在(A)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有修复消化道损伤功能的由(A)衍生的多肽。本申请中，所述“修复消化道损伤的功能”，是指保持消化道的健康状态、以及在消化道受损的情况下促进消化道恢复健康状态。所述多肽可以通过调节体内与消化道受损及修复相关因子的平衡，缓解外界不利因素对机体的危害。既而发挥修复消化道损伤的功能。作为一个优选地实施方式，所述多肽为下列多肽中的任意一种：多肽I：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；多肽II：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；多肽III：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；多肽IV：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。根据本申请的又一方面，提供了合成上述多肽的方法，该方法合成的多肽具有修复消化道损伤的功能，尤其具有修复畜禽类消化道损伤的功能。该方法合成的多肽产品纯度高、成本低，显著提高经济效益。所述合成上述多肽的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：(1)氨基酸-树脂交联：根据目标多肽的氨基酸序列，将C端第一位的氨基保护的氨基酸与树脂混合，在交联催化剂的存在下，得到惰性交联产物；(2)氨基酸N端去保护：将步骤(1)中得到的惰性交联产物与去保护剂混合，得到活性交联产物；(3)氨基酸缩合反应：将步骤(2)中得到的活性交联产物与氨基酸序列中C端下一位的氨基保护的氨基酸混合，在缩合催化剂的存在下，进行氨基酸的缩合反应；(4)根据多肽固相合成法，按照目标多肽的氨基酸序列，重复步骤(2)的去保护和步骤(3)的氨基酸缩合反应，自C端向N端依次将目标多肽的氨基酸序列上的氨基酸同树脂上的多肽缩合，直至形成目标多肽的氨基酸序列，得到目标多肽-树脂交联产物；(5)目标多肽与树脂分离：将步骤(4)得到的目标多肽-树脂交联产物与切割剂混合，使目标多肽与树脂分离，经纯化，得到目标多肽；所述目标多肽的氨基酸序列选自以下氨基酸序列中的一种：序列I：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；序列II：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；序列III：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；序列IV：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。根据本申请的又一方面，提供了一种分支多肽，该分支多肽具有修复消化道损伤的功能，尤其具有修复畜禽类消化道损伤的功能，在畜禽类养殖中使用该分支多肽，可以增加产蛋率、降低发病率、降低肉料比，显著提高养殖业的经济效益。所述分支多肽，其特征在于，至少一个分支的氨基酸序列包含序列I～序列IV中的一种。优选地，所述分支多肽中的每一个分支的氨基酸序列分别由序列I～序列IV中的一种构成。进一步优选地，所述分支多肽中的每一个分支的氨基酸序列均相同，且与序列I～序列IV中的任意一个序列相同。所述序列I～序列IV的氨基酸序列如下：序列I：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；序列II：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；序列III：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；序列IV：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。更进一步优选地，所述分支多肽中的每一个分支的氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly。本申请中，“分支多肽”，是指由赖氨酸骨架构成的具有树形分支结构的多肽。作为一个优选地实施方式，所述分支多肽的结构式如式I、式II或式III所示：其中，式I、式II、式III中所述肽链的氨基酸序列选自以下氨基酸序列中的一种：序列I：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；序列II：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；序列III：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；序列IV：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。根据本申请的又一个方面，提供了一种合成上述分支多肽的方法，该方法合成的分支多肽具有修复消化道损伤的功能，尤其具有修复畜禽类消化道损伤的功能。该方法合成的多肽产品纯度高、成本低，显著提高经济效益。所述合成上述分支多肽的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：(a)建立分支多肽骨架：将氨基保护的赖氨酸与树脂进行反应，在交联催化剂的存在下，得到惰性赖氨酸交联产物I；将得到的惰性赖氨酸交联产物I与去保护剂混合，得到具有二分支骨架的活性赖氨酸交联产物I；或者，将氨基保护的赖氨酸与树脂进行反应，在交联催化剂的存在下，得到惰性赖氨酸交联产物I；将得到的惰性赖氨酸交本文档来自技高网...

【技术保护点】
如下(A)或(B)的多肽：(A)氨基酸序列为Gly‑Leu‑Pro‑Gly‑Glu‑Ala‑Lys‑Val‑Gly的多肽；(B)在(A)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有修复消化道损伤功能的由(A)衍生的多肽。

【技术特征摘要】
1.如下(A)或(B)的多肽：
(A)氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly的多肽；
(B)在(A)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有修复消化道
损伤功能的由(A)衍生的多肽。
2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽为下列多肽中的任意一种：
多肽I：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；
多肽II：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；
多肽III：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；
多肽IV：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。
3.一种分支多肽，其特征在于，所述分支多肽的结构式如式I、式II或式III所示：
其中，式I、式II、式III中所述肽链的氨基酸序列选自以下氨基酸序列中的一种：
序列I：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；
序列II：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；
序列III：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；
序列IV：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。
4.一种合成权利要求1或2所述多肽的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：
(1)氨基酸-树脂交联：根据目标多肽的氨基酸序列，将C端第一位的氨基保护的氨基酸
与树脂混合，在交联催化剂的存在下，得到惰性交联产物；
(2)氨基酸N端去保护：将步骤(1)中得到的惰性交联产物与去保护剂混合，得到活性交
联产物；
(3)氨基酸缩合反应：将步骤(2)中得到的活性交联产物与氨基酸序列中C端下一位的
氨基保护的氨基酸混合，在缩合催化剂的存在下，进行氨基酸的缩合反应；
(4)根据多肽固相合成法，按照目标多肽的氨基酸序列，重复步骤(2)的去保护和步骤
(3)的氨基酸缩合反应，自C端向N端依次将目标多肽的氨基酸序列上的氨基酸同树脂上的
多肽缩合，直至形成目标多肽的氨基酸序列，得到目标多肽-树脂交联产物；
(5)目标多肽与树脂分离：将步骤(4)得到的目标多肽-树脂交联产物与切割剂混合，使
目标多肽与树脂分离，经纯化，得到目标多肽；
所述目标多肽的氨基酸序列选自以下氨基酸序列中的一种：
序列I：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；
序列II：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；
序列III：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；
序列IV：氨基酸序列为Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。
5.一种合成权利要求3所述分支多肽的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：
(a)建立分支多肽骨架：将氨基保护的赖氨酸与树脂进行反应，在交联催化剂的存在
下，得到惰性赖氨酸交联产物I；将得到的惰性赖氨酸交联产物I与去保护剂混合，得到具有
二分支骨架的活性赖氨酸交联产物I；或者，
将氨基保护的赖氨酸与树脂进行反应，在交联催化剂的存在下，得到惰性赖氨酸交联
产物I；将得到的惰性赖氨酸交联产物I与去保护剂混合，得到具有二分支骨架的活性赖氨
酸交联产物I；将氨基保护的赖氨酸与所述活性赖氨酸交联产物I进行反应，在缩合催化剂
的存在下，得到惰性赖氨酸交联产物II；将得到的惰性赖氨酸交联产物II与去保护剂混合，
得到具有四分支骨架的活性赖氨酸交联产物II；或者，
将氨基保护的赖氨酸与树脂进行反应，在交联催化剂的存在下，得到惰性赖氨酸交联...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕志成，杨赛，鲍隆，王长波，
申请(专利权)人：山东深海生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37