三羟基根皮素糖苷化衍生物和提取方法技术

本发明专利技术公开了三羟基根皮素的糖苷化衍生物和这类化合物的提取方法，三羟基根皮素的糖苷化衍生物包括单糖、双糖和寡糖的糖苷化衍生物，其提取方法包括粗提和进一步分离获得提取物两个部分，最终得到的提取物中三羟基根皮素糖苷化衍生物的纯度高，且该方法成本可控产率可观。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术一般涉及三羟基根皮素糖苷化衍生物和用于提取三羟基根皮素糖苷化衍生物的方法。
技术介绍
研究表明，三羟基根皮素糖苷化衍生物可以有效抑制晚期糖基化终末产物（AGEs）的形成，AGEs是糖与蛋白质结合的一类产物，它可以与人体的各种组织细胞相结合并破坏这些组织细胞，从而导致衰老、糖尿病、阿尔茨海默病、动脉粥样硬化等一系列慢性疾病，而对于AGEs形成的过程进行抑制，可以在一定程度上预防和缓解由AGEs引发的慢性疾病。科学研究证实，一种三羟基根皮素糖苷化衍物（三羟基三叶苷，英文名：Sieboldin）对于AGEs的形成的抑制作用远远优于氨基胍（常用AGEs抑制剂）。但是包括Sieboldin在内的三羟基根皮素糖苷化衍生物在自然界分布较少，大量获得困难，从而限制这类化合物的应用，本专利技术创造性地从植物组织材料中大量的获得三羟基根皮素糖苷化衍生物，从而在源头上解决了这类化合物的应用限制，且获得的三羟基根皮素糖苷化衍生物纯度高，产量可观。
技术实现思路
根据下面详细的说明、附图和权利要求，本专利技术的其他目标、特征和优势是明显的。除非另外定义，否则本文使用的所有技术术语、缩写和科学术语、缩写具有与本专利技术所属领域普通技术人员通常理解相同的含义。虽然类似于或等同于本文描述的三羟基根皮素糖苷化衍生物和三羟基根皮素糖苷化衍生物的提取方法可以用于本专利技术的实践，但是描述了合适的三羟基根皮素糖苷化衍生物和方法，且不期望任何本专利技术中所述的化合物和提取方法限制本专利技术。本专利技术描述了一类三羟基根皮素糖苷化衍生物和这类化合物的提取方法。本专利技术所述的三羟基根皮素糖苷化衍生物具有如下结构：其中R1和R2至少一个为糖苷，R1和R2可以分别为氢（H）、单糖形成的糖苷、双糖形成的糖苷或寡糖形成的糖苷。其中上述单糖至少包括：阿拉伯糖苷（arabinoside）、木糖苷（xyloside）、葡萄糖苷（glucoside），半乳糖苷（galactoside）和鼠李糖苷（rhamnoside），上述二糖至少包括：芸香糖苷（rutinoside），木糖葡萄糖苷（xyloglucoside），桑布双糖苷（sambubioside）和槐糖苷（sophoroside）。本领域普通技术人员应当理解，上述的糖苷与三羟基根皮素形成的糖苷键均包括α构型和β构型两种构型情况，且糖苷均包含D构型和L构型两种构型的糖苷，除非另外标明，否则本文所述的三羟基根皮素糖苷化衍生物均应包含所有合适的构型。具体地，本专利技术所述的三羟基根皮素糖苷化衍生物，其中应含有不少于50%的三羟基根皮素糖苷化衍生物，并且其中可能含有其他多酚类化合物，包含但不限于一种或多种成分，例如根皮苷、三叶苷、儿茶素、绿原酸、花色苷、芦丁及各种槲皮素的糖苷化衍生物和山萘酚的糖苷化衍生物等。特别地，本专利技术所述的提取材料取自苹果属（Malus）植物和石柯属(Lithocarpus)植物，包括原生种、品种和使用任意种通过转基因技术育成的新品种。本文涉及的提取方法包括提取并获得粗提物和进一步分离并得到提取物两个过程。提取并获得粗提物的过程应使用醇的水溶液从经过处理的植物组织材料中进行提取，并提供适宜的温度和压力，以期获得较高的提取效率，提取完毕后应分离液相和固相两个部分，并回收液相组分，获得粗提物。粗提物进一步分离获得含有三羟基根皮素糖苷化衍生物的提取物的过程，应包括液液分配技术、液固分配技术、结晶技术、离心分离技术、冷冻干燥技术、真空干燥技术等本领域普通技术人员熟知的分离技术。最终获得提取物使用高效液相色谱（HPLC）或超高效液相色谱（Ultra-High Performance Liquid Chromatography/Ultra Performance Liquid Chromatography）检测纯度和化合物，使用液相色谱-质谱联用（LC-MS）和核磁共振（NMR）确定组合物中的三羟基根皮素糖苷化衍生物结构。附图说明图1是高效液相检测实施例1中提取物的图谱；图2是高效液相检测实施例2中提取物的图谱。实施例为了使本专利技术的目的、技术方案、优势及创新点更加清楚明白，以下结合附图及实施例对本专利技术进一步详细说明，但实施例并不限制本专利技术。并且，在本专利技术中可以做出多种改进和变型而不偏离本专利技术的精神或范围，这对于本领域技术人员是显而易见的。因此期望本专利技术涵盖在所附权利要求和它们的等同要求的范围内的这些改进和变形。实施例1提取用的原料经过处理后，使用醇的水溶液浸泡，为提高提取率可以使用加热、加压、搅拌、超声等方法，提取完毕将固相与液相分离，并回收液相部分，可使用萃取、减压蒸馏、常温蒸馏、冷冻干燥、加热干燥、离心分离等方法处理液相部分，以获得粗提物，以利于随后的操作。将粗提物使用聚酰胺柱层析和/或凝胶柱层析进一步分离，使用醇的水溶液洗脱，小心的调整醇的水溶液的比例，已获得最佳分离效果，收集含有的三羟基根皮素糖苷化衍生物的组分，并从中回收的三羟基根皮素糖苷化衍生物。将获得的三羟基根皮素糖苷化衍生物使用NMR和LC-MC确定结构，使用HPLC检测纯度，最终确定所得化合物为Sieboldin(CAS: 18777-73-6)，通过核磁共振和质谱确定结构如下： 该化合物的1H NMR和13C NMR数据如下表(500MHz DMSO-d6 )：该实施例的中对于三羟基根皮素糖苷化衍生物的高效液相检测条件如下：使用Inertsil ODS-3色谱柱（5.0ml柱体积，4.6mm×250mm），Inertsil ODS-3保护柱(5.0μm，4.0mm×10mm)，使用岛津公司（shimadzu）SPD-M20A二极管阵列DAD检测器，用于分析的具体条件在下表中:HPLC检测结果如图1所示，结果表明提取物中Sieboldin含量达到99.78%。实施例2获得粗提物的方法同实施例1，得到的粗提物使用制备液相进行进一步分离，制备液相使用十八烷基键合硅胶反相色谱柱，柱长应不小于15cm，使用醇的水溶液作为流动相，流速应不小于2ml/min，为了获得更好的分离效果，可以调节醇的水溶液的比例，收集含有的三羟基根皮素糖苷化衍生物的组分，并从中回收三羟基根皮素糖苷化衍生物。将获得的的三羟基根皮素糖苷化衍生物使用NMR和LC-MC确定结构，使用HPLC检测纯度，最终确定所得化合物为 3-Hydroxyphloretin 2'-xyloglucoside (CAS: 620165-48-2)，通过核磁共振和质谱确定结构如下：该化合物的1H NMR和13C NMR数据如下表(500MHz DMSO-d6 )：该实施例的中对于三羟基根皮素糖苷化衍生物的高效液相检测条件如下：使用Inertsil ODS-3色谱柱（5.0ml柱体积，4.6mm×250mm），Inertsil ODS-3保护柱(5.0μm，4.0mm×10mm)，使用岛津公司（Shimadzu）SPD-M20A二极管阵列DAD检测器，用于分析的具体条件在下表中:HPLC检测结果如图2所示，结果表明提取物中3-Hydroxyphloretin 2'-xyloglucoside含量达到91.05%。上述实施例中提取用原料应当经过适当处理，包括加热、冷冻、干燥等。上述实施例中所述的提取完毕后的分离步本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提取物及其提取方法，该提取物中至少应含有一种三羟基根皮素（3‑Hydroxyphloretin）的糖苷化衍生物，其中三羟基根皮素的糖苷化衍生物具有如下结构：其中R1和R2至少一个为糖苷，R1和R2可以分别为氢（H）、单糖形成的糖苷、双糖形成的糖苷或寡糖形成的糖苷；其中上述单糖的糖苷至少包括下列糖苷的D构型和L构型的异构体：阿拉伯糖苷（arabinoside）、木糖苷（xyloside）、葡萄糖苷（glucoside），半乳糖苷（galactoside）和鼠李糖苷（rhamnoside），上述二糖至少包括下列糖苷及其D构型和L构型的异构体：芸香糖苷（rutinoside），木糖葡萄糖苷（xylolglucoside），桑布双糖苷（sambubioside）和槐糖苷（sophoroside）。

【技术特征摘要】
1.一种提取物及其提取方法，该提取物中至少应含有一种三羟基根皮素（3-Hydroxyphloretin）的糖苷化衍生物，其中三羟基根皮素的糖苷化衍生物具有如下结构：其中R1和R2至少一个为糖苷，R1和R2可以分别为氢（H）、单糖形成的糖苷、双糖形成的糖苷或寡糖形成的糖苷；其中上述单糖的糖苷至少包括下列糖苷的D构型和L构型的异构体：阿拉伯糖苷（arabinoside）、木糖苷（xyloside）、葡萄糖苷（glucoside），半乳糖苷（galactoside）和鼠李糖苷（rhamnoside），上述二糖至少包括下列糖苷及其D构型和L构型的异构体：芸香糖苷（rutinoside），木糖葡萄糖苷（xylolglucoside），桑布双糖苷（sambubioside）和槐糖苷（sophoroside）。2.根据权利要求1所述，提取物所含有的三羟基根皮素的衍生物，R1为氢（H），R2为单糖的糖苷时应有如下的化学结构的一种或多种：根据权利要求1所述，提取物所含有的三羟基根皮素的衍生物，当为R2氢（H），R1为单糖的糖苷时应有如下的化学结构的一种或多种：根据权利要求1所述，提取物所含有的三羟基根皮素的衍生物，当R1为单糖的糖苷， R2为单糖的糖苷时应有如下的化学结构的一种或多种：根据权利要求1所述，提取物所含有的三羟基根皮素的衍生物，R1为氢（H），R2为双糖的糖苷时应有如下的化学结构的一种或多种：根据权利要求1所述，提取物所含有的三羟基根皮素的衍生物，R1为双糖的糖苷，R2为氢（H）时应有如下的化学结构的一种或多种：根据权利要求1至6所述的分子结构，其中的糖苷键均应包含α和β两种构型。3.根据权利要求1所述提取物，其中所述三羟基根皮素的衍生物具有大约50%以上的纯度。4.根据权利要求1所述提取物，其中所述三羟基根皮素的衍生物具有大约75%以...

【专利技术属性】
技术研发人员：李鹏民，肖郑操，
申请(专利权)人：李鹏民，肖郑操，
类型：发明
国别省市：陕西;61