角膜缘干细胞及其培养方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种角膜缘干细胞及其培养方法和应用，其中，该角膜缘干细胞的培养方法包括步骤如下：获取可增殖角膜缘组织；将所述可增殖角膜缘组织加入含FBS和Ca2+的MEM培养基中培养；其中，所述Ca2+在所述含FBS和Ca2+的MEM培养基中的浓度为0.01～0.09mmol/L。本发明专利技术角膜缘干细胞的培养方法可以抑制角膜缘干细胞的分化，避免角膜缘干细胞因分化而产生其他细胞，保证培养得到的角膜缘干细胞的纯度，降低分化程度，从而提高了移植角膜缘干细胞治疗相应眼部疾病的疗效。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及干细胞
，尤其涉及一种角膜缘干细胞及其培养方法和应用。
技术介绍
角膜由外而内依次包括：上皮层、前弹力层(Bowman膜)、基质层、后弹力层(Decemet膜)和内皮层。角膜上皮层具有多层细胞，包括与前弹力层连接的基底层细胞。角膜上皮层具有保护眼球，稳定泪膜，维持角膜透明性等功能，是一种不断自我更新的组织，而且，角膜上皮层的完整性的维持依赖于表浅细胞不断脱落和基底层细胞不断增殖以取代脱落细胞来实现，而上皮细胞持续不断的水平向心运动和垂直向上运动就源于角膜缘基底层干细胞的增殖和分化。角膜缘是角膜和结膜的移行区，角膜缘上皮层多于10层，干细胞存在于角膜缘上皮层的基底层，在保持角膜的生理生化和角膜的营养及完整性的维持、免疫反应中占有重要地位。角膜缘干细胞不仅可以分化、增殖为角膜上皮细胞，更重要的是干细胞像一道屏障，阻止结膜上皮细胞移行至角膜表面，这对于保持角膜的透明性与正常生理功能有着重要的意义。角膜病是我国第二位致盲眼部疾病。随着现代眼科学的发展，角膜缘干细胞缺乏或功能障碍的疾病，如眼表泪液病、无虹膜、化学和热烧伤、辐射损害、Stevens-Johnson综合征、眼本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种角膜缘干细胞的培养方法，其特征在于，包括步骤如下：获取可增殖角膜缘组织；将所述可增殖角膜缘组织加入含FBS和Ca2+的MEM培养基中培养；其中，所述Ca2+在所述含FBS和Ca2+的MEM培养基中的浓度为0.01～0.09mmol/L。

【技术特征摘要】
1.一种角膜缘干细胞的培养方法，其特征在于，包括步骤如下：获取可增殖角膜缘组织；将所述可增殖角膜缘组织加入含FBS和Ca2+的MEM培养基中培养；其中，所述Ca2+在所述含FBS和Ca2+的MEM培养基中的浓度为0.01～0.09mmol/L。2.如权利要求1所述的角膜缘干细胞的培养方法，其特征在于，所述将所述可增殖角膜缘组织加入含FBS和Ca2+的MEM培养基中的步骤之后，还包括步骤如下：向所述含FBS和Ca2+的MEM培养基中加入碱性成纤维细胞生长因子，使所述碱性成纤维细胞生长因子的浓度为1～100ng/ml。3.如权利要求1或2所述的角膜缘干细胞的培养方法，其特征在于，所述获取可增殖角膜缘组织的步骤，包括：获取角膜缘组织；将所述角膜缘组织置于无钙MEM培养基中培养，当所述角膜缘组织的上皮层的基底层细胞和与所述基底层细胞相连的上层细胞出现间隙时，除去所述上层细胞，而获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾宪卓，鲁菲，
申请(专利权)人：深圳爱生再生医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44