一种细胞免疫佐剂TSA-41的制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，特别是用于疫苗佐剂的一种细胞免疫佐剂TSA‑41的制备方法及应用。本发明专利技术为人工设计一种基因序列SEQ ID NO.1，通过基因工程技术，将SEQ ID NO.1重组基因序列插入大肠杆菌表达系统，通过大肠杆菌高效表达出具有二聚体结构的可溶性重组蛋白TSA‑41，所得TSA‑41重组蛋白通过分离、纯化，最终得到高纯度、高活性的重组蛋白。该重组蛋白作为佐剂可以有效提高细胞免疫类生物疫苗的免疫效果，避免了重组蛋白复性折叠的工艺步骤，大大提高了制备效率，有利于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药
，特别是用于疫苗佐剂的一种细胞免疫佐剂TSA-41的制备方法及应用。
技术介绍
疫苗类的生物制品通过刺激机体免疫系统,产生免疫物质（如抗体）才发挥其功效，在人体内出现体液免疫、细胞免疫或细胞介导免疫。它是人类对事物认识的深入和科技的进步所带来的产物，是人类抵御外界不利因素的威胁、提高健康质量的一大利器。然而，单一疫苗的有效成分在进行免疫提呈的过程中，往往受到各种生物途径的影响，使得其无法实现预期的免疫效果，因此需要一些可增强机体对疫苗抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的佐剂作为辅助。目前，临床上已广泛应用的疫苗佐剂有氢氧化铝等，这些佐剂对很多预防性疫苗的接种起到了很好的免疫增强效果。这些佐剂主要通过改变抗原的物理形状，延长抗原在机体内保留时间；刺激单核吞噬细胞对抗原的提呈能力；刺激淋巴细胞分化，增加扩大免疫应答能力等机制来增强免疫应答。随着疫苗研究的不断深入，传统疫苗通过诱导机体产生中和抗体而激发保护性免疫反应的作用方式已远远不能满足人类健康的需求。许多新型疫苗，如TAA（肿瘤相关抗原）疫苗等，以诱发机体产生特异性细胞免疫反应为手段，从而实现病变细胞在体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞免疫佐剂TSA‑41的制备方法，其特征在于人工设计的一种能在大肠杆菌中表达出具有二聚体结构的可溶性重组蛋白的基因序列SEQ ID NO.1，该基因序列通过下列步骤得到TSA‑41细胞免疫佐剂：(1) 通过基因工程技术将SEQ ID NO.1基因序列插入大肠杆菌表达系统，获得表达SEQ ID NO.1基因的重组大肠杆菌；(2) 将步骤(1)所得重组大肠杆菌进行37℃培养，15‑25℃诱导其表达重组蛋白TSA‑41，获得诱导后的重组大肠杆菌；(3) 将步骤(2)所得诱导后的重组大肠杆菌进行细胞破碎，通过离心获得重组大肠杆菌破碎上清液；(4) 将步骤(3)所得重组大肠杆菌破碎上清液通过镍离子...

【技术特征摘要】
1.一种细胞免疫佐剂TSA-41的制备方法，其特征在于人工设计的一种能在大肠杆菌中表达出具有二聚体结构的可溶性重组蛋白的基因序列SEQ ID NO.1，该基因序列通过下列步骤得到TSA-41细胞免疫佐剂：(1) 通过基因工程技术将SEQ ID NO.1基因序列插入大肠杆菌表达系统，获得表达SEQ ID NO.1基因的重组大肠杆菌；(2) 将步骤(1)所得重组大肠杆菌进行37℃培养，15-25℃诱导其表达重组蛋白TSA-41，获得诱导后的重组大肠杆菌；(3) 将步骤(2)所得诱导后的重组大肠杆菌进行细胞破碎，通过离心获得重组大肠杆菌破碎上清液；(4) 将步骤(3)所得重组大肠杆菌破碎上清液通过镍离子亲和层析柱进行分离纯化，得到TSA-41重组蛋白初步纯化液；(5) 将步骤(4)所得TSA-41重组蛋白初步纯化液通过凝胶排...

【专利技术属性】
技术研发人员：高孟，高丽美，朱赟，罗永能，吴洁，陈刚，庄昉成，毛子安，毛江森，
申请(专利权)人：浙江普康生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33