一种小肽螯合锌及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种小肽螯合锌及其制备方法与应用。本发明专利技术通过将杂鱼粉碎，加水，调节pH至5～9，加热升温至50～70℃，再添加蛋白酶酶解，酶解至水解度为30％，加热灭酶，离心，用10kDa超滤膜超滤，取透过液；透过液用1kDa超滤膜超滤，取非透过液；在非透过液中加入无机锌盐，在温度40～60℃，pH值＝5～7的条件搅拌振荡，至螯合率为70％±5％，离心，浓缩，冷冻干燥，得小肽螯合锌。该小肽螯合锌不仅提高仔猪对于蛋白和微量元素的消化吸收，增强小猪免疫力；而且也具有良好的抗氧化剂及抑菌功能，添加到饲料中，能有效延长饲料保质期，降低因饲料变质引发的仔猪腹泻及免疫力下降等风险。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于饲料添加剂领域，特别涉及一种小肽螯合锌及其制备方法与应用。
技术介绍
海洋低值杂鱼由于易腐烂、加工价值低，渔民对此类鱼缺乏积极性，使得这一大类鱼种自生自灭，造成自然资源的极大浪费。但海洋低值小杂鱼富含丰富的蛋白，可以通过批量酶解，与微量元素螯合制备具有防霉抗氧化的饲料添加剂，以提高杂鱼的高值化加工水平，避免杂鱼腐烂变质给环境带来的危害。锌是动物必须的微量元素之一，一直被比喻为动物的“生命元素”，锌是动物机体中200多种金属酶类、激素和胰岛素的组成部分，能促进机体的生长发育和组织再生，维持机体的正常代谢，促进食欲，维持性器官和性机能的正常，加速创口愈合，保护皮肤健康，增强免疫机制，提高抵抗力等方面具有重大营养价值。缺锌会引起猪食欲降低，消化性能削弱，腹泻，贫血，成长发育停止等症状。常规补锌的方法是在日粮中掺加硫酸锌、碳酸锌、氧化锌，但它们易吸潮、生物利用率低、口感不适等缺点，且服用后副作用较多，容易导致一系列不良反应如恶心、呕吐、甚至胃部出血。目前越来越多的研究认为，以氨基酸螯合锌和多肽螯合锌为补锌剂作为第三代锌补产品，这种螯合锌的吸收是通过氨基酸或小肽吸收途径，具有易吸收、向体外排泄率低、稳定性好、毒性小、生物利用率高等优点。仔猪由于胃肠消化道功能不健全，对蛋白、微量元素等营养成分消化吸收能力有限，如果饲喂不当，易引发腹泻，免疫力降低等症状。目前，关于不同分子量小肽在不同螯合率情况下对仔猪生长及饲料保质期影响的研究国内外少有报道。
技术实现思路
本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种小肽螯合锌的制备方法。本专利技术的另一目的在于提供通过所述制备方法得到的小肽螯合锌。本专利技术的又一目的在于提供所述小肽螯合锌在仔猪饲料添加剂中的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种小肽螯合锌的制备方法，包括以下步骤：(1)粉碎杂鱼，按料液比(质量)1:3～5加水，调节pH至5～9，加热升温至50～70℃，添加蛋白酶酶解，酶解至水解度为30％，加热灭酶，离心，用10kDa超滤膜超滤，取透过液；透过液用1kDa超滤膜超滤，取非透过液；(2)在步骤(1)制得的非透过液中加入无机锌盐，在温度40～60℃，pH值＝5～7的条件下搅拌至螯合率为(60～80)％±5％，离心，浓缩，冷冻干燥，得小肽螯合锌。步骤(1)中所述的pH优选为5～7。步骤(1)中所述的蛋白酶优选为中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或两种以上；蛋白酶为两种时，优选按复合比为1:1添加。所述的中性蛋白酶优选为酶活力是30万U/g的中性蛋白酶。所述的风味蛋白酶优选为酶活力是1.5万U/g的风味蛋白酶。所述的木瓜蛋白酶优选为酶活力是10万U/g的木瓜蛋白酶。步骤(1)中所述的蛋白酶的加酶量优选为相当于杂鱼质量的0.1％～0.5％。步骤(1)中所述的加热灭酶的条件优选为在100℃加热20min。步骤(1)中所述的离心的条件优选为6000rpm离心15min。步骤(2)中所述的无机锌盐优选为硫酸锌、氯化锌和醋酸锌中的一种或两种以上。步骤(2)中所述的无机锌盐优选按α-氨基态氮与锌离子的摩尔比1～5:1添加。步骤(2)中所述的螯合率优选为70％±5％。步骤(2)中所述的离心的条件优选为8000rpm下离心10min。所述的小肽螯合锌的分子量＞1kDa、且≤10kDa。一种小肽螯合锌，通过上述小肽螯合锌的制备方法得到。所述的小肽螯合锌特别适合于作为仔猪饲料添加剂；应用时，小肽螯合锌的添加量优选为相当于仔猪饲料质量的0.3％。一种具有促生长的仔猪饲料，含有上述小肽螯合锌。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果:本专利技术利用海洋低值小杂鱼酶解小肽(介于1～10kDa)螯合锌作为仔猪饲料添加剂，经优化、纯化后得到不同螯合率的螯合态锌，一方面提高仔猪对于蛋白和微量元素的消化吸收，增强小猪免疫力；另一方面利用螯合肽锌的抗氧化剂及抑菌功能，来有效延长猪饲料保质期，降低因饲料变质引发的仔猪腹泻及免疫力下降等风险。1.本专利技术方法制备的仔猪饲料添加剂，具有海洋蛋白小肽分子及微量元素锌，分子量介于1～10kDa，螯合率控制在70％(±5％)，更易于仔猪消化吸收，能有效增强仔猪的免疫能力。2.本专利技术所得仔猪饲料添加剂以小肽为主，在水中溶解迅速，稳定性好。3.本专利技术的小肽螯合锌作为饲料添加剂，既为仔猪提供易消化吸收的蛋白和微量元素，也具有抗氧化、抑制菌生长的功能，能有效延长猪饲料保质期，且无任何副作用。所述的小肽螯合锌加入到饲料后40天饲料的菌落总数≤26×104(个/g)4.本专利技术以小杂鱼作为蛋白原料，实现海洋低值杂鱼的高值化加工，提高其利用价值的同时，也降低了其腐烂变质对环境的危害。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。实施例1(1)取杂鱼2000g为蛋白原料，将杂鱼用绞肉机粉碎，按料液比(质量)1:3添加去离子水，pH值调至5，加热升温至50℃，添加木瓜蛋白酶、风味蛋白酶(木瓜蛋白酶10万U/g，风味蛋白酶1.5万U/g，复合比1:1，加酶量相当于杂鱼质量0.5％，南宁庞博生物工程有限公司)酶解至水解度为30％(檀志芬等，蛋白质水解度的测定方法.分析检测，2005)，在100℃温度下灭酶20min，转速6000rpm离心15min，先用10kDa超滤膜超滤，将获得的透过液再用1kDa超滤，非透过液体为分子量介于1～10kDa之间的杂鱼蛋白酶解液(命名为A超滤蛋白酶解液)，透过液体为分子量小于1kDa的杂鱼蛋白酶解液(命名为B超滤蛋白酶解液)。(2)分别取步骤(1)制得的A和B超滤蛋白酶解液各1000mL，分别通过甲醛滴定法测定α-氨基态氮，按α-氨基态氮与锌离子的摩尔比5:1添加硫酸锌，温度60℃，pH值调至7，搅拌螯合20min，转速8000rpm离心10min，通过EDTA络合滴定法测螯合率，60℃旋转蒸发浓缩至原有体积的1/3，冷冻干燥，得到螯合率为60％(±5％)的小肽螯合锌，其中使用分子量≤1kDa的杂鱼蛋白酶解液得到的小肽螯合锌记为1号，使用分子量介于1～10kDa之间的杂鱼蛋白酶解液得到的小肽螯合锌记为2号。实施例2(1)取杂鱼2000g为蛋白原料，将杂鱼用绞肉机粉碎，按料液比(质量)1:4添加去离子水，pH值调至6，加热升温至60℃，添加中性蛋白酶、风味蛋白酶(中性蛋白酶30万U/g，风味蛋白酶1.5万U/g，复合比1:1，加酶量相当于杂鱼质量0.3％，南宁庞博生物工程有限公司)酶解至水解度为30％(檀志芬等，2005)，在100℃温度下灭酶20min，转速6000rpm离心15min，先用10kDa超滤膜超滤，再用1kDa超滤，将获得的透过液再用1kDa超滤，非透过液体为分子量介于1～10kDa之间的杂鱼蛋白酶解液(命名为A超滤蛋白酶解液)，透过液体为分子量小于1kDa的杂鱼蛋白酶解液(命名为B超滤蛋白酶解液)；(2)分别取步骤(1)制得的A和B超滤蛋白酶解液各1000mL，分别通过甲醛滴定法测定α-氨基态氮，按α-氨基态氮与锌离子的摩尔比3:1添加氯化锌，温度50℃，pH值调至6，搅拌螯合30min，转速8000rpm离心10min，通过EDTA络合滴定法测螯合率，60本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小肽螯合锌的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)粉碎杂鱼，按料液质量比1:3～5加水，调节pH至5～9，加热升温至50～70℃，添加蛋白酶酶解，酶解至水解度为30％，加热灭酶，离心，用10kDa超滤膜超滤，取透过液；透过液用1kDa超滤膜超滤，取非透过液；(2)在步骤(1)制得的非透过液中加入无机锌盐，在温度40～60℃，pH值＝5～7的条件下搅拌至螯合率为(60～80)％±5％，离心，浓缩，冷冻干燥，得小肽螯合锌。

【技术特征摘要】
1.一种小肽螯合锌的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)粉碎杂鱼，按料液质量比1:3～5加水，调节pH至5～9，加热升温至50～70℃，添加蛋白酶酶解，酶解至水解度为30％，加热灭酶，离心，用10kDa超滤膜超滤，取透过液；透过液用1kDa超滤膜超滤，取非透过液；(2)在步骤(1)制得的非透过液中加入无机锌盐，在温度40～60℃，pH值＝5～7的条件下搅拌至螯合率为(60～80)％±5％，离心，浓缩，冷冻干燥，得小肽螯合锌。2.根据权利要求1所述的小肽螯合锌的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的蛋白酶的加酶量为相当于杂鱼质量的0.1％～0.5％；步骤(2)中所述的无机锌盐按α-氨基态氮与锌离子的摩尔比1～5:1添加。3.根据权利要求1所述的小肽螯合锌的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的蛋白酶为中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或两种以上。4.根据权利要求3所述的小肽螯合锌的制备方法，其特征在于：所述的中性蛋白酶为酶活力是30万...

【专利技术属性】
技术研发人员：李同刚，陈志敏，李炯明，周盛昌，肖丽萍，施建成，吴有林，
申请(专利权)人：亚太星原农牧科技海安有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32