一种盐酸阿霉素磁性纳米粒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种盐酸阿霉素磁性纳米粒制备方法，步骤如下：(1)将纳米嵌段聚合物聚乙二醇‑聚乳酸溶解在二甲基甲酰胺中制成溶液A；(2)将盐酸阿霉素溶解在二甲基甲酰胺中制成溶液B；(3)向B溶液中加入三乙胺，将盐酸阿霉素去离子化超声溶解；(4)将四氧化三铁粉末溶解在四氢呋喃中超声制成溶液C；(5)在搅拌条件下，将去离子化的B溶液滴加到A溶液中；(6)搅拌使盐酸阿霉素和纳米嵌段混合均匀，有机溶剂挥发得载药纳米胶束；(7)将C溶液滴加到步骤(6)的载药纳米胶束中，搅拌均匀；(8)透析即得磁性载药纳米胶束；(9)向纳米胶束中加入冻干保护剂得磁性载药纳米粒。本发明专利技术方法操作步骤简单，易操作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种盐酸阿霉素磁性纳米粒及其制备方法。
技术介绍
盐酸阿霉素，是一种临床上常用的蒽环类抗恶性肿瘤药物，其作用机制主要为盐酸阿霉素可以嵌入RNA和DNA分子中，抑制核酸的合成，从而产生抗肿瘤的效果。盐酸阿霉素对机体可产生广泛的生物化学效应。盐酸阿霉素因其抗肿瘤谱长，活性强，疗效好，对不同生长周期的肿瘤细胞均有杀灭作用，因此，被广泛应用于治疗急性白血病、肉瘤、非何杰金氏淋巴瘤、多发性骨髓瘤、乳腺癌、卵巢癌和宫颈癌。盐酸阿霉素是在阿霉素表面增加HCL从而改变阿霉素的水溶性，但是其分子结构不稳定，易发生水解光解等变化，降低了其疗效。并且盐酸阿霉素经静脉注射后，毒副作用大，除了发生脱发，骨髓抑制及胃肠道毒性等不良反应外，还可引起严重的心脏毒性，这些毒副作用大大限制了盐酸阿霉素的开发及应用。为了降低盐酸阿霉素对机体产生的毒副作用，提高肿瘤组织中的药物含量，减少其他器官的摄入量，从而减少药物的使用量，提高抗肿瘤的效果。目前，主要有两种方式，一是化学修饰，二是物理包裹；其中，已经应用于临床的盐酸阿霉素是在阿霉素的基础上增加HCL提高其水溶性，但是不能再增加其肿瘤靶向物质，然而，物理包裹可以实现盐酸阿霉素的肿瘤靶向性，减少药物的毒副作用。纳米科技从20世纪90年代初兴起到现在经历了飞速的发展，取得了令人瞩目的成果。目前纳米技术已经广泛的应用于航空航天、生物医学、材料等多个领域。在医药领域方面，载药纳米载体的出现和发展，为靶向抗肿瘤药物的研制提供了新的途径。应用纳米载体包裹药物，由于纳米粒特殊的性质，可以使更多的药物聚集在肿瘤组织中，实现药物的肿瘤靶向性作用，而减少药物对其他组织的损害，从而较低药物产生的毒副作用。盐酸阿霉素被包裹入纳米载体系统中，其在体内的生物学分布将发生改变，其中与载药纳米载体的生物学分布密切相关。纳米载体通过循环系统进入血液后，大部分与血液中的蛋白调理素相结合，被网状内皮系统(RSE)所识别，最先被肝脏脾脏等器官所摄取，其在血液中的浓度下降，仅有少部分可以经过血液循环系统到达肿瘤组织中。研究表明由于肿瘤组织生长快，血供充足，其肿瘤组织中血管的通透性较正常血管高，同时肿瘤组织缺乏有效的淋巴引流，因此载药纳米载体对肿瘤组织具有增强的渗透性和滞留性效应(EPR效应)，从而达到对肿瘤组织的被动靶向及缓释作用。PH敏感性控释(物理化学靶向)肿瘤组织无氧酵解增加，肿瘤局部呈现酸性环境，使用PH敏感性的生物可降解材料制备的纳米载体，使纳米载体选择性的在肿瘤部位降解释放药物，而在正常组织中保持稳定，可实现肿瘤的靶向。聚乳酸可在肿瘤组织酸性环境中降解，释放药物，从而实现了纳米载体的物理化学靶向性。纳米载体在体内的代谢与纳米载体本身的性质与粒径、电荷、表面的化学修饰以及纳米的结构和组成等方面的因素有关。理想的纳米载体粒径应该保持在100nm左右，电位在10mV以内，并且在表面进行一定的化学修饰，进一步筛选肿瘤特异性或高表达的受体，抗原，将相应的配体或者是特异性的单克隆抗体与纳米载体通过物理或者化学键的方式相耦联，依靠靶向分子特异性识别肿瘤组织，从而提高对肿瘤组织的选择性，减少载药纳米载体在周围组织中的聚集，将实现对药物的主动靶向传递作用，使盐酸阿霉素纳米载体在肿瘤组织中的蓄积。目前常见的靶向分子主要是特异性或者是肿瘤组织高表达的单克隆抗体以及受体配基。但是大多数抗体局限在细胞膜上，无法实现药物的细胞内传递，同时容易引起体内的免疫排除反应，加上抗体价格高昂，使得抗体的应用受到了很大的限制。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种盐酸阿霉素磁性纳米粒的制备方法。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种盐酸阿霉素磁性纳米粒的制备方法，具体步骤如下:(1)将纳米嵌段聚合物聚乙二醇-聚乳酸溶解在二甲基甲酰胺中，制成溶液A；(2)将盐酸阿霉素溶解在二甲基甲酰胺中，制成溶液B；(3)向B溶液中加入三乙胺，将盐酸阿霉素去离子化，超声，溶解；(4)将四氧化三铁粉末溶解在四氢呋喃中，超声，制成溶液C；(5)在搅拌条件下，将去离子化的B溶液缓慢滴加到A溶液中；(6)在避光的条件下搅拌，使盐酸阿霉素和纳米嵌段混合均匀，有机溶剂挥发，得到载药纳米胶束；(7)将C溶液缓慢滴加到步骤(6)的载药纳米胶束中，搅拌均匀；(8)透析即得到磁性载药纳米胶束；(9)向透析好的纳米胶束中加入冻干保护剂质量分数为2.5％的F-68，得到磁性载药纳米粒；所述纳米嵌段聚合物：盐酸阿霉素：四氧化三铁粉末的质量比为2：1：1，所述盐酸阿霉素与三乙胺的用量比为10:20(mg：ul)。优选的：所述步骤(1)中聚乙二醇-聚乳酸的分子量为10000-13000，聚合物中乙二醇：乳酸单体的摩尔比例为(4-5):1。聚合物的分子量，以及聚合物中输水部分和亲水部分的质量的比例关系，会直接影响到聚合物的胶束形态，本专利技术通过对聚合物分子量以及对乙二醇和乳酸比例的优化，制备出的纳米粒形态均一呈球形，分散好。优选的：所述步骤(4)中，超声的功率为200W，超声的时间为30min。优点：该条件下超声可以使磁性颗粒有效的分散，减少磁性分子的团聚。优选的：所述步骤(5)、(6)中，搅拌采用磁力搅拌器搅拌，搅拌速度为500-1000r/min，搅拌时间为2h，优点：搅拌可以改变溶液中各成分浓度的分布，有利于各种成分的分散，搅拌速度较低时溶液不能充分的反应，纳米粒成形不好，容易产生厚膜，搅拌速度过高，纳米粒容易遭到破坏，所以适宜的搅拌速度可以是溶液中的成分相对均匀，形成的纳米粒大小均匀，粒径合适，本专利技术选用搅拌速度为500-1000rpm/min。搅拌时间与纳米粒的形态有关，搅拌时间过短，有机溶剂挥发不完全，纳米粒形态不规则，分子量较少。搅拌时间过长，纳米粒容易遭到破坏，不利于纳米粒工艺的生产。本专利技术选用搅拌时间为2h。优选的：所述步骤(5)中，滴加的速度为20-30滴/分钟，药物聚合物有机溶剂的滴加速度对胶束的形成产生重要的影响，滴加的速度过快，反应不完全，形成的胶束粒径大，粒度分布广，并且不稳定，常有一层厚膜。滴加速度过慢，会使纳米粒数量较少，生产周期延长。掌握好药物集合物有机溶液的滴加速度对保证制备胶束的工艺稳定性和产品性能有重要的影响。因此本专利技术通过不断的优化，筛选出最佳的滴速为20-30滴/分钟。优选的：所述步骤(7)中，溶液滴加的速度为20-30滴/分钟。滴加速度过快，磁性物质不能和载药纳米胶束充分的混合反应，降低磁性载药纳米粒的载药量和包封率，滴加过慢，则容易产生厚膜，并且周期较长，对纳米粒造成损害。优选的：所述步骤(8)中，透析袋的截留分子量为3500Kda，透析时间为72h。透析袋截留分子量高使得纳米粒透过透析袋进入到水中，制备的纳米粒量较少，透析截留分子量过低，没有反应的药物，纳米嵌段和磁性颗粒不易透过透析袋，所得的纳米粒不纯净。因此，本专利技术应用截留量为3500KDa的透析袋，既可以保证纳米粒的数量，又可以提高纳米粒的质量。优选的：所述步骤(9)中，纳米粒的冻干保护剂为质量分数为2.5％F-68。纳米粒冻干保护剂主要的作用为保护纳米粒结构的完整，防止纳米粒在冻干保存的过程中团聚，增加冻干后纳米粒的溶解性。通过不断的筛选发现，不加保护剂或者是加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种盐酸阿霉素磁性纳米粒的制备方法，其特征是：具体步骤如下:(1)将纳米嵌段聚合物聚乙二醇‑聚乳酸溶解在二甲基甲酰胺中，制成溶液A；(2)将盐酸阿霉素溶解在二甲基甲酰胺中，制成溶液B；(3)向B溶液中加入三乙胺，将盐酸阿霉素去离子化，超声，溶解；(4)将四氧化三铁粉末溶解在四氢呋喃中，超声，制成溶液C；(5)在搅拌条件下，将去离子化的B溶液缓慢滴加到A溶液中；(6)在避光的条件下搅拌，使盐酸阿霉素和纳米嵌段混合均匀，有机溶剂挥发，得到载药纳米胶束；(7)将C溶液缓慢滴加到步骤(6)的载药纳米胶束中，搅拌均匀；(8)透析即得到磁性载药纳米胶束；(9)向透析好的纳米胶束中加入冻干保护剂质量分数为2.5％的F‑68，得到磁性载药纳米粒；所述原料，纳米嵌段聚合物：盐酸阿霉素：四氧化三铁粉末的质量比为2：1：1，所述盐酸阿霉素与三乙胺的用量比为10:20(mg：ul)。

【技术特征摘要】
1.一种盐酸阿霉素磁性纳米粒的制备方法，其特征是：具体步骤如下:(1)将纳米嵌段聚合物聚乙二醇-聚乳酸溶解在二甲基甲酰胺中，制成溶液A；(2)将盐酸阿霉素溶解在二甲基甲酰胺中，制成溶液B；(3)向B溶液中加入三乙胺，将盐酸阿霉素去离子化，超声，溶解；(4)将四氧化三铁粉末溶解在四氢呋喃中，超声，制成溶液C；(5)在搅拌条件下，将去离子化的B溶液缓慢滴加到A溶液中；(6)在避光的条件下搅拌，使盐酸阿霉素和纳米嵌段混合均匀，有机溶剂挥发，得到载药纳米胶束；(7)将C溶液缓慢滴加到步骤(6)的载药纳米胶束中，搅拌均匀；(8)透析即得到磁性载药纳米胶束；(9)向透析好的纳米胶束中加入冻干保护剂质量分数为2.5％的F-68，得到磁性载药纳米粒；所述原料，纳米嵌段聚合物：盐酸阿霉素：四氧化三铁粉末的质量比为2：1：1，所述盐酸阿霉素与三乙胺的用量比为10:20(mg：ul)。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征是：所述步骤(1)中聚乙二醇-聚乳酸的分子量为10000-13000，聚合物中乙二醇：乳酸单体的摩尔比...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁在君，宋坤，孔北华，姚舒，苑存忠，
申请(专利权)人：山东大学齐鲁医院，
类型：发明
国别省市：山东;37