本实用新型专利技术涉及一种双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其特征在于：包括密闭式外管(12)和密闭式内管(5)，密闭式内管(5)设有内管腔(1)和内过滤系统(6)，密闭式外管(12)设有外管腔(10)和外过滤系统(13)，密闭式内管(5)位于外管腔(10)中，卵子或胚胎(3)放置在内管腔(1)中，外部液氮依次通过外过滤系统(13)、内过滤系统(6)除菌后将卵子或胚胎(3)进行冷冻。本实用新型专利技术充分利用了液氮无菌过滤系统以及多次过滤的方式，大大提高了卵子和胚胎冷冻的安全性。
【技术实现步骤摘要】
本技术涉及医学与生物工程
，具体涉及一种双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其利用无菌过滤系统，用于无菌低温冷冻保存卵子或胚胎。
技术介绍
人类的卵子和胚胎的冷冻保存已经是人类辅助生殖
中一个重要部分。在过去这二十年中，冷冻保存技术的发展亦可反映人类辅助生殖技术的发展程度，现在的冷冻技术已可用在冷冻保存卵子和不同时期的胚胎，尤其是玻璃化冷冻技术，已经取代传统慢术冷冻法，而成为冷冻技术的最优选择，甚而将此技术运用在高难度的卵子、卵巢组织和人类胚胎干细胞的冷冻上。无论是卵子冷冻还是胚胎冷冻保存，都需要一个物理载体，通常所说的载杆或麦管等。目前生殖医学中心采用的卵子或胚胎冷冻系统，如载杆多为开发式，即胚胎直接裸露在未经过滤的普通液氮中，使得液氮中的病原体可能对卵子或胚胎造成潜在的污染。如开放式冷冻载体(cryotop)、冷冻环(cryoloop)、开放式玻璃微细管(GMP)、开放式拉长麦管(OPS)、电子显微镜铜网等。这些类型的冷冻载体，如日本KITAZATO公司采用的冷冻载杆，其管内和管外均为有污染的液氮，含有胚胎的溶液被直接暴露于液氮中，该方法并不能完全消除在胚胎冻存期间的交叉感染风险。即使有部分厂家设计和生产了半封闭式的冷冻装置，但未考虑过液氮过滤，只是将卵子或胚胎置入一个封闭的环境中，隔绝了胚胎与液氮罐中其他含有毒物质液氮的接触，加拿大JY公司，这种冷冻管内的液氮仍然是存在污染的。
技术实现思路
本技术设计了一种双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其解决的技术问题是目前生殖医学中心采用的卵子或胚胎冷冻系统多为开发式，即胚胎直接裸露在未经过滤的普通液氮中，使得液氮中的病原体可能对卵子或胚胎造成潜在的污染。为了解决上述存在的技术问题，本技术采用了以下方案：一种双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其特征在于：包括密闭式外管(12)和密闭式内管(5)，密闭式内管(5)设有内管腔(1)和内过滤系统(6)，密闭式外管(12)设有外管腔(10)和外过滤系统(13)，密闭式内管(5)位于外管腔(10)中，卵子或胚胎(3)放置在内管腔(1)中，外部液氮依次通过外过滤系统(13)、内过滤系统(6)除菌后将卵子或胚胎(3)进行冷冻。进一步，密闭式内管(5)一端通过内载杆(4)进行密闭，内载杆(4)上设有卵子或胚胎放置点(2)，密闭式内管(5)另一端通过内金属圈(7)进行密闭，内金属圈(7)内侧设有内过滤系统(6)，内金属圈(7)上开有内管腔液氮入口(9)，进入内管腔液氮入口(9)的液氮通过内过滤系统(6)后最终进入内管腔(1)中。进一步，所述内载杆(4)一端较细，另一端较粗；卵子或胚胎放置点(2)位于较细端上，较粗端与内套管端部开口(8)进行密封连接。进一步，所述内过滤系统(6)为无菌滤膜柱或无菌滤柱。进一步，密闭式外管(12)一端通过外杆栓(11)进行密闭，密闭式外管(12)另一端通过外金属圈(14)进行密闭，外金属圈(14)上内侧设有外过滤系统(13)，外金属圈(14)上开有外管腔液氮入口(16)，进入外管腔液氮入口(16)的液氮通过外过滤系统(13)后最终进入外管腔(10)中。进一步，所述外过滤系统(13)为无菌滤膜柱或无菌滤柱。进一步，所述卵子或胚胎来源于哺乳动物。进一步，所述哺乳动物为人、小鼠、大鼠、兔、羊、狗、猫或牛。该双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置具有以下有益效果：(1)本技术充分利用了液氮无菌过滤系统以及多次过滤的方式，大大提高了卵子和胚胎冷冻的安全性。(2)本技术利用过滤系统过滤液氮，使卵子或胚胎处于无菌保存的环境中，且不影响玻璃化冷冻过程中的温度速率，大大降低了卵子或胚胎冷冻保存过程中污染的可能性。附图说明图1：本技术双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置结构示意图。附图标记说明：1-内管腔；2-卵子或胚胎放置点；3-卵子或胚胎；4-内载杆；5-密闭式内管；6-内过滤系统；7-内金属圈；8-内套管端部开口；9-内管腔液氮入口；10-外管腔；11-外杆栓；12-密闭式外管；13-外过滤系统；14-外金属圈；15-外套管端部开口；16-外管腔液氮入口。具体实施方式下面结合图1，对本技术做进一步说明：如图1所示，本技术所述一种双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，是利用无菌过滤系统，用于低温无菌冷冻保存卵子或胚胎。一种双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，包括密闭式外管12和密闭式内管5，密闭式外管12和密闭式内管5均有滤膜或滤柱，以确保液氮无菌过滤后进入官腔。密闭式内管5包括内载杆4和内管腔1。内载杆4为实体，前粗后细，变细的后端含有卵子或胚胎放置点2。密闭式内管5为管道状，前端开口，其末端含金属内栓(金属内圈)和无菌滤膜(无菌滤柱)，内载杆4装载胚胎后插入内管腔1，两者结合形成密闭式内管5。再插
入液氮后，管腔的超快速降温形成负压状态，液氮借助负压经内管的无菌滤膜或无菌滤柱快速进入内管腔1，以保证进入的液氮为无菌状态，同时促使胚胎形成玻璃化冷冻。密闭式外管12体积较密闭式内管粗大，可容纳密闭式内管5置入其内。密闭式外管12包括外杆栓11和外管腔10，外管腔10末端含金属内栓(金属内圈)和滤膜(滤柱)，外杆栓11插入外管腔10两者结合使得管腔为密闭状，密闭式外管12置入液氮后，液氮仅能通过滤膜(滤柱)进出外管腔10，确保密闭外管腔10的无菌状态。卵子或胚胎来源于哺乳动物，包括人、小鼠、大鼠、兔、羊、狗、猫、牛等。具体实施例，本技术的无菌保存技术优选于开放式或半封闭式冷冻保存装置：实施例1：1、将利用gamma射线灭菌法对，对本技术双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置进行灭菌；2、将液氮倾倒至一小容器中；3、将密闭式外管12插液氮中，保持外套管管口部分和外杆栓11都位于在液氮之外，并保持倾斜状；4、3分钟后，待液氮经外管下方的外过滤系统13进入外管腔10，拔出外杆栓11；5、将密闭式内管5插入密闭式外管12内；6、3分钟后，液氮经密闭式内管5下方的内过滤系统6进入内管腔1；7、利用无菌镊子将内管夹出，并置入细菌培养基，37摄氏度培养48小时，观察细菌生长情况：8、同样对商业化的开放式和半封闭式冷冻装置进行处理，即直接将其暴露在液氮中，然置入细菌培养基进行细菌培养；9、结果如下：实施例2：1、将胚胎玻璃化冷冻液从冰箱中取出，置于室温平衡5分钟；2、在平皿中制作冷冻液ES液小滴和VS液小滴；3、将双封闭系统玻璃化冷冻装置的密闭式外管12置入液氮中平衡；4、将胚胎从培养基中转移至ES液中平衡5分钟；5、再将培养从ES液中转移至VS液中30秒；6、将胚胎迅速转移至双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置的密闭式内管5的胚胎放置点；7、密闭式内管5进行密闭后，放入液氮中的密闭式外管12内；8、将外杆栓11封闭密闭式外管12；9、将整个装置转移至液氮中长期保存。上面结合附图对本技术进行了示例性的描述，显然本技术的实现并不受上述方式的限制，只要采用了本技术的方法构思和技术方案进行的各种改进，或未经改进将本技术的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本技术的保护范围内。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其特征在于：包括密闭式外管(12)和密闭式内管(5)，密闭式内管(5)设有内管腔(1)和内过滤系统(6)，密闭式外管(12)设有外管腔(10)和外过滤系统(13)，密闭式内管(5)位于外管腔(10)中，卵子或胚胎(3)放置在内管腔(1)中，外部液氮依次通过外过滤系统(13)、内过滤系统(6)除菌后将卵子或胚胎(3)进行冷冻。
【技术特征摘要】
1.一种双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其特征在于：包括密闭式外管(12)和密闭式内管(5)，密闭式内管(5)设有内管腔(1)和内过滤系统(6)，密闭式外管(12)设有外管腔(10)和外过滤系统(13)，密闭式内管(5)位于外管腔(10)中，卵子或胚胎(3)放置在内管腔(1)中，外部液氮依次通过外过滤系统(13)、内过滤系统(6)除菌后将卵子或胚胎(3)进行冷冻。2.根据权利要求1所述双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其特征在于：密闭式内管(5)一端通过内载杆(4)进行密闭，内载杆(4)上设有卵子或胚胎放置点(2)，密闭式内管(5)另一端通过内金属圈(7)进行密闭，内金属圈(7)内侧设有内过滤系统(6)，内金属圈(7)上开有内管腔液氮入口(9)，进入内管腔液氮入口(9)的液氮通过内过滤系统(6)后最终进入内管腔(1)中。3.根据权利要求2所述双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其特征在于：所述内载杆(4)一端较细，另一端较粗；卵子或胚胎放置点(2)位于较细端上，较粗端与内套管端部开口(8)进行密封连接。4.根据权利要求2或3所述双封闭式卵子或胚胎玻璃化冷冻保存装置，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：薛志刚，曾桥，鹿丽娜，薛金锋，房海燕，
申请(专利权)人：同济大学苏州研究院，浙江星博生物科技股份有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏;32
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