多腔室培养容器以及细胞培养方法技术

本发明专利技术提供一种能够将在多个不同的培养条件下培养出的细胞利用简便的操作转移的培养容器。本发明专利技术制成如下的多腔室培养容器，是对具有透气性的材料进行加工而得的多腔室培养容器(1)，形成两个以上的用于培养细胞的培养室，各培养室(11、12)与至少一个其他的培养室连通，并且具备至少一个用于与多腔室培养容器的外部连通的外部连接部(111、121)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种细胞的培养技术，特别涉及一种能够在多个不同的培养环境、培养条件下培养细胞的细胞培养容器。
技术介绍
近年来，在医药品的生产、基因治疗、再生医疗、免疫疗法等领域中，要求在人工环境下高效地大量培养细胞、组织等。在细胞、组织等的培养的过程中，有时需要多个不同的培养环境、培养条件。另外，有时也要将在多个不同的培养环境、培养条件下培养的细胞在后面的工序中混合。在这些情况下，需要将经过培养的细胞在多个容器间进行转移。但是，当在开放系统进行此种细胞的转移时，会有产生污染的危险，因此在利用手工操作进行细胞的转移的情况下，需要在无菌环境下进行操作。此外，在像这样将细胞在多个容器间进行转移的情况下，溶液有可能溢出，另外必须严格地管理容器的对应关系，存在有处置烦杂的问题。此处，作为能够在细胞的转移或培养液的追加时防止污染的技术，提出过通过将多个培养容器连接而构成封闭系统的细胞培养试剂盒、并使用它来进行细胞培养的方案(参照专利文献1、2)。【特許文献1】：日本特开2007－175028号公报专利文献2：日本特开2005－058103号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的问题但是，即使使用此种细胞培养试剂盒，也无法充分地改善其处置的烦杂性。即，在使用了此种细胞培养试剂盒的情况下，如果所连接的培养容器的数量变多，则会因管路缠绕、或者培养容器错杂而分不清哪个是哪个等，仍然存在有其处置变得烦杂的问题。另外，最近，还提出过使用了自动细胞培养装置的细胞培养方法，然而也存在有将此种包含多个容器的细胞培养试剂盒向自动细胞培养装置中的安装操作非常烦杂的问题。另外，在进行淋巴细胞的培养的情况下，以往一般是向将抗CD3抗体固相化了的烧瓶中加入淋巴细胞而使之活化后，将活化了的淋巴细胞转移到扩增用的培养袋中而进行培养。现在，在技术上，也可以在由具有透气性的膜材料构成的培养袋的内面将抗CD3抗体固相化而制作活化用的培养袋，将其与扩增用的培养袋连接而构成细胞培养试剂盒，使用自动细胞培养装置来进行淋巴细胞的培养。但是，此种活化用的培养袋与烧瓶相比成本相当大，因此无法简单地进行从烧瓶向活化用的培养袋的置换。因而，本专利技术人等进行了深入研究，成功地通过在一个培养袋内形成多个培养室，并将它们连通，而制造出制造成本低、并且操作极为简便的培养容器，从而完成了本专利技术。即，本专利技术的目的在于，提供能够将在多个不同的培养环境、培养条件下培养出的细胞利用简便的操作进行转移的多腔室培养容器、以及使用了该多腔室培养容器的细胞培养方法。用于解决问题的方法为了达成上述目的，本专利技术的多腔室培养容器是对具有透气性的材料进行加工而得的多腔室培养容器，采用了如下的构成，即，形成有两个以上的用于培养细胞的培养室，各培养室与至少一个其他的培养室连通，并且具备至少一个用于与所述多腔室培养容器的外部连通的外部连接部。另外，本专利技术的细胞培养方法是使用了上述的多腔室培养容器的细胞培养方法，采用了如下的方法，即，作为所述多腔室培养容器中的所述培养室，形成用于使淋巴细胞活化的固相化有抗CD3抗体的活化培养室、和用于使经过活化的淋巴细胞扩增的扩增培养室，将淋巴细胞及培养液注入所述活化培养室，在所述活化培养室中使淋巴细胞活化，从所述活化培养室向所述扩增培养室移送经过活化的淋巴细胞及培养液，在所述扩增培养室中使淋巴细胞扩增。此外，本专利技术的细胞培养方法是使用了上述的多腔室培养容器的细胞培养方法，采用了如下的方法，即，作为所述多腔室培养容器中的所述培养室，形成有用于将白血球分离为淋巴细胞和贴壁系细胞而培养贴壁系细胞的贴壁系细胞培养室、用于使淋巴细胞活化的固相化有抗CD3抗体的活化培养室、和用于扩增淋巴细胞的扩增培养室，将从血液分离出的白血球及培养液注入所述贴壁系细胞培养室并静置，使所述白血球中的贴壁系细胞贴附在所述贴壁系细胞培养室内的底面，然后，从所述贴壁系细胞培养室向所述活化培养室，移送所述白血球中的淋巴细胞和培养液，在所述活化培养室中使淋巴细胞活化，向所述贴壁系细胞培养室注入含有诱导成为树状细胞的诱导因子的培养液并培养所述贴壁系细胞，将所述贴壁系细胞诱导成为树状细胞，从所述活化培养室向所述扩增培养室移送经过活化的淋巴细胞及培养液，在所述扩增培养室中使淋巴细胞扩增。专利技术效果根据本专利技术，可以提供能够将在多个不同的培养条件下培养出的细胞利用简便的操作转移的多腔室培养容器、以及使用了该多腔室培养容器的细胞培养方法。附图说明图1是表示本专利技术的第一实施方式的多腔室培养容器的图。图2是表示本专利技术的第二实施方式的多腔室培养容器的图。图3是表示本专利技术的第三实施方式的多腔室培养容器的图。图4是表示使用了本专利技术的第三实施方式的多腔室培养容器的内容物的移送方法的图。图5是表示本专利技术的第四实施方式的多腔室培养容器的图。图6是表示本专利技术的第五实施方式的多腔室培养容器的图。具体实施方式以下，对本专利技术的多腔室培养容器及细胞培养方法的实施方式进行详细说明。[第一实施方式]首先，参照图1，对本专利技术的第一实施方式的多腔室培养容器及细胞培养方法进行说明。本实施方式的多腔室培养容器的特征在于，是对具有透气性的材料进行加工而得的多腔室培养容器，形成有两个以上用于培养细胞的培养室，各培养室与至少一个其他的培养室连通，并且具备至少一个用于与多腔室培养容器的外部连通的外部连接部。具体而言，图1中，多腔室培养容器1作为用于培养细胞的培养区域，具备培养室11和培养室12。在培养室11中，具备用于与多腔室培养容器1的外部连通的外部连接端口111、用于与其他的培养室连通的室间连接端口112、和用于进行取样的取样端口113。虽然未图示，然而外部连接端口111经由管路2与培养液供给容器等连接，被用于向培养室11的培养液的供给等。室间连接端口112经由管路2与培养室12的室间连接端口122连接，被用于将培养室12的内容液向培养室11移送。取样端口113被用于进行在培养室11中经过培养的细胞的取样。在培养室12中，具备用于与多腔室培养容器1的外部连通的外部连接端口121、和用于与其他的培养室连通的室间连接端口122。虽然未图示，然而外部连接端口121经由管路2与细胞供给容器等连接，被用于向培养室12的细胞的注入等。室间连接端口122经由管路2与培养室11的室间连接端口112连接，被用于将培养室12的内容液向培养室11移送。作为形成多腔室培养容器1的材料，需要具有细胞的培养时所必需的透气性。具体而言，优选具有5000ml/m2·day·atm(37℃－80％RH)以上的氧透过率。另外，为了可以看到多腔室培养容器1中的内容物，培养容器材料优选具有透明性。此外，为了实现高细胞增殖效率，培养容器材料优选具有低细胞毒性、低溶出性、以及辐射灭菌适应性。作为满足此种条件的材料，优选聚乙烯系树脂。作为聚乙烯系树脂，例如可以举出聚乙烯、乙烯与α－烯烃的共聚物、乙烯与乙酸乙烯酯的共聚物、使用了乙烯与丙烯酸或甲基丙烯酸共聚物和金属离子的离聚物等。另外，还可以使用聚烯烃、苯乙烯系弹性体、聚酯系热塑性弹性体、硅酮系热塑性弹性体、硅酮树脂等。通过对此种透气性材料进行热封加工或压缩空气成形、真空成形等片成形，就可以制造本实施方式的多腔室培养容器1。本实施方式的多腔室培养容器1的形状没本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多腔室培养容器，其特征在于，对具有透气性的材料进行加工而得，所述多腔室培养容器形成有两个以上的用于培养细胞的培养室，各培养室与至少一个其他的培养室连通，并且具备至少一个用于与所述多腔室培养容器的外部连通的外部连接部。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.05.09 JP 2014-0973771.一种多腔室培养容器，其特征在于，对具有透气性的材料进行加工而得，所述多腔室培养容器形成有两个以上的用于培养细胞的培养室，各培养室与至少一个其他的培养室连通，并且具备至少一个用于与所述多腔室培养容器的外部连通的外部连接部。2.根据权利要求1所述的多腔室培养容器，其特征在于，在所述各培养室中，分别具备用于与所述其他的培养室连通的室间连接部，所述室间连接部之间被使用管路连接。3.根据权利要求1所述的多腔室培养容器，其特征在于，用于将所述各培养室与所述其他的培养室连通的流路，在所述多腔室培养容器内对具有透气性的膜材料进行热封加工而形成。4.根据权利要求1～3中任一项所述的多腔室培养容器，其特征在于，作为所述培养室，至少具备用于使细胞活化的活化培养室、和用于使细胞扩增的扩增培养室。5.根据权利要求3所述的多腔室培养容器，其特征在于，作为所述培养室，具备用于使细胞活化的活化培养室、和用于使细胞扩增的扩增培养室，并且具备用于对细胞进行取样的取样室、和用于回收细胞的回收室，形成有连通所述活化培养室与所述扩增培养室的所述流路，在所述扩增培养室与所述取样室间、以及所述扩增培养室与所述回收室间，分别在所述多腔室培养容器内对具有透气性的膜材料进行热封加工而形成流路。6.根据权利要求5所述的多腔室培养容器，其特征在于，设有用于切掉选自所述各培养室、所述取样室、以及所述回收室中的至少任意一个室的易切断部。7.根据权利要求1～6中任一项所述的多腔室培养容器，其特征在于，在全部或一部分的所述培养室中具备各自不同的培养基材料。8.根据权利要求1～7中任一项所述的多腔室培养容器，其特征在于，所述多腔室培养容器呈近似长方形，在所述多腔室培养容器的一边具备使用管路连接的两个以上的所述室间连接部，以使所述各培养室的具备所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：田中乡史，户谷贵彦，
申请(专利权)人：东洋制罐集团控股株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP